Właściwości biologiczne interferonów. Interferony jako czynniki odporności przeciwwirusowej

lub mitogeny).
Interferon leukocytowy ( A -interferon) – mieszanina powstająca pod wpływem ich działania. Kręgowce mają kilka. , kodowanie różne A - interferony. Znana struktura pierwotna ma ok. 20 A -interferony ludzkie, określone na podstawie sekwencji odpowiednich interferonów i częściowo na podstawie analizy samych interferonów. Reluje je. zawartość w mieszance zależy od rodzaju producentów i rodzaju wzbudnika. Mol. M. A -interferony wahają się od 18 tys. do 25 tys., pI od 5,5 do 7,5; kwasoodporny - nie traci swoich właściwości przy pH 2. Większość znanych interferonów z tej grupy jest nieglikozylowana. , zawierający około 80% i niezawierający potencjalnego miejsca glikozylacji. Tylko niektóre glikozylipany A -interferony wyizolowane z komórek nowotworowych (składnik węglowodanowy zawiera reszty glukozaminy i galaktozaminy). Są syntetyzowane A -interferon w postaci, z której sygnały sygnałowe zawierające 23 reszty aminokwasowe (ludzkie, mysie) są następnie odcinane z wytworzeniem dojrzałych interferonów zawierających 166-165 (ludzkich) lub 166-167 (mysich) reszt aminokwasowych. Naib. wspólny A -interferony ludzkie - A 2-interferon (interferon A), A 1-interferon (D-interferon) i A 3-interferon (interferon F). Zawierają na N-końcu pozostałość, która bierze udział w tworzeniu jednego z dwóch obecnych w niej mostków dwusiarczkowych. Obecność tych mostów jest ważna dla. , krawędzie ulegają utracie pod wpływem takich interferonów (na przykład 2-merkaptoetanolu). A -Interferony nie są tracone. na przykład pod wpływem jonowych środków powierzchniowo czynnych. Sól Na i siarczanu dedecylu. Z C-końca tych interferonów można odszczepić związek składający się z kilku. reszty aminokwasowe. A -Interferony mają szerokie spektrum. działania; maks. badano ich właściwości przeciwwirusowe, immunoregulacyjne i przeciwnowotworowe.
Interferon fibroblastów ( B -interferon) - jeden lub kilka. , syntetyzowane (zdolne do syntezy struktur włóknistych połączeń) pod wpływem podwójnej helisy. Mol. m. 20 tys., część białkowa B -ludzki interferon składa się ze 166 reszt aminokwasowych i zawiera miejsce glikozylacji (Asn-Glu-Thr; oznaczenia literowe, patrz artykuł). W strukturach podstawowych występuje około 30%. a - i b -interferony. Stabilny w środowisku kwaśnym przy pH do 2,0. ludzie syntetyzują łańcuch polipeptydowy B -interferon w postaci, z której sygnał sygnałowy składający się z 21 reszt aminokwasowych jest następnie odcinany, tworząc dojrzałe interferony. Na mój własny sposób. działanie podobne do A -interferony; interakcja z tymi samymi komórkowymi.
Interferon immunologiczny ( G -interferon) - prosty lub syntetyzowany pod wpływem mitogenów (niektóre itp.). Część białkowa G -interferon składa się ze 143 reszt aminokwasowych i ma dwa potencjalne miejsca glikozylacji. w odróżnieniu a - i b -interferony, traci swoją wartość przy pH 2,0 i ma p/ w zakresie 8,6-8,7. Natura G -interferon jest reprezentowany przez trzy: z mol. m. 15 tysięcy (nieglikozylowanych), 20 tysięcy (glikozylowanych w jednym z miejsc) i 25 tysięcy (glikozylowanych w obu miejscach). Od końca C G -interferon może odszczepiać różną liczbę reszt aminokwasowych, co czyni go heterogennym. Po oddzieleniu sygnału

Interferony to grupa białek o działaniu przeciwwirusowym wytwarzana przez komórki eukariotyczne w odpowiedzi na wprowadzenie szeregu czynników biologicznych – interferonogenów. Jest to rodzina białek glikoproteinowych o masie cząsteczkowej od 15 do 70 kDa. W zależności od tego, które komórki syntetyzują interferon, istnieją trzy jego typy: α, β i γ.

Interferon alfa wytwarzany jest przez leukocyty, beta fibroblasty, interferon gamma jest wytwarzany przez aktywowane limfocyty T, makrofagi, komórki NK, czyli komórki odpornościowe.

Oprócz działania przeciwwirusowego interferon ma działanie przeciwnowotworowe, ponieważ opóźnia proliferację komórek nowotworowych, a także działanie immunomodulacyjne, stymulujące fagocytozę, komórki NK, regulujące wytwarzanie przeciwciał przez komórki B, aktywujące ekspresję głównego kompleksu zgodności tkankowej.

Mechanizm działania interferonu jest złożony. Interferon nie oddziałuje bezpośrednio na wirusa na zewnątrz komórki, lecz wiąże się ze specjalnymi receptorami komórkowymi i wpływa na proces reprodukcji wirusa wewnątrz komórki na etapie syntezy białek.

Działanie interferonu jest tym skuteczniejsze, im wcześniej zacznie być syntetyzowany lub przedostanie się do organizmu z zewnątrz. Dlatego stosuje się go w celach profilaktycznych przeciwko wielu infekcjom wirusowym, takim jak grypa, a także w celach leczniczych przeciwko przewlekłym infekcjom wirusowym (zapalenie wątroby, opryszczka, stwardnienie rozsiane).

Interferony są gatunkowo specyficzne, co oznacza, że ludzki interferon jest mniej skuteczny w przypadku zwierząt i odwrotnie.

Interferon uzyskuje się na dwa sposoby: a) poprzez zakażenie hodowli ludzkich leukocytów lub limfocytów bezpiecznym wirusem, w wyniku czego zakażone komórki syntetyzują interferon, który następnie jest izolowany i konstruowane z niego preparaty interferonowe.

b) modyfikowane genetycznie – poprzez hodowlę rekombinowanych szczepów bakterii zdolnych do wytwarzania interferonu w warunkach produkcyjnych. Zazwyczaj stosuje się rekombinowane szczepy Pseudomonas i Escherichia coli z genami interferonu wbudowanymi w DNA. Rekombinowany interferon znalazł szerokie zastosowanie w medycynie jako środek zapobiegawczy i terapeutyczny w przypadku infekcji wirusowych i niedoborów odporności.

Interferonogeny to czynniki indukujące syntezę interferonów w komórkach kręgowców. Wśród czynników naturalnych takie właściwości obejmują wirusy genomowe RNA i DNA, niektóre typy bakterii, promieniowce, riketsje, chlamydie, mykoplazmy, toksoplazmę, plazmodium, NK, lipopolisacharydy bakteryjne, polisacharydy grzybowe i naturalne polifenole. Spośród substancji syntetycznych syntezę interferonów indukują polifosforany, polikarboksylany, propanodiamina i zasadowe barwniki.

12. Normogram oporu.

Mechanizmy obrony przeciwdrobnoustrojowej

1. Pojęcie oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe

2. Nieswoista oporność drobnoustrojów

3. Fagocytoza

1. Jednym z czynników decydujących o rozwoju infekcji, a co za tym idzie, chorób zakaźnych jest wrażliwy makroorganizm. Zespół mechanizmów określających odporność (oporność) organizmu na działanie dowolnego czynnika drobnoustrojowego określa się mianem „oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe”. Jest to jeden z przejawów ogólnej reaktywności fizjologicznej makroorganizmu, jego reakcji na określony czynnik drażniący - czynnik drobnoustrojowy.

Oporność na środki przeciwdrobnoustrojowe jest kwestią czysto indywidualną, jej poziom zależy od genotypu organizmu, wieku, warunków życia i pracy itp.

Wzrostowi szerokiego zakresu nieswoistych czynników ochronnych sprzyja w szczególności wczesne przystawianie do piersi i karmienie piersią.

Ze względu na specyfikę mechanizmy ochrony przeciwdrobnoustrojowej dzielą się na:

Dla niespecyficznych - pierwszy poziom ochrony przed czynnikami mikrobiologicznymi;

Specyficzny - drugi poziom ochrony zapewniany przez układ odpornościowy. Jest to realizowane w następujący sposób:

Poprzez przeciwciała - odporność humoralna; .

Poprzez funkcję komórek efektorowych (komórek T-kill i makrofagów) – odporność komórkowa.

Pierwszy i drugi poziom obrony są ze sobą ściśle powiązane poprzez makrofagi.

Nieswoiste i specyficzne mechanizmy ochrony przeciwdrobnoustrojowej mogą mieć charakter tkankowy (komórkowy) i humoralny.

2. Niespecyficzna oporność drobnoustrojów jest wrodzoną właściwością makroorganizmu, którą zapewniają dość liczne mechanizmy dziedziczne, które dzielą się na następujące typy:

Tkanina;

humorystyczny;

Wydalniczy (funkcjonalny).

Mechanizmy tkankowe niespecyficznej naturalnej obrony przeciwdrobnoustrojowej obejmują:

Funkcja barierowa skóry i błon śluzowych;

Odporność na kolonizację zapewniana przez normalną mikroflorę;

Zapalenie i fagocytoza (może również brać udział w specyficznej obronie);

Funkcja ustalania barier w węzłach chłonnych;

Reaktywność komórek;

Funkcja komórek NK.

Pierwszą barierą wnikania drobnoustrojów do środowiska wewnętrznego organizmu jest skóra i błony śluzowe. Zdrowa, nieuszkodzona skóra i błony śluzowe są nieprzeniknione dla większości drobnoustrojów. Jednak niektóre rodzaje patogenów chorób zakaźnych mogą przez nie przechodzić. Takie patogeny nazywane są szczególnie niebezpiecznymi; obejmują patogeny dżumy, tularemii, wąglika, niektórych grzybic i infekcji wirusowych. Praca z nimi odbywa się w specjalnych kombinezonach ochronnych i wyłącznie w specjalnie wyposażonych laboratoriach.

Oprócz funkcji czysto mechanicznej, skóra i błony śluzowe mają działanie przeciwdrobnoustrojowe - bakterie (na przykład E. coli) nałożone na skórę umierają dość szybko. Bakteriobójczość skóry i błon śluzowych zapewniają:

Jego normalna mikroflora (funkcja odporności na kolonizację);

Wydzielina gruczołów potowych (kwas mlekowy) i łojowych (kwasy tłuszczowe);

Lizozym śliny, płynu łzowego itp.

Jeżeli patogen pokona barierę skórno-śluzówkową, wówczas przedostaje się do tkanki podskórnej/warstwy podśluzówkowej, gdzie realizowany jest jeden z głównych nieswoistych mechanizmów obronnych tkanek – stan zapalny. W wyniku rozwoju stanu zapalnego następuje:

Izolowanie źródła namnażania patogenu z otaczających tkanek;

Jego opóźnienie w miejscu wstrzyknięcia;

Spowolnienie reprodukcji;

Ostatecznie - jego śmierć i usunięcie z organizmu.

3. Podczas rozwoju stanu zapalnego realizowany jest inny uniwersalny tkankowy mechanizm niespecyficznej obrony - fagocytoza.

Zjawisko fagocytozy odkrył i zbadał wielki rosyjski naukowiec I. I. Miecznikow.

Rezultatem tych wielu lat pracy była fagocytarna teoria odporności, za stworzenie której Mechnikov otrzymał Nagrodę Nobla.

Mechanizm obrony fagocytarnej składa się z kilku następujących po sobie faz:

Uznanie;

Atrakcja;

Wchłanianie;

Zabicie;

Trawienie wewnątrzkomórkowe.

Fagocytozę na wszystkich etapach nazywa się zakończoną. Jeśli nie nastąpi faza zabijania i trawienia wewnątrzkomórkowego, wówczas fagocytoza staje się niepełna. W przypadku niepełnej fagocytozy mikroorganizmy gromadzą się w leukocytach i wraz z nimi rozprzestrzeniają się po całym organizmie. Zatem niepełna fagocytoza zamiast mechanizmu obronnego zamienia się w swoje przeciwieństwo, pomagając mikroorganizmom chronić się przed działaniem makroorganizmu i rozprzestrzeniać się w jego obrębie.

Interferon jest przepisywany w następujących wskazaniach: przewlekłe wirusowe zapalenie wątroby typu C, ostre zapalenie wątroby typu B, aktywna postać wirusowego zapalenia wątroby typu B, kleszczowe zapalenie mózgu, brodawki narządów płciowych, trichoukemia, szpiczak mnogi, chłoniak skóry, mięsak Kaposiego, AIDS. Jest również stosowany w przewlekłej białaczce szpikowej, raku nerek, raku pęcherza moczowego, czerniaku, brodawczakowatości dróg oddechowych, trombocytozie, siatkówczakomięsaku i przejściowej postaci przewlekłej białaczki.

Czopki interferonowe stosuje się w leczeniu gorączki krwotocznej z towarzyszącym zespołem nerkowym, leczeniu wtórnych niedoborów odporności i ostrego zapalenia wątroby. Donosowo stosuje się go w leczeniu i zapobieganiu grypie i ARVI. Roztwór leku wkrapla się do oczu w przypadku wirusowych chorób oczu (zapalenie rogówki, zapalenie spojówek, zapalenie rogówki i błony naczyniowej).

Jak stosować Interferon

W leczeniu grypy i ARVI należy stosować Interferon, gdy pojawią się pierwsze objawy choroby. Wraz z lekiem zaleca się stosowanie inhalacji. W celu wykonania inhalacji należy rozcieńczyć zawartość 3 ampułek w 10 ml wody podgrzanej do 37°C. Wykonuj procedury 2 razy dziennie w odstępie 1-2 godzin.

Przed zakropleniem do nosa zawartość 1 ampułki rozpuścić w 2 ml wody i wstrzyknąć po 5 kropli do każdego otworu nosowego w odstępach 1-2 godzin. Procedurę powtarzaj przez 2-3 dni co najmniej 5 razy dziennie. Aby zapobiec grypie i ARVI podczas epidemii, wkraplaj Interferon do nosa po 5 kropli dwa razy dziennie w odstępie 6 godzin. Najpierw rozcieńczyć zawartość 1 ampułki leku w 2 ml przegotowanej lub destylowanej wody.

W pozostałych wskazaniach stosować Interferon domięśniowo, podskórnie. Wstępnie rozcieńczyć wymaganą dawkę w 50 ml „chlorku sodu” (0,9%). W przypadku białaczki włochatokomórkowej leczenie należy rozpocząć od dawki 3 milionów j.m. dziennie. Taką ilość leku należy stosować przez 16-24 tygodnie. W przypadku AIDS stosować od 3 do 18 milionów jm dziennie, w przypadku czerniaka, chłoniaka skórnego T-komórkowego, mięsaka Kaposiego stosować 18 milionów jm trzy razy w tygodniu przez 8-12 tygodni.

W leczeniu przewlekłej białaczki szpikowej należy stosować Interferon przez 8-12 tygodni w dawce dziennej od 3 do 9 milionów IU. W przypadku aktywnego przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu B należy stosować 4,5 miliona jm dziennie trzy razy w tygodniu przez sześć miesięcy. Leczenie przewlekłego wirusowego zapalenia wątroby typu C należy rozpocząć od dawki 6 milionów jm dziennie (trzy razy w tygodniu). Dawkę tę należy stosować przez 3 miesiące. Następnie przez kolejne 3 miesiące lek należy stosować w dziennej ilości 3 milionów IU trzy razy w tygodniu. W przypadku trombocytozy dzienna ilość interferonu powinna wynosić 2 miliony jm na dzień. Przebieg stosowania wynosi 4-5 tygodni.

Polityka prywatności

Niniejsza Polityka Prywatności reguluje przetwarzanie i wykorzystywanie danych osobowych i innych przez pracownika Vitaferon (strona internetowa:) odpowiedzialnego za Dane Osobowe Użytkowników, zwanego dalej Operatorem.

Przekazując Operatorowi za pośrednictwem Serwisu dane osobowe i inne, Użytkownik potwierdza swoją zgodę na wykorzystanie tych danych na warunkach określonych w niniejszej Polityce Prywatności.

Jeżeli Użytkownik nie zgadza się z warunkami niniejszej Polityki Prywatności, musi zaprzestać korzystania z Serwisu.

Bezwarunkowa akceptacja niniejszej Polityki prywatności oznacza rozpoczęcie korzystania przez Użytkownika z Serwisu.

1. WARUNKI.

1.1. Serwis – serwis internetowy znajdujący się w sieci Internet pod adresem: .

Wszelkie wyłączne prawa do Strony i jej poszczególnych elementów (w tym oprogramowania, projektu) należą w całości do Vitaferon. Przeniesienie praw wyłącznych na Użytkownika nie jest przedmiotem niniejszej Polityki Prywatności.

1.2. Użytkownik – osoba korzystająca z Serwisu.

1.3. Ustawodawstwo - aktualne ustawodawstwo Federacji Rosyjskiej.

1.4. Dane osobowe – dane osobowe Użytkownika, które Użytkownik samodzielnie podaje w trakcie wysyłania wniosku lub w procesie korzystania z funkcjonalności Serwisu.

1,5. Dane – inne dane dotyczące Użytkownika (nieobjęte pojęciem Danych Osobowych).

1.6. Złożenie wniosku – wypełnienie przez Użytkownika formularza rejestracyjnego znajdującego się w Serwisie, poprzez wskazanie niezbędnych informacji i przesłanie ich do Operatora.

1.7. Formularz rejestracyjny – formularz znajdujący się w Serwisie, którego wypełnienie jest wymagane przez Użytkownika w celu złożenia wniosku.

1.8. Usługa(-y) – usługi świadczone przez Vitaferon na podstawie Oferty.

2. ZBIERANIE I PRZETWARZANIE DANYCH OSOBOWYCH.

2.1. Operator zbiera i przechowuje wyłącznie te Dane Osobowe, które są niezbędne do świadczenia Usług przez Operatora i interakcji z Użytkownikiem.

2.2. Dane osobowe mogą być wykorzystywane w następujących celach:

2.2.1. świadczenia Usług na rzecz Użytkownika, a także w celach informacyjnych i doradczych;

2.2.2. Identyfikacja użytkownika;

2.2.3. Interakcja z Użytkownikiem;

2.2.4. Powiadamianie Użytkownika o nadchodzących promocjach i innych wydarzeniach;

2.2.5. Prowadzenie badań statystycznych i innych;

2.2.6. Przetwarzanie płatności Użytkownika;

2.2.7. Monitorowanie transakcji Użytkownika w celu zapobiegania oszustwom, nielegalnym zakładom i praniu brudnych pieniędzy.

2.3. Operator przetwarza następujące dane:

2.3.1. Nazwisko, imię i nazwisko rodowe;

2.3.2. Adres e-mail;

2.3.3. Numer telefonu komórkowego.

2.4. Użytkownikowi zabrania się podawania w Serwisie danych osobowych osób trzecich.

3. PROCEDURA PRZETWARZANIA DANYCH OSOBOWYCH I INNYCH.

3.1. Operator zobowiązuje się do wykorzystywania Danych Osobowych zgodnie z Ustawą Federalną „O danych osobowych” nr 152-FZ z dnia 27 lipca 2006 r. oraz wewnętrznymi dokumentami Operatora.

3.2. Użytkownik przesyłając swoje dane osobowe i (lub) inne informacje, wyraża zgodę na przetwarzanie i wykorzystywanie przez Operatora podanych przez niego informacji i (lub) jego danych osobowych w celu realizacji newsletterów (o usługach Operatora, wprowadzonych zmian, promocji itp. przez czas nieokreślony, do czasu otrzymania przez Operatora pisemnej informacji drogą mailową o odmowie otrzymywania korespondencji. Użytkownik wyraża także zgodę na przekazywanie przez Operatora, w celu realizacji czynności przewidzianych w niniejszym paragrafie, przekazanych przez niego informacji i (lub) jego danych osobowych osobom trzecim, jeżeli istnieje prawidłowo zawarta umowa pomiędzy Operatora i takich osób trzecich.

3.2. W odniesieniu do Danych Osobowych i innych Danych Użytkownika zachowana jest ich poufność, za wyjątkiem przypadków, gdy określone dane są publicznie dostępne.

3.3. Operator ma prawo przechowywać Dane Osobowe oraz Dane na serwerach poza terytorium Federacji Rosyjskiej.

3.4. Operator ma prawo przekazywać Dane Osobowe i Dane Użytkownika bez zgody Użytkownika następującym osobom:

3.4.1. Organy państwowe, w tym organy śledcze i śledcze oraz organy samorządu terytorialnego, na ich uzasadniony wniosek;

3.4.2. Partnerzy Operatora;

3.4.3. W innych przypadkach bezpośrednio przewidzianych przez obowiązujące ustawodawstwo Federacji Rosyjskiej.

3.5. Operator ma prawo przekazywać Dane Osobowe oraz Dane podmiotom trzecim nieokreślonym w punkcie 3.4. niniejszej Polityki Prywatności w następujących przypadkach:

3.5.1. Użytkownik wyraził zgodę na takie działania;

3.5.2. Przekazanie jest niezbędne w ramach korzystania przez Użytkownika z Serwisu lub świadczenia Usług na rzecz Użytkownika;

3.5.3. Przeniesienie następuje w ramach sprzedaży lub innego przeniesienia przedsiębiorstwa (w całości lub w części), a wszelkie obowiązki związane z przestrzeganiem warunków niniejszej Polityki przechodzą na nabywcę.

3.6. Operator dokonuje zautomatyzowanego i niezautomatyzowanego przetwarzania Danych Osobowych i Danych.

4. ZMIANA DANYCH OSOBOWYCH.

4.1. Użytkownik gwarantuje, że wszystkie Dane Osobowe są aktualne i nie dotyczą osób trzecich.

4.2. Użytkownik może w każdej chwili dokonać zmiany (aktualizacji, uzupełnienia) Danych Osobowych poprzez przesłanie pisemnego wniosku do Operatora.

4.3. Użytkownik ma prawo w każdej chwili usunąć swoje Dane Osobowe; w tym celu wystarczy, że prześle wiadomość e-mail z odpowiednim wnioskiem na adres e-mail: Dane zostaną usunięte ze wszystkich nośników elektronicznych i fizycznych w ciągu 3 (trzech) dni roboczych.

5. OCHRONA DANYCH OSOBOWYCH.

5.1. Operator zapewnia należytą ochronę Danych osobowych i innych danych zgodnie z przepisami prawa oraz podejmuje niezbędne i wystarczające środki organizacyjne i techniczne w celu ochrony Danych osobowych.

5.2. Stosowane środki ochrony pozwalają m.in. chronić Dane Osobowe przed nieuprawnionym lub przypadkowym dostępem, zniszczeniem, modyfikacją, blokowaniem, kopiowaniem, rozpowszechnianiem, a także przed innymi niezgodnymi z prawem działaniami osób trzecich.

6. DANE OSOBOWE OSÓB TRZECICH WYKORZYSTYWANE PRZEZ UŻYTKOWNIKÓW.

6.1. Korzystając z Serwisu Użytkownik ma prawo do wprowadzania danych osób trzecich w celu ich późniejszego wykorzystania.

6.2. Użytkownik zobowiązuje się uzyskać zgodę podmiotu danych osobowych na wykorzystanie za pośrednictwem Serwisu.

6.3. Operator nie wykorzystuje wprowadzonych przez Użytkownika danych osobowych osób trzecich.

6.4. Operator zobowiązuje się podjąć niezbędne środki w celu zapewnienia bezpieczeństwa wprowadzanych przez Użytkownika danych osobowych osób trzecich.

7. INNE POSTANOWIENIA.

7.1. Niniejsza Polityka Prywatności oraz relacje pomiędzy Użytkownikiem a Operatorem powstałe w związku ze stosowaniem Polityki Prywatności podlegają prawu Federacji Rosyjskiej.

7.2. Wszelkie ewentualne spory wynikające z niniejszej Umowy będą rozstrzygane zgodnie z obowiązującym ustawodawstwem w miejscu rejestracji Operatora. Przed skierowaniem sprawy do sądu Użytkownik ma obowiązek dopełnić obowiązkowego postępowania przygotowawczego i skierować stosowne roszczenie do Operatora w formie pisemnej. Termin ustosunkowania się do reklamacji wynosi 7 (siedem) dni roboczych.

7.3. Jeżeli z jakiegoś powodu jedno lub więcej postanowień Polityki Prywatności okaże się nieważne lub niewykonalne, nie ma to wpływu na ważność lub wykonalność pozostałych postanowień Polityki Prywatności.

7.4. Operator ma prawo do zmiany Polityki Prywatności w całości lub w części, jednostronnie w dowolnym momencie, bez wcześniejszego uzgodnienia z Użytkownikiem. Wszelkie zmiany wchodzą w życie następnego dnia po opublikowaniu ich na Stronie.

7,5. Użytkownik zobowiązuje się do samodzielnego monitorowania zmian w Polityce Prywatności poprzez zapoznawanie się z jej aktualną wersją.

8. DANE KONTAKTOWE OPERATORA.

8.1. Kontakt e-mail.

Interferony

Cytokiny.

Rodzina cytokin obejmuje interleukiny, interferony, chemokiny, czynniki wzrostu i czynniki stymulujące kolonie, które są sygnalizacyjnymi cząsteczkami polipeptydowymi układu odpornościowego. Posiadając szeroki zakres aktywności biologicznej, warunkują nie tylko odpowiedni poziom odpowiedzi immunologicznej, ale także regulują interakcję głównych układów integracyjnych organizmu – nerwowego, odpornościowego i hormonalnego.

Struktura i mechanizm działania większości cytokin zostały dość szczegółowo scharakteryzowane. Dzięki zastosowaniu metod inżynierii genetycznej i współczesnej biotechnologii wiele cytokin produkowanych jest obecnie w postaci preparatów rekombinowanych identycznych z cząsteczkami endogennymi, w ilościach wystarczających do ich zastosowania klinicznego.

Wiele mikroorganizmów – bakterie, drożdże, wirusy – wykorzystuje się jako biorców obcego materiału genetycznego w celu uzyskania szczepów rekombinowanych – producentów produktów biotechnologicznych. W ten sposób otrzymano rekombinowane szczepy E. coli produkujące interferony, insulinę, hormony wzrostu i różne antygeny; szczepy B. subtilis wytwarzające interferon; drożdże wytwarzające interleukiny itp.

Zastosowanie rekombinowanych cytokin, które zapewniają odpowiednią i ukierunkowaną lekową korektę dysfunkcji immunologicznych, zwiększa skuteczność immunoterapii i ogólnie leczenia. Wprowadzone do organizmu cytokiny kompensują niedobór endogennych cząsteczek regulatorowych i całkowicie odtwarzają ich działanie. Jest to szczególnie ważne w stanach ciężkiej lub przewlekłej patologii, gdy stosowanie tradycyjnych immunomodulatorów lub induktorów syntezy cytokin jest bezużyteczne ze względu na wyczerpanie zdolności kompensacyjnych układu odpornościowego. Obecnie terapia rekombinowanymi cytokinami jest jednym z najbardziej obiecujących i stale rozwijających się obszarów immunofarmakologii.

Szczególne miejsce w świetle współczesnych koncepcji molekularnych mechanizmów reakcji immunologicznych zajmuje interferon gamma (zwany dalej interferonem-y, IFN-y), cytokina regulatorowa odpowiedzi immunologicznej.

Stworzono lek na bazie rekombinowanego IFN-y. Rekombinowany IFN-γ u zwierząt i ludzi w leczeniu i zapobieganiu chorobom o różnej etiologii zapewnia odpowiednią i ukierunkowaną lekową korektę dysfunkcji układu odpornościowego, uzupełniając niedobory endogennych cząsteczek regulatorowych i w pełni odtwarzając ich działanie. Wysoka skuteczność immunokorekcyjna, przewidywalność i selektywność działania wynika z obecności na komórkach specyficznych receptorów oraz istnienia naturalnych mechanizmów jej eliminacji. Leki oparte na rekombinowanym IFN-y są potężnymi środkami patogenetycznej terapii zorientowanej na układ odpornościowy i mają zarówno bezpośredni efekt zastępczy, jak i różne efekty indukcyjne. Obecnie są szeroko stosowane w leczeniu chorób zakaźnych, onkologicznych i niektórych innych chorób zwierzęcych.

KLASYFIKACJA I ROLA INTERFERONÓW

Substancje przeciwwirusowe o szerokim spektrum działania, interferony, wykryto u ssaków, ptaków, gadów i ryb. Po raz pierwszy odkryto je podczas badania interferencji wirusowych, gdy zwierzę zakażone jednym wirusem jest odporne na infekcję innym, niepowiązanym wirusem.

Interferony (IFN, IFN)- ogólna nazwa, pod którą obecnie łączy się szereg biologicznie aktywnych białek lub glikoprotein o podobnych właściwościach, syntetyzowanych przez komórki organizmu w procesie reakcji ochronnej w odpowiedzi na inwazję obcych czynników: infekcję wirusową lub ekspozycję antygenową. Dzięki interferonom komórki stają się odporne na wirusa. Czynnik identyfikowany jako interferon musi mieć charakter białkowy i wykazywać działanie przeciwwirusowe przeciwko różnym wirusom, w którym pośredniczą komórkowe procesy metaboliczne, w tym synteza RNA i białek.

Interferony to wielogenowa rodzina indukowalnych cytokin o różnorodnych funkcjach, w tym przeciwwirusowych, antyproliferacyjnych, przeciwnowotworowych i immunomodulujących.

Obecnie znanych jest ponad 20 interferonów, różniących się budową, właściwościami biologicznymi i dominującym mechanizmem działania. IFN dzieli się na trzy typy:

Typ I- znany jako interferon wirusowy, obejmuje IFN-a (leukocyty, syntetyzowane przez aktywowane monocyty i limfocyty B), IFN-b (fibroblasty, syntetyzowane przez fibroblasty i komórki nabłonkowe, makrofagi), IFN-w, IFN-k;
Typ II- znany jako immunologiczny, obejmuje IFN-γ (syntetyzowany przez aktywowane limfocyty T i komórki NK);
Typ III- został odkryty później niż typ I i typ II, informacje o nim wskazują na znaczenie IFN typu III w niektórych typach infekcji wirusowych.

Pierwszy typ (IFN-a, IFN-b) charakteryzuje się głównie działaniem przeciwwirusowym i antyproliferacyjnym, a w mniejszym stopniu immunomodulującym. Powstają natychmiast po zetknięciu z patogenem, ich działanie ma na celu zlokalizowanie patogenu i zapobieganie jego rozprzestrzenianiu się w organizmie. Główne działanie IFN-b ma charakter lokalny i ma na celu zapobieganie rozprzestrzenianiu się czynnika zakaźnego z miejsca jego wprowadzenia. Jeśli czynnik zakaźny nie zostanie inaktywowany w miejscu wprowadzenia i krąży po organizmie, jego kontakt z limfocytami i makrofagami indukuje wytwarzanie IFN-a. Ten ostatni szybko rozprzestrzenia się w krwiobiegu i przenika do otaczających tkanek, ponieważ jego główną funkcją jest ochrona odległych narządów. Interferony te zapewniają wczesną i nieswoistą ochronę organizmu przed czynnikiem zakaźnym.

Głównym działaniem interferonów typu II (IFN-y) jest udział w reakcjach immunologicznych. Zaczyna być wytwarzana na kolejnych etapach procesu zakaźnego przez już uwrażliwione limfocyty T i aktywnie uczestniczy w kaskadzie specyficznej odpowiedzi immunologicznej.

Interferony wirusowe są indukowane podczas infekcji wirusowej, a synteza interferonów typu II (IFN-γ) jest indukowana przez bodźce mitogenne lub antygenowe. Większość typów komórek zakażonych wirusem jest zdolna do syntezy IFN-a/b w hodowli komórkowej. Natomiast IFN-y jest syntetyzowany tylko przez niektóre komórki układu odpornościowego, w tym komórki naturalnych zabójców (NK), komórki T CD4 i komórki supresorowe cytotoksyczne CDS.

Charakterystyka różnych typów interferonów

Charakterystyka	IFN-a	IFN-b	IFN-y
Chemiczny Struktura	Białko	Glikoproteina	Glikoproteina
Masa cząsteczkowa, kDa	17,5-23,0	23,0	20,0-23,0
Liczba genów kodujących	więcej niż 20	1	1
Ilość podtypy	Co najmniej 22 u ludzi kilka Jeszcze zidentyfikowane u zwierząt	1	1
Forma funkcjonalna	Monomer	Dimer	Dimer
Odporność na kwasy	Jeść	Jeść	NIE
Cewki indukcyjne	Wirusy (RNA > DNA), B-mitogeny	Wirusy (RNA > DNA), B-mitogeny	Antygeny, mitogeny T
główne źródła	Monocyty, limfocyty B	Nabłonki, monocyty	Limfocyty T, Komórki NK
Mechanizm akcji	Hamuje syntezę białek	Hamuje syntezę białek	Wzmacnia antygeny MHC, aktywuje cytotoksyczne komórki T, makrofagi i komórki NK

MECHANIZM DZIAŁANIA INTERFERONÓW

Działanie przeciwwirusowe

Interferony nie działają bezpośrednio na wirusa. Pod ich wpływem komórka staje się odporna na infekcje. Interferony stanowią pierwszą linię obrony przed infekcją wirusową, ponieważ zaczynają być wytwarzane natychmiast po kontakcie z wirusem. W tym przypadku nasilenie odpowiedzi jest wprost proporcjonalne do dawki wywołującej zakażenie.

W stanie spoczynku normalne komórki zawierają znikome ilości IFN, ponieważ kodujące je geny nie ulegają transkrypcji. Transkrypcja rozpoczyna się po wejściu komórki w kontakt z odpowiednim induktorem. Induktorami IFN-a i -b są wirusy, RNA (zwłaszcza dwuniciowy), lipopolisacharydy (LPS) i składniki niektórych bakterii. Wśród wirusów najsilniejszymi induktorami interferonów są genomowe RNA. Wirusy DNA są słabymi induktorami (z wyjątkiem wirusów ospy). Induktorami IFN-y są antygeny i mitogeny T.

Blokada transkrypcji genów kodujących IFN następuje w wyniku wytwarzania przez komórkę białka supresorowego, które wiąże region na łańcuchu kwasu nukleinowego kontrolujący transkrypcję tych genów. Dodatkowo, aby rozpocząć transkrypcję potrzebne jest białko aktywatorowe, które odblokowuje i aktywuje tę strefę. Induktory IFN mogą wpływać zarówno na hamowanie wytwarzania białka supresorowego, jak i aktywację syntezy białka aktywatora. Aktywacja genów aktywuje system syntezy białek w komórce, co skutkuje syntezą i wydzielaniem IFN.

W wyniku związania się cząsteczek IFN ze specyficznymi receptorami interferonu na powierzchni komórek aktywowana jest grupa genów (u człowieka zlokalizowana na 21. chromosomie). Procesowi temu towarzyszy powstawanie ponad 20 nowych białek wewnątrzkomórkowych, które przyczyniają się do pojawienia się oporności na wirusy. Najważniejsze z nich to dwie - syntetaza 2",5",-oligoadenylanowa i kinaza białkowa. Syntetaza 2”,5”,-oligoadenylanu jest enzymem przekształcającym trifosforan adenozyny (ATP) w 2”,5”,-oligoadenylan. Ta ostatnia aktywuje RNazę L, co prowadzi do uszkodzenia zarówno RNA komórkowego, jak i wirusowego. Inaktywując czynnik elF-2 (czynnik przedłużający), kinaza białkowa inaktywuje wydłużanie łańcuchów peptydowych białek wirusowych.

Zatem pod wpływem IFN w komórce syntetyzowane są dwa enzymy, z których jeden rozszczepia wirusowe RNA, a drugi hamuje syntezę białek wirusowych. W rezultacie nowe cząsteczki wirusa albo w ogóle nie powstają, albo ich liczba zmniejsza się dziesiątki lub setki razy.

Pod wpływem IFN następuje również uszkodzenie układu syntezy białek komórki, co może doprowadzić do jej śmierci. Dotyczy to jednak tylko komórek zakażonych wirusem. Niezainfekowane komórki są obojętne na działanie IFN, gdyż oba powyższe białka ulegają aktywacji dopiero w obecności wirusowego RNA. Niektóre wirusy są w stanie blokować przeciwwirusowe działanie IFN. Na przykład adenowirusy wytwarzają specyficzny RNA, który zapobiega aktywacji kinazy białkowej.

Działanie przeciwwirusowe interferonów podsumowano i przedstawiono na poniższym schemacie.

Jak widać na schemacie, związanie IFN z receptorem indukuje trzy jednocześnie zachodzące w komórce procesy, których zakończeniem jest:

aktywacja utajonej endorybonukleazy, prowadząca do zniszczenia wirusowego RNA;
supresja syntezy wirusowego informacyjnego RNA;
hamowanie syntezy białek otoczki wirusa.

Mechanizmy te integralnie realizują działanie przeciwwirusowe, prowadzące do zahamowania replikacji wirusa.

Działanie immunomodulujące

IFN mają nie tylko działanie przeciwwirusowe, ale także immunomodulujące ze względu na ich wpływ na ekspresję receptorów głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC). IFN zwiększają ekspresję cząsteczek MHC klasy 1 na wszystkich typach komórek, poprawiając w ten sposób rozpoznawanie zakażonych komórek przez cytotoksyczne limfocyty T (CTL). Ponadto IFN-y zwiększa ekspresję cząsteczek MHC klasy 2 na komórkach prezentujących antygen, co skutkuje lepszą prezentacją antygenów wirusowych limfocytom CD4+ i aktywacją komórek NK. IFN stymulują także fagocytozę.

Regulacja odpowiedzi immunologicznej przez cytokiny (patrz rysunek poniżej), w tym interferony, zachodzi zgodnie z zasadą wyścigu sztafetowego; działanie cytokiny na komórkę powoduje, że komórka wytwarza inne cytokiny – kaskadę cytokin.

Działanie antyproliferacyjne i przeciwnowotworowe

Działanie antyproliferacyjne i przeciwnowotworowe IFN wyjaśniają następujące mechanizmy:

aktywacja komórek cytotoksycznych;
zwiększona ekspresja antygenów związanych z nowotworem;
modulacja wytwarzania przeciwciał;
hamowanie działania czynników wzrostu nowotworu;
hamowanie syntezy RNA i białek komórek nowotworowych;
spowolnienie cyklu komórkowego wraz z przejściem do fazy „spoczynku”;
stymulacja komórek nowotworowych do dojrzewania;
przywrócenie hamującej kontroli nad proliferacją;
hamowanie tworzenia nowych naczyń w guzie;
hamowanie przerzutów;
biomodulacja działania cytostatyków: zmiany w metabolizmie i zmniejszony klirens;
przezwyciężanie lekooporności poprzez hamowanie genów oporności wielolekowej.

Działanie antybakteryjne

W ostatnich latach wykazano, że IFN mają również działanie przeciwbakteryjne, co opiera się na zdolności IFN do indukowania aktywności niektórych enzymów w dotkniętej chorobą komórce:

Indukcja 2,3-deoksygenazy indoloaminowej prowadzi do zmniejszenia wewnątrzkomórkowej zawartości L-tryptofanu, co z kolei powoduje śmierć komórki bakteryjnej na skutek zaburzeń metabolicznych;
Indukcja syntetazy NO prowadzi do produkcji NO, silnego czynnika bakteriobójczego, który sprzyja niszczeniu komórki bakteryjnej.

Ponadto antybakteryjna rola IFN-y polega na aktywacji makrofagów wytwarzających cytokiny prozapalne, a także reaktywne formy tlenu i azotu, prostaglandyny. Czynniki te przyczyniają się do rozwoju procesu zapalnego prowadzącego do śmierci bakterii.

IMMUNOBIOLOGICZNA ROLA ENDOGENNEGO INTERFERONU GAMMA

Endogenny IFN-y(rysunek poniżej, tabela) została odkryta w 1965 r. (E.F. Wheelock), jest glikoproteiną wrażliwą na kwasy o masie cząsteczkowej 20 000 - 23 000. Geny kodujące IFN-y znajdują się u człowieka w 12. parze chromosomów.

Główni producenci endogennego IFN-y- komórki naturalnych zabójców (NK) i limfocyty T. Wśród limfocytów T producentami IFN-γ są zarówno cytotoksyczne limfocyty T CD8+-, jak i pomocnicze limfocyty T CD4+, jednakże po różnicowaniu w Th1 i Th2 zdolność do wytwarzania IFN-y mam tylko Tx1.

Indukuj produkcję IFN-y zdolne są do tego substancje interferonogenne, antygeny, mitogeny T i niektóre cytokiny. Produkcja IFN-γ jest kontrolowana przez cytokiny. IL-12 i IL-18 wzmagają jej ekspresję, a IL-2 wspomaga funkcję limfocytów CD4+ poprzez aktywację wytwarzania IFN-γ.

Synteza IFN-y jest tłumiona IL-4, IL-10, deksametazon, cyklosporyna A, wirusowe białka supresorowe, komórki nowotworowe.

Ilość tła IFN-y jest zawsze obecny w organizmie, nawet jeśli nie ma infekcji, np. analiza poziomu interferonu wykazuje u zdrowych ludzi i zwierząt zawsze wykrywalną ilość IFN we krwi, która wzrasta wielokrotnie podczas stymulacji lub infekcji; Jednakże podczas zakażenia wirusem opryszczki i w ostatnich stadiach procesu nowotworowego ilość IFN-y dąży do zera, ponieważ wirus opryszczki i komórki nowotworowe wytwarzają białka blokujące syntezę IFN-y. Dlatego w przypadku infekcji wirusem opryszczki i nowotworu induktory interferonu nie mają sensu, należy je wprowadzać do organizmu z zewnątrz.

IFN-y ma podobne działanie biologiczne do innych IFN (hamowanie replikacji wirusa, działanie antyproliferacyjne, działanie immunomodulujące), ale IFN-y jest ściślej związany z układem cytokin i w większym stopniu przyczynia się do immunoregulacji.

Aktywność biologiczna IFN-y realizowana jest poprzez specyficzne receptory komórkowe oraz wewnątrzkomórkową kaskadę sygnalizacyjną kinazy białkowej, prowadzącą do aktywacji odpowiednich czynników transkrypcyjnych i transkrypcji całej rodziny genów kodujących czynniki oporności na czynniki zakaźne i cytokiny komplementarne.

Komórki docelowe za działanie IFN-y odpowiadają makrofagi, neutrofile, komórki NK, cytotoksyczne limfocyty T, które mają na swojej powierzchni receptory dla IFN-y (rysunek poniżej).

Limfocyty T i makrofagi. Najważniejszą funkcją IFN-γ jest jego udział w pośredniczeniu w interakcjach pomiędzy limfocytami i makrofagami oraz w regulowaniu stosunku składników komórkowych i humoralnych nabytej odpowiedzi immunologicznej (ryc. 1). IFN-γ służy jako stymulator makrofagów, promując manifestację różnych funkcji tych komórek, w tym przetwarzanie i prezentację antygenów, produkcję cytokin oraz wytwarzanie reaktywnych form tlenu i azotu. Cytokiny, których produkcja jest wzmagana przez IFN-y, obejmują IL-1 i IL-12 (cytokina ta wzmaga syntezę IFN-y i różnicowanie komórek pomocniczych T w kierunku Th1).

IFN-y zwiększa ekspresję antygenów MHC klasy I, które odgrywają ważną rolę w rozpoznawaniu obcych komórek (zakażonych wirusem, nowotworem) przez cytotoksyczne limfocyty T CD8+ oraz zwiększa ekspresję antygenów MHC klasy II na komórkach prezentujących antygen.

IFN-y zmniejsza aktywność wydzielniczą Th2, hamując syntezę IgE, IgG(2,4) i IgA. Jednocześnie IFN-γ wzmaga rozwój adaptacyjnej odpowiedzi immunologicznej zależnej od Th1. IFN-y wraz ze swoim antagonistą IL-4 utrzymuje równowagę Th1/Th2.

Cytotoksyczne limfocyty T i komórki NK za pomocą IFN-y uczestniczą w realizacji efektu cytotoksycznego (działanie przeciwnowotworowe i przeciwwirusowe). Po wprowadzeniu IFN-γ do organizmu aktywność komórek NK wzrasta w ciągu kilku godzin.

Monocyty. IFN-γ stymuluje ekspresję receptora IL-2 o wysokim powinowactwie (IL-2R) na błonie monocytów, zwiększając ich wrażliwość na IL-2. Z kolei IL-2 poddana działaniu monocytów stymuluje ich zdolność do niszczenia komórek nowotworowych i bakterii. W wyniku stymulacji IFN-y i IL-2 monocyty wytwarzają dużą liczbę substancji biologicznie czynnych i mediatorów stanu zapalnego: wolne formy tlenu, H2O2, prostaglandynę E2, tromboksan B2, TNF-a (czynnik martwicy nowotworu a).

Neutrofile. IFN-y zwiększa aktywność cytochromu b558 w neutrofilach (np. przy niedoborze fagocytów – w przewlekłej chorobie ziarniniakowej), czemu towarzyszy zwiększone wewnątrzkomórkowe niszczenie bakterii i zmniejsza ryzyko infekcji.

IFN-y aktywuje produkcję białek ostrej fazy stanu zapalnego, wzmaga ekspresję genów C2 i C4 wchodzących w skład układu dopełniacza.

Limfocyty B. IFN-y hamuje odpowiedź komórek B na IL-4, hamuje wytwarzanie IgE i ekspresję antygenu CD23. Zatem w przypadku zespołu hiperprodukcji IgE i rozlanego neurodermitu u ludzi stosuje się IFN-γ, który hamuje syntezę IL-4 i IL-5 przez komórki pomocnicze T. IFN-y jest induktorem apoptozy zróżnicowanych limfocytów B, dając początek klonom autoreaktywnym. Znosi hamujący wpływ IL-4 na proliferację zależną od IL-2 i wytwarzanie komórek zabójczych aktywowanych limfokinami.

Odgrywając zatem ważną rolę w immunoregulacji, IFN-y jest kluczową cytokiną komórkową i inhibitorem humoralnej adaptacyjnej odpowiedzi immunologicznej.

IFN-γ ma kluczowe znaczenie dla wrodzonej i nabytej odporności na infekcje wirusowe, bakteryjne i niektóre pierwotniaki.

Działanie przeciwwirusowe IFN-y polega na tym, że blokuje replikację wirusowego DNA i RNA, syntezę białek wirusowych i składanie dojrzałych cząstek wirusa (schemat).

IFN-y wpływa na komórkową odpowiedź immunologiczną poprzez aktywację komórek Th1, komórek NK, makrofagów i cytotoksycznych limfocytów T. Zwiększa zarówno oporność nieswoistą, jak i odpowiedź immunologiczną specyficzną dla antygenu. W tym przypadku IFN-γ powoduje działanie cytotoksyczne na komórki zakażone wirusem (ryc. 3, 4).

Działanie antybakteryjne IFN-y polega na jej zdolności do indukowania aktywności niektórych enzymów w zaatakowanej komórce, co prowadzi do zaburzeń metabolicznych i zniszczenia komórki bakteryjnej. Ponadto aktywowane cytotoksyczne limfocyty T i komórki NK aktywowane IFN-y wywierają działanie cytotoksyczne, a aktywowane makrofagi wytwarzają cytokiny prozapalne, reaktywne formy tlenu i azotu oraz prostaglandyny. Czynniki te przyczyniają się do rozwoju procesu zapalnego prowadzącego do śmierci bakterii.

Działanie antyproliferacyjne IFN-y polega na hamowaniu wzrostu komórek nowotworowych poprzez hamowanie syntezy RNA i białek, hamowaniu czynników wzrostu nowotworu stymulujących proliferację komórek, spowalnianiu cyklu komórkowego z przejściem do fazy „spoczynku”, przywróceniu powstrzymującej kontroli nad proliferacją, a także poprzez aktywację cytotoksycznych limfocytów T i komórek NK, które biorą udział w realizacji efektu cytotoksycznego.

Zatem wszystkie interferony stanowią grupę wielofunkcyjnych czynników białkowych o wyraźnym działaniu przeciwwirusowym i przeciwnowotworowym w różnym stopniu. IFN-a ma najsilniejszą aktywność przeciwwirusową spośród wszystkich interferonów, a IFN-y ma bardziej wyraźną aktywność antyproliferacyjną. Wszystkie interferony mają działanie immunoregulacyjne o różnym stopniu nasilenia (IFN-y ma maksimum) - zwiększają aktywność makrofagów, limfocytów T i komórek NK.

PRODUKCJA REKOMBINOWANYCH INTERFERONÓW

Interferony pozyskiwane są na dwa sposoby: leukocyty – otrzymywane z krwi dawców ludzi i zwierząt po ekspozycji na wirusy; rekombinowane – otrzymywane metodą rekombinacji genetycznej – biotechnologia molekularna. Interferon leukocytowy należy sprawdzić pod kątem obecności przeciwciał przeciwko wirusom, aby wykluczyć możliwość zakażenia podczas jego stosowania. Rekombinowane interferony są całkowicie bezpieczne, gdy są stosowane, możliwość zakażenia pacjenta jest całkowicie wykluczona.

Inżynieria genetyczna jest rdzeniem biotechnologia. Zasadniczo sprowadza się to do rekombinacji genetycznej, tj. wymiana genów pomiędzy dwoma chromosomami. Metoda rekombinacji in vitro lub inżynierii genetycznej polega na izolacji lub syntezie DNA z organizmów lub komórek różniących się od siebie, uzyskaniu hybrydowych cząsteczek DNA, wprowadzeniu rekombinowanych (hybrydowych) cząsteczek do żywych komórek, stworzeniu warunków do ekspresji i wydzielania zakodowanych produktów przez geny.

Geny kodujące określone struktury są albo izolowane (klonowane) jako takie (chromosomy, plazmidy), albo wybierane z tych formacji genetycznych przy użyciu enzymów restrykcyjnych. Enzymy te, a znanych jest już ponad tysiąc, potrafią przecinać DNA w wielu specyficznych wiązaniach, co jest ważnym narzędziem inżynierii genetycznej. Niedawno odkryto enzymy, które rozcinają RNA w pewnych miejscach wiązań, podobnie jak enzymy restrykcyjne DNA. Enzymy te nazywane są rybozymami.

Stosunkowo małe geny można wytworzyć w drodze syntezy chemicznej. Aby to zrobić, najpierw odszyfrowują liczbę i sekwencję aminokwasów w cząsteczce białka substancji, a następnie na podstawie tych danych ustalają kolejność nukleotydów w genie, ponieważ każdy aminokwas odpowiada trzem nukleotydom (kodonom). Za pomocą syntezatora chemicznie tworzony jest gen podobny do genu naturalnego.

Gen docelowy uzyskany jedną z metod poddaje się fuzji za pomocą enzymów ligazowych z innym genem, który służy jako wektor do integracji genu hybrydowego z komórką. Jako wektory mogą służyć plazmidy, bakteriofagi, wirusy ludzkie, zwierzęce i roślinne.

Eksprymowany gen (np. gen IFN-y) w postaci rekombinowanego DNA zostaje wprowadzony do komórki bakteryjnej E. coli, która zyskuje nową właściwość – wytwarzanie nietypowej dla tej komórki substancji (IFN-y), kodowanej przez eksprymowany gen (ryc. poniżej).

Jako biorcy eksprymowanego genu najczęściej wykorzystuje się E. coli, B. subtilis, pseudomonady, nietyfoidalne serotypy Salmonella, drożdże i wirusy.

Dzięki inżynierii genetycznej stworzono setki leków do celów medycznych i weterynaryjnych, uzyskano rekombinowane szczepy superprodukcyjne, z których wiele znalazło praktyczne zastosowanie. Genetycznie modyfikowane szczepionki przeciwko wirusowemu zapaleniu wątroby typu B, interleukiny-1, 2, 3, 6, insulina, hormony wzrostu, interferony a, b, y, czynnik martwicy nowotworu, peptydy grasicy, mielopeptydy, tkankowy aktywator plazminogenu, erytropoetyna, są już stosowane w medycynie. Antygeny HIV, czynnik krzepnięcia krwi, przeciwciała monoklonalne i wiele antygenów do celów diagnostycznych.

Do kluczowych składników odpowiedzi immunologicznej należą: interleukina-2 (IL-2), interferon gamma (IFN-y) i interferon alfa (IFN-a). Na ich podstawie stworzono różne leki rekombinowane cytokiny, które znalazły szerokie zastosowanie w medycynie humanitarnej i weterynaryjnej, m.in.:

- IFN-y (, St. Petersburg),
- IFN-a (, St. Petersburg).

PREPARATY INTERFERONU

Odrębną grupę leków przeciwwirusowych stanowią preparaty interferonu. Powstały w oparciu o rozszyfrowanie struktury biochemicznej naturalnych IFN, które są produkowane przez wiele komórek krwi. IFN to grupa peptydów o niskiej masie cząsteczkowej, które mają działanie przeciwwirusowe, immunomodulujące i antyproliferacyjne.

W oparciu o rekombinowane interferony firma (St. Petersburg) opracowała leki do użytku weterynaryjnego. Recoferons® to rekombinowane interferony. Obecnie lek RECOFERON® GAMMA pomyślnie przeszedł badania przedkliniczne i kliniczne, a także testy w Federalnej Państwowej Instytucji Budżetowej „VGNKI” podczas rejestracji państwowej oraz przeszedł państwową procedurę rejestracyjną w Rosselkhoznadzor. Numer dowodu rejestracyjnego: 78-3-6.15-2710 nr PVR-3-6.15/03158.

RECOFERON® GAMMA jest rekombinowanym interferonem gamma (IFN-y), ma wyraźną skuteczność przeciwwirusową i jest immunomodulatorem.

IFN-γ jest cytokiną regulatorową wytwarzaną przez komórki NK, komórki CD4, Th1 i komórki supresorowe cytotoksyczne CD8. Receptory interferonu gamma znajdują się w makrofagach, neutrofilach, komórkach NK i cytotoksycznych limfocytach T. IFN-y aktywuje funkcje efektorowe tych komórek, w szczególności ich działanie bakteriobójcze, cytotoksyczność, wytwarzanie cytokin, rodników ponadtlenkowych i nitrotlenkowych. IFN-y blokuje replikację wirusowego DNA i RNA, syntezę białek wirusowych i składanie dojrzałych cząstek wirusa. Jednocześnie powoduje działanie cytotoksyczne na komórki zakażone wirusem.

Hamuje odpowiedź komórek B na interleukinę-4, hamuje wytwarzanie IgE i ekspresję antygenu CD23. Jest induktorem apoptozy zróżnicowanych limfocytów B, dając początek klonom autoreaktywnym. Odwraca hamujący wpływ interleukiny-4 na proliferację zależną od interleukiny-2 i wytwarzanie komórek zabójczych aktywowanych limfokinami. Aktywuje produkcję białek ostrej fazy stanu zapalnego, wzmaga ekspresję genów C2 i C4 składników układu dopełniacza.

Działanie antyproliferacyjne IFN-y polega na hamowaniu wzrostu komórek poprzez hamowanie syntezy RNA i białek, a także hamowanie czynników wzrostu stymulujących proliferację komórek.

AKTUALNOŚCI

Sergey Tsyb: Ważne jest, aby wspierać twórców leków na początkowym etapie

Rząd aktywnie dyskutuje nad programem Farmacja 2030, w którym największą uwagę poświęca się narzędziom wspierającym rozwój własnych leków. O tym oświadczył wiceminister przemysłu i handlu Siergiej Cyb 15 maja na początku Rosyjskiego Forum Farmaceutycznego w Petersburgu.

Część resortów poparła projekt ustawy o sprzedaży leków w supermarketach

Projekt ustawy zezwalającej na sprzedaż leków bez recepty w sklepach stacjonarnych poparł FAS i Ministerstwo Rozwoju. Departamenty poinformowały o tym Izwiestię. Wyjaśnili swoje stanowisko, twierdząc, że doprowadzi to do zwiększenia konkurencji na rynku farmaceutycznym i obniżenia cen. Ponadto leki sprzedawane bez recepty staną się bardziej dostępne dla konsumentów. Po przyjęciu ustawy handlowcy będą mogli uzyskać dostęp do 480 miliardów rubli – mniej więcej tyle, ile eksperci szacują rynek leków dostępnych bez recepty.