IGH nə göstərir? Döş xərçəngi reseptor statusunun immunohistokimyəvi diaqnostikası (PR, ER, ki67, Her2 neu)

İmmunohistokimyəvi tədqiqat onkologiyada bu, xüsusi reagentlərdən istifadə edərək toxuma tədqiqatının bir növüdür antigen-antikor prinsipinə əsasən.

Xüsusi maddələrlə işarələnmiş antikorları ehtiva edən reagentlərdən istifadə edərkən.

Antikor, toxumalarda antigen adlanan müəyyən molekullara bağlanan bir zülaldır, bundan sonra reaksiya baş verir. Əgər belə molekullar yoxdursa, reaksiya da olmayacaq.

Bu xüsusiyyətə əsasən, toxumada bizi maraqlandıran bir molekulun olub-olmadığını mühakimə edə bilərik. Bu, ağ masaya rəngsiz yapışqan çəkməyə bənzəyir. Ağ fonda çılpaq gözlə praktiki olaraq görünməzdir, lakin masanın üzərinə incə qum tökən kimi yapışqan qum dənələri sayəsində yapışqan görünür.

Qaydalara görə xərçəng üçün immunohistokimyəvi tədqiqat həmişə xüsusi laboratoriyada aparılır. Onu həyata keçirmək üçün əməliyyat nəticəsində əldə edilən şiş toxuması lazımdır.

Şiş hüceyrələrində müxtəlif tətbiq sahələrinin, məsələn, estrogen reseptorlarının (ER) və progesteron reseptorlarının (PR) mövcudluğunu müəyyən etmək üçün immunohistokimyəvi tədqiqatlar aparılır. Ki-67 indeksini (şiş hüceyrələrinin proliferativ aktivliyi indeksi), Her2neu zülalının həddindən artıq ifadəsini, VEGF (damar artım faktoru), p53 müəyyən etmək üçün immunohistokimya da aparılır.

Xərçəng üçün immunohistokimyəvi tədqiqat bədxassəli şişin müalicəsində hansı dərmanların istifadə oluna biləcəyini və onun hansı dərman növlərinə həssas olduğunu başa düşmək üçün həyata keçirilir.

Ən ümumi analiz, tərəfindən müəyyən edilir immunohistokimyəvi tədqiqat, bu şişdə hormonlara reseptor həssaslığının olmasıdır.

1. ER / PR (Estrogen və progesteron reseptorları, ER-estrogen reseptoru, PR-progesteron reseptoru)

ER və PR- şiş hüceyrələrinin səthindəki protein reseptorları.

İnsan bədəni daim hormonlar istehsal edir - estrogen və progesteron. Bu hormonlar təsir göstərir ER və PRşiş hüceyrələrinin böyüməsinin stimullaşdırılmasına səbəb olan reseptorlar.

Estrogen və Progesteron reseptorlarının təyini şişin hormonal terapiyaya həssaslığını təyin edən ən vacib aspektlərdən biridir.

Çox vaxt ER/PR reseptorlarının olması ilə müəyyən edilir. Onların mövcudluğu standart müalicə üsullarına əlavə olaraq tətbiq etməyə imkan verir hormon terapiyası.

Hormon-müsbət döş xərçəngi üçün aşağıdakı dərmanlar təyin edilir: Tamosxifen, Exemestan (Aromasin), Letrozol (Femara), Anastrazol (Arimidex), Hexestrol (Sinestrol) və başqaları.Həmçinin hesab edilir ki, hormondan asılı döş xərçəngi sakit gedişi və nadir hal ilə xarakterizə olunur.

Şiş hüceyrələrinin hormonal terapiyaya həssaslığı bal ilə ifadə edilir 0 əvvəl 10 . dən başlayaraq şiş hormona bağlı sayılır 2 xal. və müalicəyə hormonal terapiyanın əlavə edilməsini tələb edir.

2. Her2Neu (İngilis dilindən. Human Epidermal Growth Factor Receptor 2)

Her2Neu xərçəng hüceyrələrinin epidermal böyümə faktoru üçün reseptordur. Bu, hüceyrənin membran reseptorlarına təsir edən və onun bölünməsini artıran bir gendir.

Bəzi şişlərdə (əksər hallarda, ) həddindən artıq ifadə (aktivliyin artması) var. Her2Neu, şiş hüceyrəsinin sürətlə bölünməsinə və onun aktivliyinin artmasına səbəb olur.

Hormonal terapiyanın effektivliyi də azalır. Bu səbəblə şişlərlə Her2neu müsbət status aqressiv gedişi ilə seçilir.

Bir şişdə Her2neu geninin varlığını təyin etmək üçün iki üsul var:

İmmunohistokimyəvi tədqiqatların nəticələri nöqtələrlə ifadə edilir:

• 0-1 o deməkdir ki, şiş Her2neu həddindən artıq ifadə etmir.
• 3 şişin Her2neu həddindən artıq ifadə etdiyini bildirir.

2. FISH metodu (Fluorescence in situ hibridizasiya)

Zülalları aşkar edən immunohistokimyəvi tədqiqatlardan fərqli olaraq, BALIQ üsulu Her2neu zülallarını kodlayan genlərin olması müəyyən edilir. Onların mövcudluğundan asılı olaraq, həddindən artıq ifadə müəyyən edilir Her2neu.

Döş şişində Her2neu reseptorunun həddindən artıq ifadəsinin müəyyən edilməsi sonrakı müalicə üçün çox vacibdir.

Müasir onkologiyada həddindən artıq ifadə Her2neu müalicəyə inhibitorların əlavə edilməsinin zəruri olub olmadığını anlamaq üçün müəyyən edilir Her2neu. Trastuzumab (Herceptin), Pertuzumab (Perjeta), Trastuzumab-emtansine (Kadcyla), Beyodaime (Trastuzumab + Pertuzumab) Her2Neu reseptorunun həddindən artıq ekspressiyası olan şişlərin müalicəsində fəal və uğurla istifadə olunur. Bu dərmanlar xüsusi olaraq Her2neu reseptorlarını bloklayır, bununla da şiş hüceyrələrinin aktiv böyüməsini dayandırır və onların kemoterapiya həssaslığını artırır. Her2neu müsbət şişlərinin müalicəsində standart kemoterapiyaya hədəflənmiş terapiyanın əlavə edilməsi ümumi sağ qalma müddətini və antitümör müalicəsinin nəticəsini əhəmiyyətli dərəcədə artırır.

3. Ki-67

Ki-67şiş hüceyrəsinin proliferativ fəaliyyətinin göstəricisidir. Bu parametr faizlə qiymətləndirilir və şiş hüceyrələrinin neçə faizinin aktiv şəkildə bölündüyünü göstərir.

Əgər Ki-67 15% -dən az, şiş bir göstərici ilə bir az aqressiv hesab olunur Ki-67 30-dan 50% -ə qədər şiş aqressiv hesab olunur və nə vaxt Ki-67 50%-dən yuxarı şiş yüksək aqressivdir.

Həmçinin Ki-67şiş xəstəliyinin gedişi və kemoterapi müalicəsinə şiş reaksiyası üçün proqnostik faktordur. Bu sadə bir şəkildə müəyyən edilir: göstərici nə qədər aşağıdır Ki-67, şiş kemoterapi müalicəsinə daha pis cavab verir. Və əksinə - göstərici daha yüksəkdir Ki-67, şiş kemoterapiyaya daha yaxşı cavab verəcəkdir.

4. p53 zülalı

p53 protein hüceyrə dövranını tənzimləyən transkripsiya faktorudur. Sürətlə bölünən hüceyrələrdə konsentrasiyanın artması aşkar edilmişdir. p53 protein yavaş bölünən hüceyrələrlə müqayisədə, bu, onların onkogenlik riskinin yüksək olması ilə əlaqədardır.

p53 protein bədənimizdə bədxassəli şişlərin əmələ gəlməsinin qarşısını alır. Normal, anti-onkogen səh53 hərəkətsiz vəziyyətdədir və sağlam hüceyrədə DNT zədəsi görünəndə aktivləşir.

Funksiya p53 protein potensial onkogen olan hüceyrələrin çıxarılmasından ibarətdir. Buna induksiya edilmiş apoptoz, potensial təhlükəli hüceyrənin məhv edilməsi deyilir.

İmmunohistokimyəvi tədqiqatlar səviyyəsinin artdığını göstərdi p53 protein bədxassəli hüceyrələrin 50% -ində aşkar edilmişdir ki, bu da onların maneəsiz bölünməsinə və apoptozun (məhv) qarşısını almasına imkan verir.

Kəmiyyət p53 protein, göstəriciyə əlavə olaraq müəyyən edilir Ki67,şişin nə qədər aqressiv olduğunu başa düşmək və xəstəliyin sonrakı gedişatını müəyyən etmək üçün. Əgər səviyyə p53 protein yüksək, bu, şişin aqressiv olmadığını və metastaza və sürətli böyüməyə meylli olmadığını bildirir. Bununla belə, göstərici p53 protein aşağı, yəni şiş aqressivdir və ətrafdakı toxumalara sürətlə böyüməyə meyllidir və metastaz.

5. VEGF (Damar Endotelial Böyümə Faktoru)

VEGF mövcud damar sistemində yeni damarların aktiv böyüməsi üçün hüceyrələr tərəfindən istehsal edilən siqnal zülalıdır.

VEGF zülalının bir neçə növü var və hər biri xüsusi VEGFR (Damar endotelial böyümə faktoru reseptoru) üzərində fəaliyyət göstərir. Şişin aktiv şəkildə bölünməsi üçün qidalanma lazımdır və bunun üçün bu qidanın axacağı damarlar lazımdır. Məhz bu səbəbdən şiş hüceyrələrində VEGF zülalının artan tərkibi var - damar şəbəkələrini tez qurmaq üçün.

Mövcudluq VEGF zülalı kimi dərmanlardan istifadə etmə ehtimalının şişdə olduğunu göstərir Bevacizumab (Avastin), Ramucirumab (Ciramza), Aflibercept (Zaltrap). Onlar şişin damar şəbəkəsini yenidən qurur və bununla da onu qidalanmadan məhrum edirlər.

6. PD-1, PDL-1 və PDL-2 zülallarının ifadəsinin təyini

İmmunoterapiyanın göstərildiyi xəstələri seçmək üçün PD-1 ifadəsinin və onun PDL-1 və PDL-2 liqandının mövcudluğu müəyyən edilir. floresan in situ hibridləşdirmə (FISH) istifadə edərək. PD-1 və onun liqand PDL-1 və PDL-2 ifadəsinin olması halında dərmanlarla immunoterapiyanın istifadəsi göstərilir. Pembrolizumab (Keytruda), Nivolumab (Opdivo), Atezolizumab (Tecentriq).

Müasir onkologiyada immunohistokimyəvi tədqiqatlar çox mühüm rol oynayır, çünki bu tədqiqatın köməyi ilə onkoloqlar şişdə müəyyən amillərin mövcudluğunu müəyyənləşdirirlər ki, bu da onlara xəstə üçün sonrakı müalicəni bacarıqlı və adekvat şəkildə formalaşdırmağa və xəstəliyin proqnozu haqqında danışmağa imkan verir. xəstəlik.

Alternativ adlar: IHC, İngilis dili: Immunohistochemistry və ya IHC.

İmmunohistokimyəvi tədqiqat şiş xəstəliklərinin diaqnozu üçün xüsusi bir üsuldur. Metodun mahiyyəti spesifik antikorlarla əvvəlcədən müalicə edilmiş toxumaların mikroskop şəkillərini öyrənməkdir.

Hazırda demək olar ki, bütün şişlərə qarşı antikorlar yaradılmışdır.

İmmunohistokimyəvi tədqiqatlardan istifadə edərək aşağıdakılar aparılır:

İmmunohistokimyəvi müayinəyə göstərişlər

Bu üsuldan istifadə etməklə istənilən toxuma müayinə oluna bilər. Prosedurun əsas göstəricisi şiş prosesinin şübhəsidir.

IHC üçün aşağıdakı göstəricilər müəyyən edilmişdir:

Əks göstərişlər

Bu tədqiqat metoduna heç bir əks göstəriş yoxdur. Yalnız biopsiya materialını əldə etmək mümkün olmadıqda həyata keçirmək mümkün deyil.

İmmunohistokimyəvi tədqiqat necə aparılır?

Tədqiqatın özü dörd mərhələdən ibarətdir:

Tədqiqatın nəticələri 7 gündən sonra (standart tədqiqatla - "kiçik panel") və ya 15 gündən sonra (genişlənmiş tədqiqat - "böyük panel") məlum olur.

Nəticələrin təfsiri

Nümunələr IHC-də xüsusi təlim keçmiş bir patoloq tərəfindən araşdırılır. Sonda həkim toxumanın tropizminin (yaxınlığının) hansı anticisimlər üçün təyin olunduğunu qeyd edir. Bundan əlavə, nümunənin morfoloji quruluşu təsvir olunur - hansı hüceyrələr və hansı miqdarda mövcuddur.

Müəyyən standart şiş antikorları üçün toxuma yaxınlığının müəyyən edilməsi xüsusi bir xərçəng növünü göstərir.

əlavə informasiya

İmmunohistokimyəvi müayinə hazırda şiş xəstəliklərinin diaqnostikasında ən dəqiq üsuldur. Bu, 99% dəqiqliklə yekun diaqnoz qoymağa, şişin növünü təyin etməyə və onun əsas yerini müəyyən etməyə imkan verir.

Ədəbiyyat:

Onkoloji xəstəliklər insanların böyük əksəriyyəti üçün ən dəhşətli reallıqdır. Ancaq ciddi bir problemi vaxtında müəyyən etmək və ondan effektiv şəkildə qurtulmağa başlamaq üçün xüsusi müayinələr aparmaq lazımdır. Onlardan biri IHC-öyrənmək.

Genlər, reseptorlar və böyümə faktorları

Hüceyrələri aktiv şəkildə bölünməyə, çox vaxt onkoloji oriyentasiyaya malik şişlər əmələ gətirməyə məcbur edən dəqiq səbəblər hələ də elmə məlum deyil. Ancaq hüceyrə böyüməsinin necə baş verdiyi artıq kifayət qədər yaxşı öyrənilmişdir. Toxuma hüceyrələri mürəkkəb bir quruluşa malikdir. Hüceyrə səthində HER-2 adlanan reseptorlar var. Bədənin əmrlərini dinləyən bir növ antena kimi xidmət edirlər. Yeri gəlmişkən, HER-2 abbreviaturası ingiliscə ifadədən yaranıb insan epidermal böyümə faktoru reseptoru 2, hərfi mənada “insan reseptoru” deməkdir. Bu reseptorlar hüceyrəni bölünməyə, böyüməyə və ya özünü bərpa etməyə məcbur edir.

Reseptor fəaliyyəti və şiş

Təəssüf ki, insan bədəni həmişə uğursuzluqlar və xəstəliklər olmadan ideal şəkildə işləmir. Elm bunun səbəbini dəqiq bilməsə də, HER-2 reseptorları aktiv şəkildə “bölün və çoxalın” əmrlərini almağa başlayır. Və bu hüceyrə elementləri çox təsirli olduğundan, şiş meydana gətirərək hüceyrələri aktiv şəkildə bölünməyə məcbur edirlər. Yalnız tibbi müayinələr, o cümlədən IHC - tədqiqatlar şişin vəziyyətini, həmçinin müalicə və xəstənin həyatı üçün proqnozu müəyyən etməyə imkan verir.

Şiş geninin vəziyyəti

Müasir tibbdə onkoloji formasiyalar hormonal terapiyanın təsirinin vəziyyəti ilə müəyyən edilir. mənfi (mənfi) ola bilər və IHC neoplazmanın xarakterini təyin etməyə kömək edir öyrənmək. İmmunohistokimya nəyi göstərir? Bu tədqiqat, neoplazmanın hormonal asılılığını - Hercept statusunu təyin etməyə kömək edir, bu da effektiv nəticə əldə etmək üçün düzgün müalicə metodunu seçmək deməkdir.

Mənfi və müsbət

Bir şişin hormonal hersept statusunun "müsbət" və ya "mənfi" adlandırılması səlahiyyətli bir həkimə çox şey izah edəcəkdir. Ancaq bu təriflərin özləri duyğulara istinad etmir, çünki sadə bir layman ICH tədqiqatı haqqında ilk dəfə eşidəndə düşünə bilər. Aşkar edilmiş müsbət hercept statusu bu xərçəng növünün təbiətdə daha aqressiv olduğunu, daha sürətli inkişaf etdiyini, metastaz yolu ilə bütün bədənə yayıldığını göstərir. Ancaq eyni zamanda, belə bir bədxassəli şişin müəyyən növ dərmanlara cavab vermə ehtimalı yüksəkdir. Şişin mənfi Hercept statusu sizə şişin yavaş inkişaf etdiyini söyləyəcək, lakin onun üçün hələ də adekvat dərman müalicəsi yoxdur.

İmmunohistokimya - bu nədir?

Qadınlar arasında ən çox rast gəlinən xərçənglərdən biri də döş xərçəngidir. IHC tədqiqatı şişin növünü təyin etməyə və mövcud vəziyyətə uyğun olaraq müalicəni seçməyə kömək edir. İmmunohistokimya xüsusi bir boyama maddəsi istifadə edərək biopsiya nümunəsidir (biopsiya zamanı götürülən biomaterial). Bu maddə HER-2 reseptorlarını ləkələyir və “anormal” hüceyrənin görünüşünə və inkişafına təsir edən reseptorların sayı nə qədər çox olarsa, öyrənilən biomaterialın rəngi bir o qədər parlaq olur.

Şişin vəziyyəti necə müəyyən edilir?

Hercept statusunu təyin etmək üçün laboratoriya müayinəsi zamanı ləkələnmiş biomaterial vizual müayinəyə məruz qalır. Bu məqsədlə, 0-dan 3+ arasında bir gradient rəngə malik olan xüsusi bir şkala əlavə olunur. Bu üsul xəstəni daha da istiqamətləndirməsi lazım olan 4 əsas həddi ayırmağa imkan verir. Görünür - daha sadə nədir? Tədqiq olunan toxumaları xüsusi maddədən istifadə edərək boyayın, mikroskop altına qoyun, diqqətlə araşdırın, gördüklərinizi nəzarət rəng nümunələri ilə müqayisə edin və şişin hersept statusunu təyin edin. Amma burada insan faktoru, işıqlandırma xüsusiyyətləri və s. böyük rol oynayır.

IHC araşdırması necə aparılır?

Xərçəng şübhəsi varsa, həyata keçirilir döş müayinəsi. Transkript yalnız dörd həddi ehtiva edir. Ancaq problem ondadır ki, miqyasda 1+ və 2+ olacaq orta iki dəyər başqa bir metoddan istifadə edərək əlavə araşdırma tələb edən qeyri-müəyyən bir nəticə təklif edir. Yəni, IHC- tədqiqat bir neoplazmanın hersept statusunu müəyyən etmək üçün ən mübahisəli üsuldur. Bundan əlavə, tədqiqatın nəticəsi, artıq qeyd edildiyi kimi, insan amili və xarici şəraitdən fəal şəkildə təsirlənir. Yeganə odur ki, iki ekstremal nəticə ən dəqiq müəyyən edilir - mənfi 0 (şiş mənfi hercept statusuna malikdir) və 3+ (şişin hormonal vəziyyəti müsbətdir).

Qadın hormonları və şişlər

Müasir tibbin dediyi kimi, qadın cinsiyyət orqanlarının şişlərinin əksəriyyəti bədənin hormonal səviyyəsindən asılıdır. Onların inkişafına qadın cinsi hormonları - progesteron və estrogen fəal şəkildə təsir göstərir. Bu hormonların reseptorları xərçəngin əmələ gəlməsini və inkişafını təyin edir. Müəyyən edilmiş hormonal asılılıq, sonrakı həyat proqnozu ilə müalicə rejimini olduqca aydın şəkildə təyin etməyə imkan verir. Bundan əlavə, bu reseptorlar təkcə süd vəzi xərçəngində deyil, həm də qadın sonsuzluğu, endometrioz və cinsiyyət orqanlarının - uşaqlıq, yumurtalıq, uşaqlıq boynu xərçəngi kimi ciddi problemlərdə də rol oynayır. IHC zamanı müəyyən edilən şişin Hercept statusu endometriumun öyrənilməsi, məsələn, hər bir konkret vəziyyətdə dərmanların seçilməsi ilə lazımsız təcrübələr olmadan adekvat nəticə əldə etməyə kömək edəcək dərmanlarla müalicəni təyin etməyə imkan verəcəkdir.

Sonsuzluq varsa

Sonsuzluq bir çox müasir ailələr üçün böyük problemdir. Elmi tibb müəssisələri tərəfindən aparılan tədqiqatlar göstərdi ki, kifayət qədər çox hallarda sonsuzluq endometriumda - uşaqlıq boşluğunu əhatə edən epitel təbəqəsində hormonal səviyyələrin çatışmazlığından qaynaqlanır. IHC-ni müəyyən etməyə imkan verən Hercept statusudur. endometrial reseptivliyin öyrənilməsi. Qadın cinsi hormonları yumurtanın formalaşması, onun mayalanması, embrionun uşaqlıq boşluğuna implantasiyası, həmçinin sonrakı hamiləlik və doğuş prosesində aktiv yerlərdir. Endometriumun ICG tədqiqi, artıq dediyimiz kimi, endometrial hüceyrələrin estrogen və progesterona olan hercept statusunu müəyyən etməyə və əldə edilən nəticələrə uyğun olaraq qadın üçün düzgün müalicəni seçməyə imkan verir.

Lenfomanın diaqnozu

Onkoloji xəstəliklər bəşəriyyətin bəlasıdır. Baxmayaraq ki, müasir farmakologiya və texniki inkişaflar bu xəstəlikləri müalicə etməyə imkan verir. Ancaq burada, xüsusən də xəstəliyin ilkin mərhələsində diaqnoz çox vacibdir. Limfa xərçəngi olduqca yaygın bir problemdir. Lenfoma üçün IHC tədqiqatı, daha sonra adekvat terapiya təyin etmək üçün dəqiq diaqnoz qoymağın yollarından biridir. Bu tədqiqat limfatik mayenin və ya hematopoietik sistemin toxumasının biopsiyası üzərində aparılır. Tədqiqat üçün götürülən material şiş markerlərini təyin etməyə kömək edən xüsusi maddələrlə boyanır. Təəssüf ki, bu tip tədqiqatlar qeyri-kamildir və əksər hallarda digər diaqnostik üsullarla tamamlanır. Bundan əlavə, çox vaxt problemə səbəb olan limfa sisteminin özü deyil. Limfa üzərində IHC araşdırması bunu aşkar edə bilər.

IHC təhlili - vaxtında bilik

Sağlamlıq problemləri vaxtında aşkar edilməli və müəyyən edilməlidir. Ona görə də hər cür müayinə üsullarına və təhlillərə ehtiyac var. IHC-tədqiqat müxtəlif orqanların toxumalarında şişlərin və ya digər problemlərin diaqnozu üçün ən çox yayılmış üsullardan biridir. Problemi müəyyən etmək üçün götürülən material üzərində IHC araşdırması aparılır - sözdə biopsiya. Material hər bir xüsusi məqsəd üçün xüsusi maddələrlə boyanır və histoloq tərəfindən aparılan vizual müqayisənin köməyi ilə müəyyən bir problemi göstərən şiş markerləri qurulur. İmmunohistokimyəvi tədqiqatın qeyri-kamilliyi ondan ibarətdir ki, material kifayət qədər ola bilməz, insan faktoru rol oynayacaq və ya xarici səbəblər problemin dəqiq mənzərəsini yaratmağa imkan verməyəcək. Hər halda, bir xəstəliyin, xüsusən də onkoloji xəstəliyin adekvat diaqnozu üçün bir sıra müayinələr aparmaq lazımdır, burada addımlardan biri IHC- olacaq.öyrənmək. Xərçəngdə necədir? hər hansı orqan, toxuma? Biopsiya nümunəsi onların nümunədə mövcudluğunu qiymətləndirməyə imkan verən şiş markerləri üçün araşdırılır. IHC tədqiqatı diaqnozun qoyulmasında köməkçi olaraq əvəzolunmazdır; qadın sonsuzluğunun səbəblərini müəyyən etməkdə də fəal şəkildə istifadə olunur.

Tibb, o cümlədən diaqnostik tibb daim inkişaf edir. Ola bilsin ki, yaxın gələcəkdə immunohistokimyəvi tədqiqatlar mükəmməlləşəcək və bir çox insana ən az vaxt və səylə adekvat diaqnoz qoymağa imkan verəcək.

Bəzən histoloji nəticələri kifayət deyil. Yekun cavab almaq və diaqnoz qoymaq mümkün olmadıqda və ya şiş meydana gəlməsinin molekulyar parametrlərini aydınlaşdırmaq lazımdırsa, immunohistokimyəvi tədqiqat təyin edilir.

Bu nədir

Əlavə üsul kimi immunohistokimya üsulu istifadə olunur. Bu, müəyyən hüceyrə növü üçün xarakterik olan bioloji materialda xüsusi zülalları müəyyən etməyə və nəticədə bir növ şiş meydana gəlməsini digərindən ayırmağa kömək edir. Tədqiqat həmçinin müəyyən etməyə kömək edir:

1. Şişin dərman və radiasiya terapiyasının təsirinə həssaslığından məsul olan immunohistokimyasal markerlər.
2. Formanın mənşəyinin metastatik təbiəti və lezyonun ilkin mənbəyini müəyyənləşdirin.
3. Onlar üçün hormonlar və reseptorlar.
4. Hüceyrə malignitesi.

Diaqnostik metod kimi IHC onkologiyada geniş istifadə olunur. Bu tip toxuma tədqiqi müəyyən reagentlərin istifadəsini nəzərdə tutur. Onların tərkibində müəyyən maddələrlə işarələnmiş antikorlar və ya protein birləşmələri var.

ƏHƏMİYYƏTLİ! Antikorlar (immunoqlobulinlər, spesifik zülallar) bədənin müxtəlif hüceyrələri tərəfindən istehsal olunur və bir antigen daxil edildikdə toxunulmazlığı təmin edir. Onlar tez-tez viruslara, bakteriyalara, onkologiyaya, peyvəndlərə, toxuma transplantasiyasına və bəzən öz hüceyrələrinə qarşı məruz qaldıqda istehsal olunur ki, bu da otoimmün patologiyalara səbəb olur. Onlar müxtəlif heyvanlardan alınır. [>

Tədqiq olunan biopsiya nümunəsində ola bilən antigenlərlə təmasda olduqda, xüsusi bir reaksiya baş verir (antigenlər toxumanın hüceyrələrarası maddələri, hüceyrə strukturlarının komponentləridir). Nəticədə, toxumalarda müəyyən bir maddənin olub-olmadığını mühakimə etmək olar.

ƏHƏMİYYƏTLİ! Antigenlər genetik olaraq yad bir cisimdir, bədənə daxil olduqda, immun reaksiyasına, yəni bu xarici agenti basdırmaq üçün antikorların istehsalına səbəb olur. IHC analizi vəziyyətində antigenlər patoloji olaraq dəyişdirilmiş şiş hüceyrələri tərəfindən istehsal olunan molekullardır.

Tədqiqatın struktur spesifikliyi IHC-ni antigen-antikor reaksiyasından istifadə edən digər immunoloji diaqnostik üsullardan əsaslı şəkildə fərqləndirir. Yəni, mütəxəssislər toxumalarda müəyyən maddələrin olması (boyanma olub-olmaması) və onların kəmiyyət tərkibinə (boyanma intensivliyinə görə) əlavə olaraq, müxtəlif struktur elementlərinin (sitoplazma, nüvə, hüceyrə) məkan paylanmasını da qiymətləndirirlər. membran və s.) nazik toxuma ləkələnmiş bölməsində.

Tədqiqatın aparılması üsulları

Reaksiya bir neçə yolla əldə edilə bilər. Tez-tez bir növ etiketli antikor istifadə edən birbaşa istifadə olunur. Sonuncu aşkar edilmiş maddə və ya hədəf molekulla əlaqə saxlamalıdır. Əgər biopsiya nümunəsində sonuncu varsa, o zaman tədqiq olunan toxuma ləkələnir.

Dolayı üsul daha informativ və həssas hesab olunur. Onun mahiyyəti 2 fərqli antikorun tədricən daxil olmasından ibarətdir. Etiketlənməmiş ilkin antikorlar biopsiya nümunəsindəki şiş antigeni ilə reaksiya verir və antikor-antigen kompleksi əmələ gətirir. Sonra ilkin antikor molekulunun müəyyən bir hissəsinə bağlanan ikincil artıq etiketlənmiş antikorlar (reagent) təqdim olunur. Yəni, birincili antikorlar ikincil olanlar üçün antigenlərdir.

Tədqiqat nə vaxt təyin olunur?

IHC şərti histoloji müayinə kifayət etmədikdə təyin edilir. Məsələn, döş şişi dəqiq yekun diaqnoz qoymağa imkan verməyən qeyri-spesifik mikroskopik quruluşa malik olduqda.

Nə göstərir

İmmunohistokimya ilə biopsiya döş xərçəngi, prostat xərçəngi, yumşaq toxuma xərçəngi və s. üçün diaqnozun yoxlanılmasının vacib hissəsidir. Tədqiqat lenfomaların müəyyən edilməsi üçün xüsusilə vacibdir, çünki IHC olmadan bu xəstəliyə diaqnoz qoymaq çox vaxt mümkün olmur. IHC tədqiqatı differensiallaşmamış şiş formasiyalarının histoloji tipini, eləcə də qeyri-müəyyən əsas fokus olan metastazları müəyyən etməkdə böyük rol oynayır.

Döş xərçənginin immunohistokimyası şiş prosesinin gedişatını və məqsədyönlü terapiyanın mümkünlüyünü proqnozlaşdırmaqda faydalıdır. Qiymətləndirməyə kömək edir:

• formalaşma hüceyrələrinin funksional vəziyyəti;
• bədxassəli potensial və şiş böyümə sürəti;
• metastazlara meyl.

Analiz necə aparılır?

Tədqiqat aparmaq üçün şişin özünün və yaxınlıqdakı toxumaların nümunələri lazımdır. Onlar biopsiya və ya əməliyyatdan sonra əldə edilə bilər. Material müayinədən əvvəl bir neçə hazırlıq mərhələsindən keçməlidir: fiksasiya, yuyulma, susuzlaşdırma, parafinə daldırma və ya başqa bir maddə ilə doldurulma.

Tədqiq olunan bioloji obyekt sıx olmalıdır, lakin kövrək olmamalıdır. Əvvəlcə material yuyulur, susuzlaşdırılır və artan gücü olan spirtlərdə sıxılır. Sonra 1:1 nisbətində mütləq spirt və O-ksilen qarışığına batırılaraq aydınlaşdırılır. Bundan sonra, təmiz O-ksilenin bir neçə hissəsinə yerləşdirilir. Və yalnız bundan sonra bioloji obyekt parafinə hopdurulur. Son mərhələ parafin blokunda toxumanın saxlanmasına və onun struktur xüsusiyyətlərinin uzun müddət saxlanmasına kömək edir.

Sonra laborant xüsusi cihazdan - 1 mikrona qədər qalınlığı olan mikrotomdan istifadə edərək bu bloklardan kəsiklər düzəldir. Yaranan hissələr qliserin və zülal qarışığı ilə bulaşmış bir şüşə slaydın üzərinə yapışdırılır. Qurudun.

Test materialının antikorla reaksiya verməsi üçün onu yağdan təmizləmək və parafindən təmizləmək lazımdır. Prosedura dewaxing adlanır. Bunu həyata keçirmək üçün 3 porsiya O-ksilen, həmçinin azalan gücü olan spirtlər istifadə olunur.

Son mərhələ rəngləmədir. Mikroskop altında toxumaların quruluşunu aydın görmək üçün həyata keçirilir. Laboratoriya texnikləri çoxlu sayda boyalardan istifadə edə bilərlər. Şərti olaraq, onlar aşağıdakılara görə təsnif edilə bilər:

• mənşəli, məsələn, heyvan - karmin, bitki - hematoksilin, sintetik - eozin;
• kimyəvi xüsusiyyətlər, məsələn, neytral, əsas, asidik.

Çox vaxt bu prosedur üçün eozin və hematoksilin istifadə olunur. Bioloji material bir neçə dəqiqə hematoksilin məhluluna yerləşdirilir, sonra yuyulur və boyanma nəticələri diferensiallaşdırılır. Bundan sonra eozində boyanma, artan gücdə spirtlərdə yuyulma və susuzlaşdırma təmin edilir. Ardıcıl çoxmərhələli boyanma hər mərhələdə şişin formalaşmasının nozologiyasını və fenotipini getdikcə daha çox müəyyən etməyə imkan verir. Patoloq hər boyanmadan sonra materialı mikroskop altında araşdırır. Və yalnız dəyişiklikləri qiymətləndirdikdən və alınan məlumatları şərh etdikdən sonra antikorlar paneli təyin edilir.

Patoloji proses haqqında dəqiq məlumat əldə etmək və xəstəliyi yoxlamaq üçün laborant hazırlanmış nümunəni etiketlənmiş antikorları olan xüsusi reagentlərlə emal etməyə başlayır. Nəticədə antikor və antigen arasında reaksiya yaranır. Bu, etiketləmə üçün istifadə olunan maddələrdən asılı olan xarakterik vizuallaşdırma ilə müşayiət olunur.

Nəticələr nə deməkdir?

Döşün immunohistokimyası mürəkkəb çox mərhələli analizdir, nəticəsi bir çox amillərdən, məsələn, aşağı keyfiyyətli reagentlərdən, öyrənilən bioloji obyektin qeyri-kafi fiksasiyasından və ya yanlış seçilmiş antikor panelidir. Axtarılan hədəf hüceyrələrin sayı yüzlərlədir, ona görə də mütəxəssis nə axtardığını anlamalı və bunun üçün lazım olan anticisimlərdən istifadə etməlidir.

Histoloqlar xüsusi miqyasdan istifadə edərək reagentlərlə qarşılıqlı əlaqədən sonra şiş hüceyrələrinin boyanmasının intensivliyini qiymətləndirirlər:

• 0-1+ - onkoloji yoxdur;
• 2+ - mənfi onkoloji formalaşma;
• 3+ - müsbət onkoloji formalaşma.

Döş xərçəngi üçün IHC müddəti əsasən onun həyata keçirilməsi üsulundan asılıdır. Əl və ya avtomatik ola bilər. Sonuncu daha inkişaf etmiş hesab olunur, çünki texniki səhv ehtimalı minimuma endirilir və daha sürətli həyata keçirilir.

Müalicə taktikasını təyin etməzdən əvvəl onkoloq müxtəlif suallar verir: xəstədə xəstəliyin təkrarlanması və ya onun ölüm ehtimalı nədir, hansı müalicə nəticəsini gözləmək olar. Bunun üçün mütəxəssis şişin xüsusiyyətlərini və xüsusiyyətlərini öyrənir və müxtəlif proqnozlaşdırıcı və proqnostik amillərdən asılı olaraq müalicə taktikasını təyin edir.

Proqnostik amillər

Bu amillərə xəstəliyin gedişatını və nəticəsini təyin edən əsas əlamətlər daxildir. Döş xərçənginin operativ formalarında belə amillərə aşağıdakılar daxildir: morfoloji quruluş və onun ölçüsü, limfa düyünlərinin vəziyyəti. Yəni belə xüsusiyyətlər xəstəliyin xronologiyasını müəyyən edir.

Proqnostik amillərin xüsusiyyətləri:

1. Şişin əmələ gəlməsinin bioloji xüsusiyyətlərinə əsaslanır.
2. Müalicə taktikasından asılı olmayaraq, xəstənin gözlənilən ömür uzunluğu ilə əlaqəlidir.
3. Xəstələr ölüm və relaps riskinə görə bölünür.
4. Nümunələr: mitotik aktivlik indeksi, proteolitik fermentlər, antiogenez və s.

Mitotik aktivlik indeksi (MAI) xəstələrin ömrünü xarakterizə edən müstəqil proqnostik amildir. Müşahidə zamanı indeksi 10-dan az olan xəstələrdə ölüm nisbəti 6%, indeksi 10-dan çox olan xəstələrdə - 28% idi.

Proteolitik fermentlər metastaz prosesində vacibdir. Transformasiya edilmiş bədxassəli hüceyrələrdə bu cür fermentlər sağlam olanlara nisbətən daha çox istehsal olunur, buna görə də bədxassəli formasiyalarda bu maddələrin hüceyrələrarası boşluğa buraxılması və aktivliyin artması müşahidə olunur. Yəni onkogenez prosesində fermentlər iştirak edir. Bu. bu fermentlərin aşağı səviyyədə olan xəstələrdə xəstəliksiz yaşamaq üçün daha əlverişli proqnoz var.

Şişin böyüməsi və metastaz vermə qabiliyyəti əsasən angiogenezdən - yeni qan damarlarının meydana gəlməsindən asılıdır. 10 il ərzində xəstələrin müşahidəsi prosesində məlum olub ki, şişdə mikrodamar sıxlığı yüksək olan qadınlarda proqnoz daha pis olur.

Proqnozlaşdırıcı amillər

Bu amillər müalicənin effektivliyini proqnozlaşdırır. Onlar terapiyaya daha çox və ya daha az əhəmiyyətli cavab verən bir qrup xəstəni müəyyən etməyə kömək edir. Məsələn, hormonal dərmanların effektivliyini, steroid hormon reseptorlarının səviyyəsini müəyyən etmək.

Metastatik xərçəngdə müalicəyə cavabı şərh etməyə kömək edən klinik amillər bunlardır:

1. Metastazların lokalizasiyası və kəmiyyət göstəricisi. Məsələn, sümük zədələnməsi ilə proqnoz nisbətən əlverişlidir; sümüklərə, 2 orqanlara, ağciyərlərə zərər - daha az əlverişli; 2-dən çox orqan təsirlənirsə, qaraciyərdə, beyində və s.-də metastazlar var - əlverişsiz.
2. Birincil şişin müalicəsi ilə metastazların görünüşü arasındakı vaxt intervalı. Nə qədər uzun olarsa, proqnoz bir o qədər əlverişlidir.
3. Xəstənin ümumi sağlamlığı.
4. Yaş kateqoriyası. Postmenopozal qadınların müalicəyə müsbət cavab vermə ehtimalı daha yüksəkdir.
5. Şişlərdə steroid hormon reseptorları (hormondan müstəqil neoplazmalar hormonal müalicəyə cavab vermir).

Metastatik döş xərçəngi xroniki bir patoloji hesab olunur. Kimyaterapiya nəticəsində yaranan tam reqressiyadan sonra 5-10 illik ömür uzunluğu olduqca nadirdir, halların təxminən 5-20%-i. Buna görə də, müalicə üçün ən yaxşı seçim maksimum palliativ effekt əldə etmək və patologiyanın və ölümün inkişafını gecikdirmək üçün mümkün olan ən az toksiklik ilə terapevtik müdaxilələrin ardıcıl istifadəsidir.

Döş IHC nəticələrinin etibarlılığı 99% -ə çatır. Texnika həssas və yüksək spesifikdir. Patoloji prosesi yoxlamağa və xəstəliyin mərhələsini təyin etməyə kömək edir. Onu həyata keçirmək üçün sizə minimum biopsiya materialı və reagentlər lazımdır və o, biopsiya götürüldükdən uzun müddət sonra da məlumatlandırıcı olacaqdır.

Qadınlarda süd vəzilərinin onkoloji xəstəlikləri olduqca tez-tez diaqnoz qoyulur. Buna görə təhlükəli bir şişin aşkarlanması üçün diaqnostik tədbirlər aktual olaraq qalır. Döş xərçəngi üçün immunohistokimyəvi tədqiqat bədxassəli hüceyrələrin xüsusi maddələrə həssaslığını müəyyən etmək üçün nəzərdə tutulmuşdur. Araşdırma yolu ilə aparılan müalicənin düzgün olub-olmadığı müəyyən edilir.

IHC – bu hansı araşdırmadır?

Onkologiyada istifadə edilən immunohistokimyəvi tədqiqatlar bədxassəli hüceyrələr və antigenlər tərəfindən sintez edilən zülallar arasındakı əlaqəni aşkar etməyə imkan verir. Bu əlaqəni müəyyən etdikdən sonra mütəxəssislər neoplazmanın növünü və quruluşunu təyin edirlər.

Tədqiqatın məqsədi

Süd vəzilərinin onkoloji patologiyaları üçün IHC aşağıdakı məqsədlər üçün aparılır:

• xüsusi terapiyaya həssas olan xəstəliyin növünü təyin etmək;
• şişin səbəb olduğu və onların yayılma dərəcəsi;
• metastazların mənbəyini tapmaq;
• müəyyən edilmiş şişin inkişaf mərhələsini təyin etmək;
• terapiyanın effektivliyini qiymətləndirmək;
• metastazların yayılma sürətini tapmaq;
• təsirsiz dərmanları yoxlamaq üçün qan hüceyrələrinin xüsusi dərmanlara həssaslığını müəyyənləşdirin.

IHC üçün göstərişlər

Diaqnostik test insan bədəninin hər hansı bir hissəsinin vəziyyətini müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Prosedura yalnız döş xərçəngi üçün deyil, həm də bədxassəli olduğundan şübhələnən hər hansı bir neoplazma üçün təyin edilir. IHC endometriumun vəziyyətini təyin edirünvanda:

• metastazların görünüşü;
• uterusun patologiyaları;
• sonsuzluq;
• uğursuz IVF prosedurları;
• müxtəlif etiologiyalı pelvik orqanların xəstəlikləri;
• daimi spontan abort.

Prosedur üçün heç bir əks göstəriş yoxdur. Onlar tədqiqatdan yalnız nədənsə xəstədən biomaterial götürmək mümkün olmadıqda imtina edirlər.

Tədqiqata hazırlıq

Prosedurdan əvvəl xəstə:

• hormonal dərmanlar qəbul etməməlidir (biyomaterial qəbul etməzdən bir həftə əvvəl);
• qanaxmanı dayandırmaq üçün dərman qəbul etməməlidir;
• hərtərəfli gigiyena prosedurlarını həyata keçirməlidir.

Tədqiqat menstrual dövrünün müəyyən günlərində aparılır:

• 5-7-ci günlərdə endometriumda patoloji dəyişikliklər öyrənilir;
• 20-24-cü günlərdə sekretor və reseptor fəaliyyəti qiymətləndirilir.

Tədqiqatın gedişi

İmmunohistokimyəvi testi aparmaq üçün döşdən müəyyən miqdarda şiş toxuması biopsiya ilə çıxarılır. Nümunə alma mütəxəssisin bədxassəli hüceyrələrin yığılmasından şübhələndiyi bir ərazidə aparılır.

Prosedurdan əvvəl həkim xəstənin döş qəfəsində seçilmiş nöqtəni qeyd edir. Həmçinin şiş parçaları analiz üçün götürülə bilər, əməliyyat zamanı kəsildi.

1. Toplanmış biomaterial laboratoriyaya aparılır.
2. Şiş nümunələri formaldehid konteynerinə batırılır.
3. Biomaterial yağdan təmizlənir.
4. Şiş toxumasının quruluşunu və növünü təyin etmək üçün parafin mayesi tökülür.
5. 1 mm qalınlığında şiş parçası kəsilir.
6. Laboratoriya şüşəsinə qoyun.
7. Kimyəvi reagentlər və antikorlar boyalar kimi istifadə olunur.
8. Test nəticələri iki həftədən sonra hazırdır.

Döş xərçəngini aşkar etmək üçün müxtəlif markerlərdən istifadə olunur. Test nəticələri şiş toxumalarında əhəmiyyətli miqdarda qadın cinsi hormonlarının olduğunu aşkar edərsə, şiş aktiv şəkildə inkişaf edir. Hətta metastazların artıq başlaması da mümkündür. Hormonların yığılması orta səviyyədədirsə, bədxassəli hüceyrələr qeyri-aktiv şəkildə çoxalır. Bu o deməkdir ki, düzgün və vaxtında müalicə ilə xəstə öz sağlamlığını bərpa etmək imkanı əldə edir.

Bədxassəli döş şişi üçün Ki-67 markeri 15-17% -dən çox olmadıqda hormonal müalicənin müsbət nəticəsi mümkündür. Marker 35%-ə çatarsa, şiş sürətlə böyüyür. Bu vəziyyətdə, bədxassəli hüceyrələrin yayılmasının qarşısını almaq üçün dərhal kemoterapi aparılır. Marker 85% -dən yuxarıdırsa, müalicə etmək çox gecdir,ölüm qaçılmazdır.

Nəticələrin dekodlanması

Nəticələri deşifrə edərkən onlar progesteron (PR) və estrogen (ER) reseptorlarına baxırlar. IHC həmçinin xəstədən götürülmüş biomaterialda insan epidermal böyümə faktoru reseptorunun (HER-2 proteini) miqdarını müəyyən edir. Döş vəzinin bədxassəli şişlərində HER-2 artır.

Şiş toxumalarında artan ER və PR ilə, bədxassəli şişin hormonların təsiri altında böyüdüyünü söyləyə bilərik. ER və PR konsentrasiyaları normal hədlər daxilində və ya bir qədər azdırsa, xəstə uğurlu müalicəyə ümid edə bilər.

IHC göstəriciləri miqyasdakı rəngləri biomaterialın çalarları ilə əlaqələndirən xüsusi rəng şkalasından istifadə edərək deşifr edilir.

1. 0 və +1. Protein konsentrasiyası normaldır. Heç bir terapevtik tədbirlərə ehtiyac yoxdur.
2. +2. Protein konsentrasiyası orta səviyyədədir. Süd vəzində bədxassəli şiş var. Adətən ilk testin düzgün nəticəsini təsdiqləmək üçün əlavə tədqiqatlar aparılır. FISH adlı əlavə tədqiqat hər bir hüceyrədə zülal tərkibini öyrənməyə imkan verir. HER-2 normaldırsa, onda FISH testi müsbət nəticə verəcək, əgər yüksəlsə, mənfi olacaq.
3. +3. Protein konsentrasiyası normadan çox yüksəkdir. Süd vəzində mütləq bədxassəli neoplazma var.

Test yüksək protein konsentrasiyasını göstərirsə, o zaman şiş aqressiv tipdir və sürətlə böyüyür.

IHC nəticələrinə əsasən döş xərçənginin 4 növü fərqləndirilir:

• – ER reseptorları müsbət, zülal reseptorları mənfi, Ki-67 14%-dən aşağıdır;
• B-luminal – ER və HER-2 reseptorları mənfi, Ki-67 15%-dən yüksəkdir;
• həddindən artıq ifadə - ER və PR reseptorları mənfi, protein reseptorları müsbətdir;
• bazal kimi - bütün reseptorlar mənfidir.

Proqnostik markerlər

Onlar test zamanı şişin ən çox ehtimal olunan davranışını müəyyən etmək üçün istifadə olunur. Müalicənin tədqiqata təsiri yoxdur. Test şişin aqressivliyini təyin etməyə imkan verir. Proqnoz ən uyğun dərmanların və müalicə prosedurlarının seçilməsi üçün vacibdir.

Diaqnostik markerlər

Tədqiqat müalicənin effektivliyini göstərir. Aqressiv xərçəng aşkar edilərsə, kemoterapi təyin edilir.

IHC çoxlu sayda markerdən istifadə edən kompleks testdir.Nə qədər çox marker yoxlanılırsa, tədqiqatın qiyməti bir o qədər yüksək olur. Test xərçəng növünü təyin etməkdə təsirli olur və optimal müalicəni təyin etməyə kömək edir.