Hansı xəstəlik: xərçəng. Molekulyar diaqnostika

“Biz nadir hallarda sevgilimizdən imtina edə bilərik
klinik fərziyyə və xəstələri belə bir şəkildə müalicə etməyə davam edir
onilliklər boyu onlarla necə rəftar edildi...
Bu arada, mövcud paradiqmaların dəyişdirilməsinin vaxtı çatıb”.

Riçard Şilski, ASCO-nun prezidenti

“Ən ağır xəstəliklər ən çox tələb edir güclü dərmanlar, dəqiq tətbiq..."
Hippokrat

Xərçəngin müalicəsinin proqnozu ondan asılıdır klinik mərhələ xəstəlik (TNM), şiş biologiyası və müalicəsi alındı. Müasir nailiyyətlər klinik onkologiya danılmazdır. Və yenə də, yenisini yaratmaqda aşkar uğurlara baxmayaraq antitümör dərmanları, hər gün minlərlə xərçəng xəstəsi onlara kömək etməyən dərmanlar qəbul edir. Bəzi xəstələr üçün empirik müalicə faydalı və təhlükəsiz olacaqdır. Bununla belə, bir çox digər xəstələr üçün terapiya həm faydasız, həm də zəhərli ola bilər.

90-cı illərin sonunda. XX əsr Sitotoksik kimyaterapiya son həddə çatmışdır. İnkişaf molekulyar biologiya və fərdiləşdirilmiş təbabətə diqqət yeni nəsil molekulyar hədəfli dərmanlardan istifadə edərək xəstələrin müalicəsi üçün əsaslı yeni yanaşmaya gətirib çıxardı. Proliferasiyanın blokadası xərçəng hüceyrəsi onun əsas siqnal yollarının - liqandların, membran reseptorlarının, hüceyrədaxili zülalların selektiv inhibəsi yolu ilə əldə edilmişdir.
Bununla belə, yeni yanaşmanın aşkar uğurlarına baxmayaraq, postgenomik eranın birinci onilliyinin sonunda bu yeni müalicə paradiqmasının yenidən nəzərdən keçirilməsinə təcili ehtiyac yarandı. böyük məbləğ qazanılmış şiş müqavimətinin inkişafı ilə əlaqədar klinik uğursuzluqlar.

Məqsədli terapiyanın hədəfləri və müqavimət mexanizmləri
Xərçəngin inkişafı və təkamülünün ən vahid görünüşü D. Hanaan və R. Weinberg (Cell, 2000, 2011) tərəfindən iki dərslik məqaləsində təqdim edilmişdir. Onların xüsusiyyətlərinə əsasən, terapiyanın hədəfləri yalnız qeyri-sabit genomu, xüsusi metabolizm növü, aktiv neoangiogenez və böyümə siqnallarından yayınmaq, qan dövranında dövr etmək və metastaz vermək qabiliyyətinə malik xərçəng hüceyrələri olmamalıdır. Terapiyanın hədəfləri həmçinin şiş mikromühitini, xərçəngin kök hüceyrələrini, eləcə də metastatik kaskadın bütün komponentlərini əhatə etməlidir.
Aydındır ki, bir neçə məqsədli dərmanın kombinasiyasından istifadə edərkən belə, müəyyən bir xəstə üçün müalicə protokolu çərçivəsində belə bir proqramı həyata keçirmək sadəcə mümkün deyil. Tək bir dərman, hətta unikal molekulyar təsir mexanizmi olsa belə, çoxsaylı müqavimət mexanizmlərinin meydana çıxdığı və qurulduğu genetik cəhətdən heterojen, mütərəqqi bir şişin müalicəsində təsirli ola bilməz.
Müxtəlif hədəflənmiş dərmanlara qarşı müqavimətin xüsusi mexanizmləri yaxşı öyrənilmişdir. Bunlara dərman zədələnməsinə cavab olaraq hüceyrələrin sağ qalmasına kömək edən alternativ EGFR yollarının aktivləşdirilməsi, onkogen bypass və avtokrin dövrənin əmələ gəlməsi, membran reseptorunun hüceyrədənkənar sahəsinin itirilməsi (kəsilmiş reseptorun əmələ gəlməsi), kinomanın yenidən proqramlaşdırılması, autofagiya, epitel-mezenximal proseslər daxildir. keçid, epigenetik mexanizmlər və s.
Proqressivləşmə zamanı və terapiyanın təsiri altında şişdə əlavə onkogen mutasiyalar meydana çıxır, onun molekulyar landşaftı dəyişir və genomik qeyri-sabitlik inkişaf edir ki, bu da bu gün geniş yayılmış genomik xaos adlanır (W. George, Jr. Sledge, 2011).
Fərdilik və dəyişkənlik ilə xarakterizə olunan təkcə xərçəng hüceyrələri deyil. İstisna epitel hüceyrələri dəyişikliklər şişlə əlaqəli stromada da baş verir. Stromal hüceyrələr də molekulyar təkamülə məruz qalır, baxmayaraq ki, onlar bərk şişin genetik cəhətdən daha sabit komponentidir.
Mikromühitdən ibarətdir xoşxassəli hüceyrələr stroma, hüceyrələr immun sistemi və iltihablı hüceyrələr, həmçinin bədxassəli klonun təkamülünə və terapiyaya ikincili müqavimətin formalaşmasına təsir göstərir.

Antitümör terapiyasının səmərəsizliyinin səbəbi kimi heterojenlik

Aşağı səmərəliliyin əsas səbəbi empirik terapiyaşiş heterojenliyidir.
Onilliklər ərzində histoloqlar xərçəngi buna görə təsnif edirlər morfoloji xüsusiyyətləri, təsvir edir Müxtəlif növlər xərçəng hüceyrələri və onların şiş stroması ilə əlaqəsi.
Xüsusilə post-genomik dövrdə sürətlə inkişaf edən molekulyar analiz üsulları şişin heterojenliyinin əsl dərəcəsini ortaya qoydu.

Fərdi (intertumoral) heterojenlik
Minlərlə genin ifadə səviyyəsini təhlil etmək üçün mikroarray texnologiyası ilkin olaraq (2000) xərçəngi təsnif etməyə imkan verdi. süd vəzi(RGC) luminal A, luminal B, HER/2 və bazal üçün. Bir qədər sonra, molekulyar taksonomiyanın təkmilləşməsinə vurğu edilir bazal xərçəngkimilərəlavə alt növlər müəyyən edilmişdir. Onların arasında, məsələn, Сlaudin-low (döş kök hüceyrələrinə bənzər gen ifadəsi ilə xarakterizə olunur), mezenximal şişlərin alt növləri (epitelial-mezenximal keçidi tənzimləyən genlər), androgen reseptorlarının ifadəsi və müvafiq aktivləşməsi ilə apokrin şişlərin alt növləri. siqnal yolu, immun cavabı tənzimləyən aktivlik genləri olan alt tiplər.
Döş xərçənginin sonrakı molekulyar tədqiqatları METABRIC (Döş Xərçəngi Beynəlxalq Konsorsiumunun Molekulyar Taksonomiyası) layihəsinin həyata keçirilməsi ilə əlaqələndirildi. Müəyyən edilmişdir ki, şişin genomik mənzərəsinə nöqtə mutasiyaları, daxiletmələr, silinmələr, gücləndirmələr, dublikasiyalar, translokasiyalar və inversiyalar kimi molekulyar hadisələr təsir edə bilər. Məlum olub ki, həm kanserogenezlə əlaqəli olmayan genlər, həm də xərçəngin inkişafı zamanı mutasiyaları tez-tez baş verən genlər (GATA3, TP53 və PIK3CA) somatik mutasiyaya məruz qala bilər. Döş xərçəngində genomik zədələnmə ilə yanaşı, müxtəlif epigenomik pozğunluqlar (DNT metilasiyası), transkripsiya və mikroRNT səviyyəsində zədələnmələr aşkar edilmişdir. Bu tədqiqatlar nəticəsində, yalnız luminal A alt tipində, xəstəliyin nəticəsini təsir edən daha 10 fərqli molekulyar inteqrativ çoxluq təsnif edildi. Həmçinin müəyyən edilmişdir ki, döş xərçənginin bütün dörd “əsas” alt sinifi və yeni “əlavə” molekulyar alt tipləri xərçəng əleyhinə dərmanlara fərqli həssaslıq profillərinə malikdir.
Mədə xərçəngi, kolorektal karsinoma, yumurtalıq xərçəngi və digər lokalizasiyalar üçün müalicə xüsusiyyətlərinə təsir edən molekulyar genetik təsnifatlar yaradılır.

İntratumoral heterojenlik
Onkologiyada əhəmiyyətli dərəcədə daha böyük bir fundamental problem intratumor heterojenlikdir. Müxtəlif molekulyar aberrasiya dəstləri və dərmanlara fərqli həssaslıqları olan bir şişdə bir neçə subklonun birgə mövcudluğu bütün şişə münasibətdə bir hüceyrə fraksiyasını yatırmaq strategiyalarını səmərəsiz edir. Əlavə əlverişsiz amil onun inkişafı zamanı şiş biologiyasında dəyişiklikdir.
İntratumor heterojenlik adətən məkan (coğrafi) və müvəqqəti (təkamül) bölünür.
Məkan heterojenliyi molekulyar genetik fərqlərin mövcudluğunu göstərir ayrı-ayrı bölgələrşişlər, ilkin şiş və onun metastazları arasında genetik fərqlər, həmçinin müxtəlif anatomik yerlərin metastazları arasındakı fərqlər.
Genetik heterojenlik səviyyəsindən asılı olaraq monogenomik (müxtəlif coğrafi ərazilərdə eyni genetik profillər) və poligenomik şişlər (müxtəlif bölgələrdə müxtəlif subklonal hüceyrə populyasiyaları) müşahidə olunur.
Şişin inkişafı zamanı genomda fundamental dəyişikliklər üç zaman nöqtəsində baş verir: xərçəngin in situ invaziv xərçəngə keçidi anında, ilkin invaziv xərçəngin yavaş təkamülü zamanı və metastatik irəliləmə zamanı.
Xərçəngin özünü açıq, qeyri-sabit bir ekosistem kimi apardığına inanmaq üçün bir çox səbəb var, onun inkişafı immunitet sisteminin fəaliyyəti və hipoksiya kimi ətraf mühit amillərinin təzyiqindən asılıdır. Təkamül (müvəqqəti) heterojenliyin formalaşması haqqında birincili şiş Antitümör müalicəsi də aktiv təsir göstərir.
Möhkəm bir şişdə həmişə xəstəliyin son nəticəsini təyin edən kritik əhəmiyyət kəsb edən hüceyrələrin nadir subklonları var. Xəstənin ölümü ən çox ilkin diaqnoz zamanı dominant olmayan və bütün şiş hüceyrələrinin 1% -dən çoxunu təşkil edən bir hüceyrə klonunun bədəninə məruz qalma nəticəsində müşahidə olunur. Belə hüceyrələrin olması bədxassəli miyeloma, xərçəng nümunəsi ilə sübut edilmişdir prostat vəzi və digər yerlərin şişləri üçün. Xəstəliyin bütün tarixi boyunca təkrarlanan ardıcıl biopsiyaların təhlili (bu andan etibarən ilkin diaqnoz xəstənin ölümündən əvvəl) terapiya nəticəsində sağ qalan hüceyrələrin klonunun başlanğıcda dominant olmadığını və inkişafını digər, "əsas", sürətlə yayılan klonların dərmanla aradan qaldırılmasından sonra aldığını göstərdi.
Xəstənin ölümünə səbəb olan bu öldürücü hüceyrə klonunun müəyyən edilməsi və aradan qaldırılması zəruri terapevtik strategiyadır.

Hüceyrə səviyyəsində şiş heterojenliyi
Çoxluq müasir tədqiqatəsas şiş populyasiyasını təmsil edən hüceyrələrdə molekulyar aberrasiyalar aparılmışdır. Eyni zamanda DNT-də meydana gələn struktur dəyişiklikləri erkən mərhələlərşiş inkişafı və genomik təkamülün partlamasına gətirib çıxarır ("böyük mutasiya saatı" adlanır). Bu metodların dezavantajı tədqiqatda nadir subklonların mövcudluğunu nəzərə almaması idi. genetik mutasiyalar, əsas hüceyrələrin ümumi kütləsində gizlənir. Məhz bu hüceyrələrdə geniş subklonal genetik divergensiyaya (“kiçik mutasiya saatı”) töhfə verən nöqtə mutasiyalarının tədricən yığılması baş verir.
Hazırda bu çatışmazlığı aradan qaldırmaq üçün cəhdlər edilir (şişin bir, aparıcı, bədxassəli klon səviyyəsində öyrənilməsi). Müasir molekulyar profilləşdirmə üsulları bunu mümkün edir. Müəyyən edilmişdir ki, şiş sözdə ehtiva edir “Sürücü mutasiyaları” və “sərnişin mutasiyaları”. Sürücü mutasiyalar bu cür mutasiyaları daşıyan hüceyrələrə selektiv böyümə üstünlüyü verir. Sərnişin mutasiyalarının bu təsiri yoxdur.
Tipik olaraq, terapevtik hədəflər kimi yalnız sürücü mutasiyaları araşdırılır. Bununla belə, in Son vaxtlar Sərnişin mutasiyaları həm də tədqiqatçıların diqqətini cəlb edir, çünki onlar immun reaksiyanın induksiyası və proteotoksik stress kimi təsirlərə malikdir. Sərnişin mutasiyaları da antitümör strategiyalarının hədəfi ola bilər.
Genomik və şişlər üçün xarakterik olan çoxsaylı mutasiyaların yığılması xromosom qeyri-sabitliyi, mutasiya böhranı ilə nəticələnə bilər. Genomik qeyri-sabitliyin optimal həddi aşıldığında canlılıq pozulur və bütün sistemin elementlərinin sayı azalır.

Şiş toxumasının analiz üsulları
Şiş toxumasının molekulyar analizi üsulları son dərəcə müxtəlifdir və klassik histologiyanın əhatə dairəsindən çox kənardadır. Bu gün bu üsullara aşağıdakılar daxildir: mikroarray metodu, Southern blotting, Northern blotting, Western blotting, in situ hibridizasiya, polimeraza zəncirvari reaksiya (PCR), real vaxt tərs transkriptaza PZR, immunohistokimya, immunofluoressensiya mikroskopiyası, maldimass spektrometriyası.
Şiş hüceyrəsinin təhlili genom (flüoresan in situ hibridləşmə, spektral karyotipləşdirmə, müqayisəli genomik hibridləşmə), transkripsiya (mikroarray texnologiyası: gen və RNT ifadəsi profili), proteom (iki ölçülü gel elektroforezi, kütlə) səviyyəsində aparıla bilər. spektrometriya, TOF rejimində səthi gücləndirilmiş lazer desorbsiya ionlaşması: matris texnologiyası + kütləvi spektrometriya).
Şiş toxumasının molekulyar tomoqrafiyası zülalların, peptidlərin, dərman birləşmələri, metabolitlər, həmçinin molekulyar proqnozlaşdırıcı biomarkerlər.
Birincil bərk şişin toxumaları, tamamlanmış hematogen metastazların toxumaları (sürətlə böyüyən və klinik cəhətdən əhəmiyyətli), həmçinin sirkulyasiya edən şiş hüceyrələri və sirkulyasiya edən şiş DNT-si (“yatmış” metastazların mövcudluğunun göstəricisi) molekulyar analizə məruz qalmalıdır. Şiş və metastaz biopsiyaları eyni bərk şişin müxtəlif coğrafi yerlərindən aparılmalıdır. Maye biopsiyanın daha informativ (və daha təhlükəsiz) olduğuna inanılır.

Empirikdən fərdi müalicəyə qədər
Şiş, açıq, qeyri-sabitdir bioloji sistem, təkcə fərdi heterojenlik nümayiş etdirmir, həm də təkamül boyu və xüsusilə metastatik irəliləmə zamanı onun molekulyar xüsusiyyətlərini dəyişir. Bərk şiş hüceyrələrinin həm dominant, həm də qeyri-dominant klonları, həmçinin şiş mikromühitinin hüceyrələri dəyişikliklərə məruz qalır.
Bütün şiş hüceyrələrinin yayılmasının qarşısını almaq üçün bir strategiya istifadə olunur kombinasiya terapiyası. Kombinə edilmiş (sinxron və ya ardıcıl) müalicə konsepsiyası ilk dəfə 30 ildən çox əvvəl Qoldi və Koldman tərəfindən təklif edilmişdir. Konsepsiya şiş böyüməsi, onda mutasiyaların tezliyinin artması, davamlı hüceyrə klonlarının yaranması və müqavimətin inkişafı kimi anlayışları birləşdirdi.
Bu günün strategiyası müasir terapiya xərçəng sitostatiklərin, sitostatiklərin və hədəflənmiş dərmanların kombinasiyalarının istifadəsini və hətta iki hədəflənmiş dərmanın (tirozin kinaz inhibitorları və monoklonal antikorlar) birləşməsini əhatə edir. Bu strategiya istifadə edərək şişin yatırılmasına əsaslanır dərmanlar, birincil, sürətlə çoxalan hüceyrələr hovuzuna təsir göstərir. Həyat dövrü Bu hüceyrələrin sayı sürücü mutasiyalarının fəaliyyəti ilə müəyyən edilir. Ümumiyyətlə, sistemin dayanıqlığı bir çox amillərlə, o cümlədən, terapevtik protokollarda rolu nəzərə alınmayan sərnişin mutasiyalarının aktivliyi ilə izah olunur.
Bu gün əsas paradiqma olan fərdiləşdirilmiş terapiya strategiyası antitümör müalicəsi, bütün "şiş sahəsinin" daim dəyişən mənzərəsini nəzərə alır: ilkin bərk şişin klonlarının heterojenliyi, sirkulyasiya edən şiş hüceyrələrinin heterojenliyi, həmçinin çoxsaylı metastatiklərdə "yatmış" xərçəng hüceyrələrinin fenotipik və metabolik heterojenliyi. nişlər sümük iliyi və visseral orqanlar.

Caris Molekulyar Kəşfiyyat Xidmətləri
Antitümör terapiyasının nəticələrini proqnozlaşdıra bilən fərdi proqnozlaşdırıcı şiş markerlərinin müəyyən edilməsi ideyası 2008-ci ildə professor Daniel D. Von Hoff Caris Molecular Intelligence Services (ABŞ) adlı unikal laboratoriyanı yaratdıqda ortaya çıxdı. Bu gün şiş toxumalarının molekulyar profilləşdirilməsi üçün laboratoriyada metodların kombinasiyası istifadə olunur - IHC, CISH, FISH, Next-Generation Sequencing, Sanger Sequencing, Pyro Sequencing, PCR (cobas ®), Fragment Analysis.
Bir neçə il ərzində bu laboratoriyada molekulyar tomoqrafiya 150-dən çox histopatoloji alt tipi olan 65 min xəstə üzərində aparılmışdır. bədxassəli şişlər. Kompleks yanaşma, bir metodun (məsələn, yalnız immunohistokimyəvi) istifadəsinə əsaslanan, lakin molekulyar metodların birləşməsinə əsaslanaraq, müəyyən bir xəstə üçün fərdi proqnozlaşdırıcı şiş markerlərini müəyyən etməyə və bu təhlil əsasında fərdiləşdirilmiş terapiya haqqında qərar qəbul etməyə imkan verir.
Bəzi zülalların ifadəsi (və ya gen gücləndirilməsi) müvafiq dərmanların təyin edilməsini tələb edir, digər zülalların ifadəsi müəyyən bir dərmanın reseptini istisna edir. Beləliklə, irinotekanın tətbiqi üçün TOPO1 ifadəsinə üstünlük verilir, RRM1 ifadəsi gemsitabinin tətbiqi üçün, MGMT ifadəsi temozolamid və ya dakarbazinin tətbiqi üçün əsasdır, HER2-nin eyni vaxtda gücləndirilməsi ilə TOPO2A ifadəsi imkan verir doksorubisin, liposomal doksorubisin və epirubisin ilə müalicə üçün.
Trastuzumab təyin etmək üçün dərmana qarşı müqaviməti proqnozlaşdırmaq üçün HER/2 ifadəsini/amplifikasiyasını aşkar etməklə yanaşı, PTEN (IHC) və PIK3CA (NGS) müayinəsi lazımdır.
Digər tərəfdən, TS ifadəsi fluorourasil, kapesitabin və pemetreksedin istifadəsindən qaçınmağı tələb edir; SPARC (IHC), TLE3 (IHC), Pgp (IHC) ifadəsi dosetaksel, paklitaksel, nab-paklitakseldən çəkinməyi tələb edir.
ER (IHC), HER2 (IHC), HER2 (CISH), PIK3CA (NGS), everolimus və temsirolimus kimi şiş markerlərinin belə bir kombinasiyası ilə təyin edilməməlidir.
Kombinasiya müasir üsullar bioloji görüntüləmə bu gün klinik onkologiyada istifadə edilən hər bir məlum sitotoksik dərman və ya hədəflənmiş dərman üçün molekulyar proqnozlaşdırıcı şiş markerlərini müəyyən etməyə imkan verir. Əvvəlcə şiş toxumasının molekulyar profilinə, ondakı fərdi proqnozlaşdırıcı şiş markerlərinin müəyyən edilməsinə və yalnız bundan sonra müalicə strategiyası planının hazırlanmasına əsaslanan oxşar yanaşma bir sıra hallarda sübut əldə etmişdir. klinik sınaqlar. Onlardan biri TGen, Scottsdale Healthcare və Caris Dx-in iştirak etdiyi Bisgrove Araşdırmasıdır.
Bu tədqiqatın dizaynı inqilabi idi. Hər bir şişin fərdi olduğunu nəzərə alaraq, tədqiqat dizaynının müəllifləri xəstələri şişin anatomik yeri və ya yalnız bir immunohistokimyəvi xüsusiyyət əsasında bir neçə qrupa randomizə etməkdən imtina etdilər. IN bu araşdırma Heç bir müqayisə qrupları yox idi - hər bir xəstə öz nəzarəti kimi çıxış etdi.
Tədqiqatda 9 xəstədən cəmi 66 xəstə iştirak edib. xərçəng mərkəzləri ABŞ: 27% - BC, 17% - CRC, 8% - OC, 48% - digər lokalizasiyalar. Bütün xəstələr müalicə aldılar metastatik xərçəng By ümumi qəbul edilmiş standartlar- yalnız 2-dən 6-ya qədər. Son inkişafdan sonra molekulyar profilləşdirməyə əsaslanan terapiya davam etdirildi.
Tədqiqatın nəticələri göstərdi ki, döş xərçəngi olan xəstələrdə irəliləmə müddəti 44%, kolorektal xərçəngdə - 36%, yumurtalıq xərçəngində - 20%, digər lokalizasiyalarda - 16% artıb. Qeyd etmək lazımdır ki, tədqiqata daxil olan bütün xəstələrdə ikincil müqavimət inkişaf etmişdir dərman müalicəsi, və onların üçün ümumi qəbul edilmiş tövsiyələr əlavə müalicə yox idi. Beləliklə, belə qənaətə gəlinir ki, aqressiv, nadir şişlər, eləcə də müqaviməti inkişaf etmiş mütərəqqi şişlər üçün molekulyar profilləşdirmə və fərdi müalicəyə alternativ yoxdur.

Klinik sınaq dizaynında dəyişiklik
Ayrı-ayrılıqda qeyd etmək lazımdır ki, onkologiyada fərdiləşdirilmiş terapiya paradiqması klinik sınaqların ümumi qəbul edilmiş dizaynını fəal şəkildə dəyişdirir. Səslər getdikcə daha çox eşidilir ki, xəstələrin çoxsaylı populyasiyalara və kohortalara randomizə və təbəqələşdirilməsinə əsaslanan klinik sınaqların nəticələrinə fərdi intratumoral və intertumoral heterojenlik nəzərə alınmaqla yenidən baxılmalıdır. Nəticədə, müasir klinik sınaqların dizaynı getdikcə fərdiləşir.
Belə ən son müasir dizaynlara nümunələr Master protokolları, Səbət sınaqları, Adaptiv sınaq dizaynı və nəhayət, N-of-1 tədqiqatlarıdır. Yeni dizaynların əsas ideyası aşağıdakılardır. Tədqiqat bir neçə təşkilat tərəfindən maliyyələşdirilir əczaçılıq şirkətləri, müəyyən bir lokalizasiyanın xərçənginin müalicəsi üçün müxtəlif hədəfləri və müxtəlif molekulyar təsir mexanizmləri olan dərmanlara malik olan. Xəstələr, ehtimal ki, şişin tam molekulyar profilindən sonra tədqiqata daxil edilir. Bir araşdırmada iştirak edərək, xəstə, müvafiq hədəf zülalların mövcudluğundan asılı olaraq, alternativ olaraq ən çox qəbul edə bilər. təsirli dərmanlar. Terapiya zamanı dərmanın dozaya fərdi uyğunlaşdırılması həyata keçirilə bilər və ya birləşmələrin kokteyl qarışığından istifadə edilə bilər. müxtəlif dərmanlar, müalicə zamanı yaranan ehtiyac. Şişin inkişafı və toksiklik müalicənin dayandırılması üçün əsas deyil, yalnız terapiya növünün dəyişdirilməsi üçün əsasdır. Klinik qərara şişin irəliləməsindən və ya növbəti terapiya kursundan dərhal sonra aparılan şişin molekulyar profilinin nəticələri təsir edir. Beləliklə, tədqiqat zamanı xəstə əvvəlcə ona təyin olunduğundan tamamilə fərqli bir dərman ala bilər.
Nəhayət, yalnız bir xəstə üçün yollar var - N-of-1 tədqiqatları. Bu dizayn fərdiləşdirilmiş terapiya paradiqmasına ən uyğundur. Bu yanaşma yaxın gələcəkdə yaratmağa imkan verəcək fərdi hazırlıqlar xərçəng müalicəsi üçün.
Bununla belə, bu gün də şişin molekulyar profilinə əsaslanan fərdiləşdirilmiş terapiya protokollarından geniş istifadə olunur klinik praktika ABŞ, Avropa, Yaponiyanın qabaqcıl onkoloji mərkəzlərini qəbul etməyə imkan verir klinik nəticələr yeni səviyyə. Belə qlobal mərkəzlərə Memorial Sloan-Kettering Xərçəng Mərkəzi, Harvardda Fərdiləşdirilmiş Genetik Tibb Mərkəzi, MD Andersonda Fərdiləşdirilmiş Tibb İnstitutu, Ohayo Dövlət Universitetində Fərdi Sağlamlıq Mərkəzi daxildir.
2014-cü ilin yanvar ayından Ukraynada Caris Molekulyar Kəşfiyyat Xidmətləri platforması əsasında şiş toxumalarının molekulyar profilinin təyin edilməsi mövcuddur. Bu, Caris Life Sciences şirkətinin ölkələrdə şiş toxumasının molekulyar profili sahəsində rəsmi tərəfdaşı olan AmaxaPharma sayəsində mümkün olub. Şərqi Avropanın. 2014-cü ilin yanvar ayından etibarən bu əməkdaşlıq sayəsində standart müalicə üsulları olmayan nadir şişləri olan onlarla xəstə, həmçinin ilkin və qazanılmış kimyəvi müqaviməti olan xərçəng xəstələri artıq Ukraynada Molekulyar İntellekt tərəfindən molekulyar profilləşdirmədən keçiblər. Empirik yanaşmanın nəticələrindən əhəmiyyətli dərəcədə fərqlənən ilk nəticələr əldə edilmişdir.
Ölkəmizdə molekulyar profilləşdirmə imkanı fərdiləşdirilmiş xərçəng müalicəsi probleminin həllinə yaxınlaşmağa imkan verdi.

Nəticə
Şiş heterojenliyi dərin var klinik təsirlərüçün xərçəng xəstələri. Doğru etmək üçün klinik qərarlar xərçəng hüceyrəsinin biologiyası və onun mikromühiti haqqında ən dolğun təsəvvürə malik olmaq lazımdır. Molekulyar profilləşdirmə ilkin şişin toxumaları, hematogen metastazlar, sirkulyasiya edən şiş hüceyrələri və metastatik niş hüceyrələri bizə fərdi xərçəng müalicəsi proqramının həyata keçirilməsi istiqamətində böyük bir addım atmağa imkan verir.

MÖVZUSUNDA MƏQALƏLƏR Onkologiya və hematologiya

06.01.2019 Onkologiya və hematologiya Promeneva yumurtalıq xərçənginin diaqnozu: gündəlik diaqnostik şəkillərin mümkünlüyü Hematologiyada mikafunginin istifadəsi

İnvaziv göbələk infeksiyaları(IGI) ağır immun çatışmazlığı olan hematoloji onkoloji xəstələrdə xəstələnməni, ölümü, xəstəxanaya yerləşdirmə müddətini və əlaqəli xərcləri artırır. Bu xəstələrdə var çoxlu sayda anatomik maneələrin pozulması, immun supressiya, kimyaterapiyanın səbəb olduğu neytropeniya, böyrək və ya İHİ inkişafı üçün qarşılıqlı əlaqəli risk faktorları qaraciyər çatışmazlığı, hiperqlikemiya və graft-versus-host xəstəliyi və antibiotik müalicəsi geniş diapazon hərəkətlər və ya kortikosteroidlər, mərkəzi venoz kateterlərin quraşdırılması....

06.01.2019 Onkologiya və hematologiya Onkoloq və hematoloqların təcrübəsində trombositopeniya problemi ilə bağlı ekspertlər naminə iclasın qərarı

Trombositopeniya periferik qanda trombositlərin sayının azalması nəticəsində inkişaf edən hemorragik sindromla xarakterizə olunan xəstəlik və sindromlar qrupudur.<150×109/л....

Xərçəng haqqında silsilə məqalələri tamamlayırıq. Bu gün Atlas sizə molekulyar testin nə olduğunu və diaqnoza necə təsir etdiyini ətraflı izah edəcəkdir.

Molekulyar diaqnostikanın necə işlədiyini və onkologiyada hansı yeri tutduğunu anlamaq üçün əvvəlcə şişdə meydana gələn mexanizmləri başa düşməlisiniz.

Şişlərdə molekulyar proseslər

Hüceyrə bölünməsi və ölümünə cavabdeh olan protoonkogenlərdə və supressor genlərindəki mutasiyalar hüceyrənin təlimatlara əməl etməyi dayandırmasına və zülal və fermentləri səhv sintez etməsinə səbəb olur. Molekulyar proseslər nəzarətdən çıxır: hüceyrə daim bölünür, ölməkdən imtina edir və genetik və epigenetik mutasiyalar toplayır. Buna görə də, malign neoplazmalar tez-tez genomun xəstəliyi adlanır.

Şiş hüceyrələrində yüz minlərlə mutasiya baş verə bilər, lakin yalnız bir neçəsi şişin böyüməsinə, genetik müxtəlifliyə və irəliləməyə kömək edir. Onlara sürücülər deyilir. Qalan mutasiyalar, “sərnişin” mutasiyalar özlüyündə hüceyrəni bədxassəli etmir.

Sürücü mutasiyaları şiş müxtəlifliyini təmin edən fərqli hüceyrə populyasiyaları yaradır. Bu populyasiyalar və ya klonlar müalicəyə fərqli cavab verir, bəziləri davamlıdır və residivə səbəb olur. Bundan əlavə, klonların terapiyaya fərqli həssaslığı müalicə zamanı molekulyar profilin köklü dəyişməsinə səbəb ola bilər: hətta populyasiyanın əvvəlində əhəmiyyətsiz olan hüceyrələr də üstünlük əldə edə və müalicənin sonunda dominantlaşa bilər, bu da müqavimətə səbəb olur. və şiş inkişafı.

Molekulyar diaqnostika

Sürücü mutasiyalar, zülalların kəmiyyət və ya strukturunda dəyişikliklər biomarkerlər kimi istifadə olunur - müalicənin seçildiyi hədəflər. Hədəflər nə qədər çox bilinsə, potensial effektiv müalicə rejimlərinin seçimi bir o qədər dəqiq ola bilər.

Sürücü mutasiyalarını başqalarından ayırmaq və şişin molekulyar profilini təyin etmək asan deyil. Bu məqsədlə istifadə edilən texnologiya sıralama, flüoresan in situ hibridləşdirmə (FISH), mikrosatellit analizi və immunohistokimyadır.

Növbəti nəsil sekvensiya üsulları sürücü mutasiyalarını, o cümlədən şişi hədəflənmiş terapiyaya həssas edən mutasiyaları müəyyən edə bilər.

FISH texnologiyasından istifadə edərək, müəyyən bir genin yerləşdiyi xromosomların sahələri rənglənir. İki əlaqəli çox rəngli nöqtə kimerik və ya birləşmə genidir: xromosomların yenidən qurulması nəticəsində müxtəlif genlərin bölmələri bir-birinə bağlandıqda. Bu, onkogenin başqa bir daha aktiv genin tənzimlənməsinin təsiri altına düşməsi ilə nəticələnə bilər. Məsələn, EML4 və ALK genlərinin birləşməsi ağciyər xərçəngi vəziyyətində əsas əhəmiyyət kəsb edir. ALK proto-onkogeni onun yenidən təşkili "tərəfdaşının" təsiri altında aktivləşir ki, bu da hüceyrənin nəzarətsiz bölünməsinə gətirib çıxarır. Onkoloq, restrukturizasiyanı nəzərə alaraq, aktivləşdirilmiş ALK gen məhsuluna (Crizotinib) qarşı yönəldiləcək bir dərman istifadə edə bilər.

Flüoresan in situ hibridləşmə (FISH).

Mikrosatellit analizi DNT təmir sisteminin pozulma dərəcəsini, immunohistokimya isə şiş hüceyrələrinin səthində, sitoplazmasında və nüvələrində yerləşən protein biomarkerlərini göstərir.

Bütün bu tədqiqatlar Atlas biotibbi holdinqinin yeni məhsulu - Solo testinə daxildir. Bu test onkoloqa şişin molekulyar profili və onun geniş spektrli xərçəng əleyhinə dərmanların potensial effektivliyinə necə təsir etdiyi barədə məlumat verir.

Solo, bir şişin daha hədəflənmiş xərçəng müalicələrinə necə cavab verə biləcəyini qiymətləndirmək üçün 450-yə qədər gen və biomarkerləri araşdırır. Bunlardan bəziləri üçün biomarker analizi istehsalçı tərəfindən diktə edilir. Digərləri üçün klinik sınaq məlumatları və beynəlxalq onkoloji icmaların tövsiyələri istifadə olunur.

Hədəflənmiş terapiya üçün hədəflərin seçilməsi ilə yanaşı, molekulyar profilləşdirmə şişi xüsusi müalicəyə davamlı edən mutasiyaları və ya artan toksiklik ilə əlaqəli və fərdi dərman dozasını tələb edən genetik xüsusiyyətləri müəyyən etməyə kömək edə bilər.

Tədqiqat üçün biopsiya materialı və ya əməliyyatdan sonrakı materialın parafinləşdirilmiş blokları istifadə olunur.

Molekulyar profilləşdirmə xəstəlik haqqında əlavə məlumat verir, lakin bu, həmişə müalicə qərarlarına aid edilmir. Məsələn, standart terapiyanın kifayət qədər effektiv olduğu və ya cərrahi müalicənin göstərildiyi hallarda. Bu cür testlərin ən faydalı ola biləcəyi klinik vəziyyətləri müəyyən etmək mümkündür:

• Nadir bir şiş növü;
• Əsas fokus naməlum olan şişlər (metastaz verən şişin ilkin olaraq harada meydana gəldiyi məlum deyil);
• Məqsədli terapiyadan istifadə üçün bir neçə variantın seçilməsi tələb olunan hallar;
• Standart terapiyanın imkanları tükənmişdir və eksperimental müalicə və ya xəstənin klinik sınaqlara daxil edilməsi tələb olunur.

Solo layihə mütəxəssisləri onkoloqlara və ya xəstələrə məsləhət verir və müəyyən bir vəziyyətdə testin lazım olub-olmadığını təklif edir.

Dəqiq Tibb və Klinik Tədqiqat

Tipik olaraq, tibbi təcrübə xüsusi diaqnozu olan xəstələri müalicə etmək üçün ümumi strategiyalardan istifadə edir. Bir strategiya kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi üçün, digəri isə kiçik hüceyrəli olmayan ağciyər xərçəngi üçün istifadə olunur. Bu üsul həmişə onkoloji xəstəliklər üçün uyğun deyil. Molekulyar səviyyədəki fərqlərə görə, hətta eyni şiş növü daxilində xəstələr təsirsiz və ya lazımsız müalicə ala bilərlər.

Artan tədqiqatlar və hədəflənmiş dərmanların ixtirası ilə xərçəngin müalicəsinə yanaşma dəyişməyə başladı. Xəstənin residivsiz dövrünü və ömrünü artırmaq üçün şişin molekulyar profilini, bədənin dərmanlara və kemoterapiyaya reaksiyasını (farmakogenomika) nəzərə almaq və əsas biomarkerləri bilmək lazımdır.

Dəqiq tibb müəyyən bir xəstənin proqnozunu əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra, onkoloji dərmanların ciddi yan təsirlərinin qarşısını ala və xəstənin həyat keyfiyyətini əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşdıra bilər. Ancaq bu metodun mənfi cəhətləri də var.

Məqsədli dərmanların sayı getdikcə artır və onların iki əsas məhdudiyyəti var: molekulyar hədəflənmiş agentlərin əksəriyyəti siqnal yollarının yalnız qismən inhibəsini təmin edir və bir çoxları kombinasiyada istifadə oluna bilməyəcək qədər zəhərlidir.

Təsəvvür edin ki, siz Moskvada memarsınız. Qarşınızda çətin bir iş var - pik saatlarda tıxac problemini bir körpü tikməklə həll etmək. Molekulyar mexanizmləri avtomobillərin hərəkəti ilə müqayisə etmək olar və körpü əsas problemi həll etməli olan əsas dərmandır. Görünür, əsas molekulyar anormallıqları hədəf alan bir neçə dərman (bir sıra körpülər) bu problemi həll edə bilər. Ancaq dərmanların toksikliyi artır və gözlənilməz ola bilər.

Biz xərçəngin molekulyar proseslərini daha yaxşı başa düşdük, lakin dəqiq onkologiyanı klinik praktikaya çevirmək üçün mövcud üsullar çox geridə qalır. Məqsədli terapiyanın tədqiqini sürətləndirmək üçün elm adamları iki yeni yanaşma - Səbət və Umbrella inkişaf etdiriblər.

Basket metodunun mahiyyəti ondan ibarətdir ki, şişin yerindən və adından asılı olmayaraq tədqiqat üçün xüsusi biomarkerə malik xəstələr seçilir. 2017-ci ilin may ayında FDA mikrosatellit qeyri-sabitliyi yüksək (MSI-H) və ya uyğunsuzluq təmiri qüsuru (dMMR) adlı biomarker üçün belə bir müalicəni təsdiqlədi.

Molekulyar anomaliyalar təkcə xəstələr arasında deyil, eyni şiş daxilində də fərqlənir. Heterojenlik onkologiyada əsas problemdir və Umbrella tədqiqat dizaynı onu həll etmək üçün hazırlanmışdır. Umbrella metodu üçün xəstələr əvvəlcə bədxassəli şiş növünə görə seçilir, sonra isə genetik mutasiyalar nəzərə alınır.

Bu cür tədqiqatlar yalnız hədəflənmiş dərmanların fəaliyyəti haqqında məlumat toplamağa kömək etmir - bəzən bu, qeydiyyatdan keçmiş dərmanlarla standart müalicəyə cavab verməyən xəstələr üçün yeganə seçimdir.

Klinik nümunə

Qabaqcıl molekulyar profilləşdirmənin istifadəsinin necə görünə biləcəyinə dair aydın bir nümunə vermək qərarına gəldik.

Dəri melanoması və qaraciyər metastazları olan bir xəstə onkoloqa müraciət etdi. Həkim və xəstə xəstəlik haqqında daha dolğun məlumat əldə etmək üçün molekulyar profilləşdirmə aparmağa qərar verdilər. Xəstədən biopsiya aparıldı və toxuma nümunələri müayinə üçün göndərildi. Diaqnoz nəticəsində şişdə bir neçə mühüm genetik pozğunluq aşkar edilmişdir:

• BRAF genində mutasiya. Hüceyrə diferensiasiyası və sağ qalmasında iştirak edən RAS-RAF-MEK onkogen siqnal yolunun aktivləşməsini göstərir.
• NRAS genində mutasiya. RAS-RAF-MEK siqnal kaskadının əlavə aktivləşdirilməsini göstərir.
• TPMT geninin irsi variantı. Antitümör dərmanı Cisplatinin maddələr mübadiləsinin xüsusiyyətlərini göstərir.

Klinik tədqiqatların nəticələrinə və tövsiyələrə əsasən aşağıdakı nəticələrə gələ bilərik:

• BRAF inhibitorları sinfinin dərmanları (Vemurafenib) potensial olaraq təsirli ola bilər, üstəlik, NRAS mutasiyasının olması MEK inhibitorları (Trametinib) ilə birlikdə siqnal kaskadının ikiqat blokadasını təyin etmək üçün əlavə əsas ola bilər.
• Bilavasitə NRAS onkogenini hədəf alan təsdiq edilmiş terapiya olmasa da, onkogen mutasiyaların immunoterapiya (ipilimumab və pembrolizumab) verildikdə müalicənin uğur ehtimalını artırdığı məlumdur.
• TPMT genindəki irsi genetik variant sisplatinin artan fərdi toksikliyini göstərir, bu da platin tərkibli rejimlərin təyin edilməsi zamanı dozanın tənzimlənməsini tələb edir.

Fotoda: Vladislav Mileiko, Atlas biomedikal holdinqinin şöbə müdiri.

Beləliklə, həkim yalnız xəstənin klinik parametrlərinə deyil, həm də şişin molekulyar xüsusiyyətlərini nəzərə alaraq mümkün müalicə variantları arasında getmək imkanına malikdir.

Molekulyar diaqnostika bütün xərçəng xəstəlikləri üçün panacea deyil. Ancaq bu, onkoloq üçün vacib bir vasitədir, bədxassəli şişlərin müalicəsinə yeni bir baxımdan yanaşmağa imkan verir.

Onkologiya haqqında materiallarımızı oxuduğunuz və şərh etdiyiniz üçün təşəkkür edirik. Məqalələrin tam siyahısı budur:

Ağciyər xərçənginin molekulyar patologiyası müəyyən bir şişin morfoloji və molekulyar genetik xüsusiyyətlərinin məcmusunu öyrənir. Problemin ən mühüm aspektləri xərçəngin biomolekulyar və histogenetik markerlərinin, həmçinin ağciyər xərçəngində apoptozun patologiyasının müəyyən edilməsidir.

Ağciyər xərçənginin biomolekulyar markerləri müxtəlifdir, radiasiya olmayan ağciyər xərçənginin markerləri ilə üst-üstə düşür və müxtəlif genlər, zülallar, hormonlar və digər molekullarla təmsil olunur.

Ağciyər xərçəngində hüceyrə onkogenləri. Ağciyər xərçənginin patogenezində dörd ailənin hüceyrə onkogenləri ən böyük əhəmiyyət kəsb edir: myc, ras, bcl, erb-B.

Hüceyrə onkogenlərinin myc ailəsi - c-myc, L-myc, N-myc - dərhal cavab verən genlərlə təmsil olunur və proliferasiyaya səbəb olan və differensiasiyanı yatıran hüceyrə tənzimləyici zülalları kodlayır. Müəyyən edilmişdir ki, böyümə faktorları olmadıqda c-myc ifadəsinin artması hüceyrə bölünməsinə deyil, bcl-2 tərəfindən inhibə edilə bilən apoptoza səbəb olur. C-myc amplifikasiyası ağciyər xərçənglərinin 10-25% -də, L-myc və N-myc isə yalnız neyroendokrin ağciyər şişlərində (10-30%) rast gəlinir. Myc onkoproteinlərinin artan ifadəsinin təyini daha tez-tez qeyd olunur.

L-myc ifadəsi yalnız neyroendokrin ağciyər şişləri qrupunda, c-myc ifadəsi isə həm kiçik hüceyrəli, həm də kiçik hüceyrəli olmayan ağciyər xərçəngi qruplarında olur. Kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi qrupunda metastazların olması və şiş ölçüsü ilə L-myc və c-myc ifadəsi arasında əhəmiyyətli bir əlaqə quruldu.

Hüceyrə onkogenlərinin ras ailəsi şiş böyüməsi zamanı tez-tez dəyişikliklərə məruz qalır. Genlər GTPaz aktivliyinə malik olan və GTP-yə bağlanan və bununla da böyümə siqnalının hüceyrəyə ötürülməsinə təsir göstərən p21 zülallarının sintezini kodlayır. Ras genlərini aktivləşdirən və 12, 13 və 61-ci kodonlarda lokallaşdırılmış mutasiyalar təsvir edilmişdir.Ağciyər xərçəngində ən çox rast gəlinən mutasiyalar kiçik hüceyrəli ağciyərdən fərqli olaraq qeyri-kiçik hüceyrəli ağciyər xərçənginə xas olan K-ras mutasiyalarıdır. xərçəng. Ağciyər adenokarsinomalarında K-ras mutasiyalarının tezliyi 30%-ə qədər, skuamöz hüceyrəli ağciyər xərçəngində isə yalnız 3%-dir. K-ras mutasiyalarının tütün çəkmə ilə əlaqəsi göstərilmişdir.

K-ras mutasiyaları ağciyər xərçənginin əvvəlində aşkar edilmişdir - alveol epitelinin atipik hiperplaziyası. Eyni lezyonlarda p53 ifadəsi təsvir edilmişdir. Bu onkoproteinin daha yüksək ifadəsi ilə ağciyər xərçənginin glandular diferensiasiyası arasında korrelyasiya tapıldı. Ağciyər adenomatozunun ocaqlarında və çapıqlarda oval və yarıqvari epitelial strukturlarda ras zülal məhsullarının yüksək ifadəsi də qeydə alınıb.

bcl-2 ailəsi bcl-2, bax, bak, bclXL, bclXS-dən ibarətdir, onların zülal məhsulları homo- və heterodimerlər əmələ gətirməyə qadirdir ki, bunlar bəzən şiş hüceyrələrinin proliferasiyası və apoptozuna diametral əks təsir göstərir. Bu ailədən ən çox öyrənilən bcl-2, daxili mitoxondrial membranda, eləcə də nüvədə lokallaşdırılmışdır, hüceyrə proliferasiyasını stimullaşdırır və ehtimal ki, antioksidant fəaliyyətə görə apoptozu maneə törədir. Əksinə, transkripsiyası və sintezi p53 ilə tənzimlənən bax zülalları proliferasiyanı bloklayır və şiş hüceyrələrinin apoptozunu stimullaşdırır. BclXL apoptozu maneə törədir və proliferasiyanı stimullaşdırır, bclXS isə əksinə apoptozu induksiya edir. Beləliklə, bcl-2 - bax, bclXL-bclXS protein məhsulları arasındakı tarazlıq şişdə tarazlığın proliferasiyaya və ya apoptoza doğru yerdəyişməsini müəyyən edir.

Ağciyər xərçəngində supressor genlər. Şişin inkişafında supressor genlərin rolu apoptozu maneə törətməyə və onların hüceyrə onkogenlərinə supressiv təsirini aradan qaldırmağa qədər azalır ki, bu da nəticədə proliferasiyanın aktivləşməsi ilə başa çatır. Supressor genlərə zərərin təsirini həyata keçirmək üçün dəyişikliklər genin hər iki allelinə təsir etməlidir, çünki mutasiyaya uğramış supressor gen həmişə dominant genə resessiv gen kimi bütöv olaraq təsnif edilir. Məsələn, supressor genin allellərindən birinin mutasiyası və ya silinməsi digər allelin itirilməsi və ya dəyişməsi ilə müşayiət olunmalıdır.

Ağciyər xərçəngində supressor genləri nisbətən yaxşı tədqiq edilmişdir. Ən çox məlum olan xromosom delesiyaları aşağıdakı bölgələrə təsir göstərir: 3p21-24, 17p13, 13q14, 9p21-22 və 5q21. 3p21-24 silinməsi ən çox baş verir: kiçik hüceyrəli xərçəngdə - 100% və qeyri-kiçik hüceyrəli xərçəngdə - 85% hallarda. Lakin bu zonada heç bir supressor gen lokallaşdırılmayıb. Digər saytlar məlum supressor genlərinə uyğundur. Məsələn, p53 17p13-də lokallaşdırılır, retinoblastoma geni - 13q14, p16 INK4B(MTS1) və p15 INK4B(MTS2) - 9p21-22. Bu genlərin əksəriyyətinin funksiyaları yaxşı məlumdur və mitotik dövrün G1 fazasının və/və ya apoptozun idarə edilməsi ilə əlaqələndirilir. Onların inaktivasiyası apoptozun inkişafına səbəb olur. Xərçəngdən əvvəlki dəyişikliklər mərhələsində supressor genlərin lokalizasiyasında genomik zədələnmənin aşkarlanması bu genlərin şiş böyüməsinin ilkin mərhələlərində iştirakını göstərir. Hal-hazırda, ağciyər xərçənginin inkişafı üçün vacib görünən və 1 və 16-cı xromosomlarda lokallaşdırılmış bir sıra yeni supressor genləri təsvir edilmişdir.

P53 geni şiş böyüməsi zamanı ən tez-tez dəyişikliklərə məruz qalır. Vəhşi tip p53 (təbii) G1-dən S fazasına hüceyrə keçidinin tənzimlənməsi, DNT təmiri və genomun zədələnməsindən sonra apoptoz daxil olmaqla, çoxlu funksiyaları olan transkripsiya faktorudur. Allellərdən birinin (17p13) digər alleldə nöqtə mutasiyası ilə birlikdə silinməsi əksər bədxassəli şişlərdə müşahidə edilən genetik yenidən qurulmadır. Mutasiya edilmiş p53 əslində hüceyrə onkogeni kimi çıxış edir, şiş hüceyrələrinin çoxalmasını stimullaşdırır və xəstələrin qanında aşkar edilən antikorların əmələ gəlməsinə səbəb olur. Sonuncu, ağciyər xərçəngi üçün immunodiaqnozun və immunoterapiyanın inkişafı üçün əsas olmuşdur.

Mutasiya p53 zülalında konformasiya dəyişikliklərinə səbəb olur və o, hüceyrə nüvələrində toplanır ki, bu da onu immunohistokimyəvi üsullarla təyin etməyə imkan verir. Bunun əksinə olaraq, vəhşi tipli p53-ün çox qısa bir yarımxaricolma dövrü (20 dəqiqə) olduğu düşünülür və buna görə də immunohistokimya ilə aşkar edilmir. Ağciyər xərçəngində p53-ün inaktivasiyası halların təxminən 70% -ində baş verir. p53 ifadəsini sağ qalma ilə əlaqələndirən tədqiqatlar uyğunsuzdur. Ümumiyyətlə, belə bir hərəkət varsa, bu, çox əhəmiyyətsizdir. p53 ilə bədxassəli transformasiya arasındakı əlaqə də aydın deyil. Eyni zamanda, eksperimental məlumatlar göstərir ki, vəhşi tip p53 aktivləşdirildikdə böyümə yavaşlayır və apoptoz inkişaf edir, bu da bədxassəli fenotipin geri dönməsinə səbəb ola bilər.

Ağciyər kanserogenezinin erkən mərhələlərində p53 mutasiyalarının əhəmiyyətinə dair sübutlar var. P53-ün mutant formaları heç vaxt displaziya əlamətləri olmayan ehtiyat bazal hüceyrə hiperplaziyası və ya skuamöz metaplaziyada aşkar edilmir. Displaziyada p53 mutasiyaları 12-53% hallarda, in situ xərçəngi isə ağciyər xərçəngini əhatə edən toxuma tədqiqatlarında 60-90% hallarda aşkar edilir. Displaziya lezyonlarında hüceyrələrin 20% -dən çoxunda p53-ün aşkarlanması geri dönməz prekanseröz dəyişikliklərin göstəricisidir. Bununla belə, p53 mutasiyası ağciyər xərçəngi üçün xarakterik olan məcburi bir fenomen deyil və buna görə də p53-ün olmaması əlverişli bir proqnoz faktoru deyil. Üstəlik, nə p53-ün yığılması, nə də mutasiyası p53-ün şişlərdə təsirsiz hala gətirilə biləcəyi molekulyar mexanizmləri tükəndirmir. p53-ün pozulması mitotik dövrü tənzimləyən digər zülallarla - p21, Mdm2, bax ilə qarşılıqlı əlaqədə olduqda baş verir.

Rb geni 13q14 yerində lokallaşdırılıb, kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi hallarının 80%-də silinir (retinoblastomada olduğu kimi), 110 KDa kütləsi olan nüvə fosfoproteini kodlayır və hüceyrənin G1-dən çıxmasına nəzarət edir. faza. Rb-nin hipofosforilasiyası G1 mərhələsində hüceyrə blokadasına və apoptoza səbəb olur. Rb-nin şişlərdə inaktivasiyası allellərdən birinin itirilməsi və genin ikinci allelinin mutasiyası ilə əldə edilir.

Beləliklə, p53 və Rb supressor genlərinin inaktivasiyası kiçik hüceyrəli ağciyər xərçənginin inkişafı və inkişafı üçün daha böyük əhəmiyyət kəsb edir.

Ağciyər xərçəngində böyümə faktorları, böyümə faktoru reseptorları və bağlayıcı zülallar. Ağciyər xərçənginin inkişafında böyümə faktorları mühüm rol oynayır, otokrin və parakrin stimullaşdırma vasitəsilə şiş böyüməsini təmin edir.

Ağciyər xərçəngində yapışma molekulları və hüceyrədənkənar matris. Adezyon molekulları, inteqrin reseptorları və ağciyər xərçənginin hüceyrədənkənar matrisi şiş hüceyrələrinə modullaşdırıcı təsir göstərir və mühazirənin əvvəlki bölmələrində müzakirə edildiyi kimi şişin böyüməsini, invaziyasını və metastazını təmin edir.

Şişin invaziyasının birinci mərhələsi hüceyrələrarası təmasların sayının azalması, CD44 ailəsindən bəzi yapışma molekullarının konsentrasiyasının azalması və s., və əksinə, hüceyrələrarası təmasların zəifləməsi ilə xarakterizə olunur. şiş hüceyrələrinin hərəkətliliyini və hüceyrədənkənar matrislə təmasını təmin edən başqalarının ifadəsinin artması. Hüceyrə səthində kalsium ionlarının konsentrasiyası azalır, bu da şiş hüceyrələrinin mənfi yükünün artmasına səbəb olur. İnteqrin reseptorlarının ifadəsi artır, hüceyrədənkənar matrisin komponentlərinə - laminin, fibronektin, kollagenlərə qoşulmasını təmin edir. İkinci mərhələdə şiş hüceyrəsi hüceyrədənkənar matrisin deqradasiyasını təmin edən proteolitik fermentləri və onların aktivatorlarını ifraz edir və bununla da invaziyaya yol açır. Eyni zamanda, fibronektin və laminin deqradasiya məhsulları şiş hüceyrələri üçün kemoatraktantdır, onlar invaziyanın üçüncü fazası zamanı deqradasiya zonasına miqrasiya edir və sonra proses yenidən təkrarlanır.

Müxtəlif növ ağciyər xərçənginin histogenetik markerləri. Ağciyər xərçəngi müxtəlif histogenezin şişləri ilə təmsil olunur. Son illərdə ağciyər xərçənginin bütün histoloji növləri kiçik hüceyrəli və qeyri-kiçik hüceyrəli bölünür, bunlar yalnız morfoloji təzahürləri ilə deyil, həm də kliniki, kimyaterapiyaya cavab və xəstələrin həyat proqnozu ilə fərqlənir.

Kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi həmçinin hüceyrə onkogenləri, supressor genlər və böyümə faktorları qrupundan olan xüsusi biomolekulyar markerlər ilə xarakterizə olunur. Bundan əlavə, kiçik hüceyrəli xərçəng də neyroendokrin diferensiasiya əlamətləri ilə fərqlənir. 90%-dən çox hallarda şiş hüceyrələri həm xromoqranin, həm də pansitokeratinləri ifadə edir. Xromoqranin şiş hüceyrələrinin sitoplazmasında qranullar şəklində aşkar edilir. Xromoqranin-müsbət hüceyrələrin sayı və ifadə səviyyəsi şişin yetkinlik dərəcəsindən asılı olaraq dəyişir.

Qeyri-kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi müxtəlif histogenetik qruplara aid olan heterojen şişlər qrupudur: skuamöz hüceyrəli karsinoma (markerlər sitokeratinlər və keratohialindir), adenokarsinoma (mucus sitokeratinləri, səthi aktiv maddə), eləcə də hər ikisi ilə təmsil oluna bilən iri hüceyrəli xərçəng. zəif diferensiallaşmış adenokarsinoma və zəif differensasiya olunmuş skuamöz hüceyrəli karsinoma.xərçəng.

Mühazirə avadanlığı

Makropreparatlar: bronxoektaziya və pnevmoskleroz, xroniki obstruktiv ağciyər amfizemi, kor pulmonale, idiopatik fibrozan alveolitdə pətək ağciyər, ağciyər silikozu, mərkəzi ağciyər xərçəngi, böyrəküstü vəzilərə ağciyər xərçəngi metastazları.

Mikronümunələr: xroniki obstruktiv bronxit, bronxoektaz və pnevmoskleroz, xroniki obstruktiv ağciyər amfizemi, kor pulmonale, ikincili ağciyər hipertenziyasında ağciyər damarlarının restrukturizasiyası, idiopatik fibroz alveolit, sarkoidoz, ağciyər silikozu, periferik xərçəng, kiçik hüceyrə xərçəngi, periferik xərçəng. hüceyrə ağciyəri xərçəng.

Elektron difraksiya nümunələri: xroniki obstruktiv ağciyər amfizemi (alveol kapilyarlarının obliterasiyası), ağciyər adenokarsinoması, kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi.

adına Respublika Onkologiya və Tibbi Radiologiya Elmi-Praktik Mərkəzində. N. N. Aleksandrova hazırda 56 elmi layihə həyata keçirir, onlardan 23-ü molekulyar genetik tədqiqatlarla bağlıdır. Onlar Respublika Molekulyar Genetika Kanserogenez Laboratoriyasında (Onkologiya şöbəsi genetika, hüceyrə və bioçip texnologiyaları, virusologiya, immunologiya və proteonika) aparılır.

Respublika Elmi-Praktiki Mərkəzinin elmi işlər üzrə direktor müavini, Belarus Milli Elmlər Akademiyasının müxbir üzvü, tibb elmləri doktoru deyir ki, ənənəvi diaqnostika vasitələri öz potensialını tükəndirir. Elmlər, professor Sergey Krasnı. - Molekulyar genetik tədqiqat kimi ehtiyatdan istifadə etməyin vaxtı çatıb. Onlar kimyəvi həssaslığı təyin etmək üçün şişləri dəqiq şəkildə yoxlamağa, xəstənin genetik profilinə əsasən xəstəliyin irsi xarakterini təyin etməyə və məqsədyönlü müalicə təyin etməklə məqsədyönlü şəkildə fəaliyyət göstərməyə imkan verir.

2016-cı ildə Respublika Elmi-Praktiki Mərkəzindən 10 000-ə yaxın xəstə keçib, onlardan təxminən 7 000 nəfəri molekulyar bioloji tədqiqatlardan keçib; Terapiyanı fərdiləşdirmək üçün geniş miqyaslı şiş profili təxminən yüz nəfər üzərində aparılmışdır. Molekulyar bioloji markerlər əsasında mərkəzi sinir sisteminin, yumşaq toxumaların və sümüklərin şişləri, limfoma diaqnozu qoyulmuş, bədxassəli şişlərin inkişafının irsi risklərinin qiymətləndirilməsi, dərman dozasının fərdi tənzimlənməsi üçün bədən mayelərində dərmanların konsentrasiyasının monitorinqi, tədqiqatlar aparılmışdır. hüceyrə terapiyası texnologiyaları işlənib hazırlanmış və tətbiq edilmişdir.

Molekulyar biologiyanın nailiyyətlərini yerli klinikaya təqdim etmək üçün artıq ilk beynəlxalq sertifikatlar alınmış, flüoresan in situ hibridləşmə, molekulyar sekvensiya, polimeraza zəncirvari reaksiya (PZR), immunohistokimya, xromatoqrafiya-kütlə spektrometriyasını həyata keçirmək üçün müasir avadanlıq alınmışdır. axın sitometriyası və fermentlə əlaqəli immunosorbent analizi.

Bioloq Viktoriya Mayorova PCR reaksiyası üçün nümunələr hazırlayır.

Yeni inkişaflar

Şişin klinik və morfoloji parametrlərinin və FGFR3 geninin molekulyar genetik statusunun hərtərəfli təhlili yolu ilə sidik kisəsi xərçənginin klinik gedişatının proqnozunu qiymətləndirmək üçün bir üsul.

Bu təhlil əsasında sidik kisəsi xərçənginin patogenezinin molekulyar yollarının modeli yaradılmışdır. Müəyyən bir mutasiyanın mövcudluğundan asılı olaraq, patologiya iki şəkildə inkişaf edə bilər: aşağı bədxassəli və əlverişli proqnoz (FGFR3 və HRAS genlərində mutasiyalar) ilə xarakterizə olunan səthi xərçəng adlanan; erkən metastaz verən və zəif proqnozu (TP53 və RUNX3 genlərində mutasiyalar) ilə xarakterizə olunan daha aqressiv əzələ-invaziv xərçəng.

Bu üsuldan istifadə edərək, TP53 və RUNX3 genlərində mutasiyaları olan, xəstəliyin irəliləməsi riski çox yüksək olan bir qrup xəstə müəyyən edilmişdir. Bu, xəstəliyin gedişatını proqnozlaşdırmaq və müalicənin aqressivlik dərəcəsini müəyyən etmək üçün vacibdir. Xəstənin şişinin səthi şiş kimi inkişaf edəcəyini bilərək, müalicədən sonra ilk növbədə sidik kisəsinə nəzarəti əhatə edəcək.

Xəstəliyin irəliləməsi gözlənilirsə, o zaman metastaz üçün digər daxili orqanların vəziyyətinə nəzarət ediləcək. Bundan əlavə, dərhal sidik kisəsinin radikal çıxarılmasından keçməli olan xəstələr müəyyən edilə bilər, əks halda metastazlar yaranır.

Prostat xərçənginin molekulyar-genetik və radioloji diaqnostikasının qeyri-invaziv kompleks üsulu.

Bu test qanda yüksək səviyyədə prostata xas antigen (PSA) olan xəstənin ilkin biopsiyasının mənfi olduğu zaman aparılmalıdır. Adətən, altı aydan sonra başqa bir biopsiya, sonra başqa (və s. 10-15 dəfə) aparılır, lakin bu aqressiv bir araşdırmadır, buna görə də özümüzü yalnız bir belə müdaxilə ilə məhdudlaşdırmağa imkan verəcək bir həll tələb olunurdu. Alimlər çıxış yolu tapıblar. Sidikdə PCA3 onkogeninin və kimerik TMPRSS2-ERG geninin ifadəsini təyin etməklə, həqiqətən biopsiyaya ehtiyacı olan xəstələri müəyyən etmək mümkündür (qalanları gecikdirilə bilər).

Şiş və ya çapıq etiologiyalı lezyonları olan toxuma mühəndisliyi ilə tənəffüs yollarının transplantasiyası metodunun hazırlanması və tətbiqi.

Söhbət 2-5 ay ərzində ölən xəstələrin kateqoriyasından gedir. Kadavra traxeyanın hüceyrəsizləşdirilməsi, mahiyyətcə matrisin hazırlanması, sonra onu xondrositlərlə, sonra isə epitel hüceyrələri ilə doldurmaq üçün bir üsul təklif edilmişdir. Bundan əlavə, texnologiya xəstələrə sonradan transplantasiya ilə traxeyanın revaskulyarizasiyasını təmin edir. Bütün bunlar bir şiş və ya çapıq çıxarıldıqdan sonra trakeal qüsuru əvəz etmək məqsədi ilə edilir. Hazırda 3 əməliyyat aparılıb. Bütün xəstələr altı aydan çox yaşayırlar - bu ümidverici nəticə hesab olunur.

Laborator diaqnostika üzrə həkim İrina Vladimirovna Stukalova və baş laborant Natalya Zaxarova Pişçik insan papilloma virusunun DNT-sini çıxarmaq üçün analizator hazırlayırlar.

Planlar və perspektivlər

Belarus Milli Elmlər Akademiyasının Genetika və Sitologiya İnstitutu ilə birlikdə "Hədəf hüceyrə terapiyasının yeni üsullarının inkişafı üçün kolorektal xərçəngin şiş kök hüceyrələrinin (TKS) proteomik və molekulyar genetik tədqiqatları" mövzusu planlaşdırılır (proqram Birlik Dövlətinin “Kök Hüceyrə - 2”).

5-fluorourasil-davamlı kolorektal xərçəng hüceyrə xəttinin modelindən istifadə edərək, şişin inkişaf mexanizmlərində SOC-nin rolunun öyrənilməsi və dendritik hüceyrələrdən istifadə edərək peyvəndlərə əsaslanan hüceyrə terapiyasından istifadə edərək SOC-ni hədəfləmək üçün mümkün molekulyar hədəflərin seçilməsi planlaşdırılır. və ya dendritik hüceyrələr və limfokinlə aktivləşdirilmiş killerlər. Bu, bədxassəli şişlərin immunoterapiyasında yeni mərhələ olacaq.

Bioloq İqor Severin şiş hüceyrə xətlərinin kriobankında.

Digər layihə “Molekulyar genetik və epigenetik markerlər əsasında xərçəng riskinin müəyyən edilməsi texnologiyasının inkişafı”dır (Birlik Dövlətinin DNT İdentifikasiyası proqramı). Yoğun bağırsaq xərçəngi olan xəstələrdə xəstəliyin təkrarlanma və ya irəliləmə riskinin molekulyar genetik və epigenetik markerlərinin müəyyən edilməsi üçün innovativ DNT texnologiyasının işlənib hazırlanması planlaşdırılır. Mütəxəssislərin fikrincə, yeni texnologiya vaxtında profilaktik müalicəyə imkan verəcək və metastazların yaranmasının qarşısını alacaq.

Siqnal mikroRNT tərəfindən təmin edilir

Tədqiqatın perspektivli sahəsi epigenetik tənzimləmə mexanizmlərinin, yəni genlərin quruluşuna təsir etməyən, lakin onların fəaliyyət səviyyəsini dəyişdirən proseslərin öyrənilməsidir. Onlardan biri RNT müdaxiləsidir - RNT sintez edilərkən, lakin zülalda özünü göstərməyən tərcümə mərhələsində gen ifadəsini boğmaq üçün bir mexanizm. Və bəzi mikroRNT-nin yüksək səviyyədə ifadəsi aşkar edilərsə, bu orqanda problem olduğunu güman etmək olar.

MikroRNT gen ailəsi bütün insan genomunun 1%-dən bir qədər çoxunu təşkil edir, lakin bütün genlərin demək olar ki, üçdə birinin ifadəsini tənzimləyir. Bir sıra davam edən tədqiqat layihələri müxtəlif şişlərdə mikroRNT-lərin öyrənilməsinə həsr edilmişdir. Şöbə qanda mikroRNT panelinin ifadəsini təyin etməyə əsaslanan xayanın mikrob hüceyrəli şişlərinin diaqnostikası üçün qeyri-invaziv üsul hazırlayır. Eyni molekullar ailəsi, xəstəliklərin diaqnozu ilə yanaşı, xərçəngin gedişatını proqnozlaşdırmaq və fərdi dərman müalicəsini seçmək üçün istifadə olunur.

Tədqiqatın məqsədi əlverişsiz proqnozun markerlərini müəyyən etməkdir (belə xəstələrin bir qrupu müəyyən edilə bilər və əlavə müalicə seçilə bilər). MikroRNT spektrini təyin etmək də vacibdir. Bu, müəyyən kimyaterapiya rejimlərinə həssaslığı göstərəcək (söhbət döş xərçəngindən gedir, bunun üçün markerlər paneli tapılıb).

Müalicə zamanı molekulyar xüsusiyyətləri öyrənməklə, əlavə mutasiyalar yaranarsa, müalicə rejimini tənzimləmək mümkündür. Metod "maye" biopsiya adlanır: qan testindən istifadə edərək, genetik dəyişiklikləri izləyə və xəstəliyin gedişatını daha erkən proqnozlaşdıra bilərsiniz.

Terapiya dərmanları bahalı və yüksək zəhərlidir, buna görə də erkən mərhələdə dərmanlara qarşı müqaviməti müəyyən etmək və əvəzini tapmaq vacibdir.

Molekulyar profilləşdirmə hər bir spesifik şiş üçün xarakterik olan genetik pozğunluqların müəyyən edilməsini əhatə edir, çünki eyni nozoloji formaların molekulyar xüsusiyyətlərə görə fərqləndiyi məlumdur. Onkoloji prosesin gedişatını proqnozlaşdırmaq və müalicəni fərdiləşdirmək üçün də şişin molekulyar portretini bilmək lazımdır. Həssaslıq və toksikliyin molekulyar biomarkerlərini nəzərə alaraq xərçəng xəstələrinə sitostatik dərmanların təyin edilməsinə və məqsədyönlü terapiyaya fərdi yanaşma dərmanların ən dəqiq seçilməsini təmin edir.

Şişlərin molekulyar profilinin bir hissəsi olaraq, dünya nəşrlərindən alınan məlumatların geniş miqyaslı təhlili əsasında döş xərçəngi, yumurtalıq xərçəngi, kolorektal xərçəng, kiçik hüceyrəli ağciyər xərçəngi və melanoma üçün biomarkerlərin çox platformalı panelləri hazırlanmışdır. sistemli antitümör terapiyasının seçilməsi üçün nəzərdə tutulmuşdur.

Kimyaçı Olqa Konstantina Kolos oliqonukleotidlərin sintezini işə salır.

Tədqiqatların coğrafiyasını genişləndirmək lazımdırmı?

Anna Portyanko,

respublika başçısı

molekulyar genetik

kanserogenez laboratoriyası,

həkim med. Elmlər:

Müasir mərhələdə qlioblastomalar qrupundan fərqli proqnozlarla xarakterizə olunan variantlar müəyyən edilmişdir. Morfoloji nöqteyi-nəzərdən qlioblastoma və anaplastik oliqodendrogliomanı qarışdırmaq asandır: hematoksilin-eozinlə boyandıqda, demək olar ki, eyni görünürlər. Ancaq genetik testlər sayəsində fərqlər tapırıq. Üstəlik, patoloji şöbəmizdə müntəzəm olaraq həyata keçirilir.

Lenfomalar oxşar şəkildə "çoxaldı". Məsələn, molekulyar genetik testlər vasitəsilə bir neçə lenfoma Hodgkin lenfomasından təcrid edilmişdir. Əvvəllər hematoksilin-eozin histologiyasına əsaslanaraq, onlar Hodgkin limfoması kimi təsnif edilirdilər və T-hüceyrə reseptorunun molekulyar genetik analizi ortaya çıxanda bunun follikulyar T-hüceyrə limfoması olduğu ortaya çıxdı.

Bu müalicəyə necə təsir edir? İlk növbədə daha dəqiq proqnoz vermək olar. Bir insanda glioblastoma varsa, o zaman orta sağ qalma 1 il, anaplastik oliqodendrogliomadan danışırıqsa, onda 10 ildir.

Biz Avropanın ən yaxşı elmi mərkəzlərindən olan xarici mütəxəssislərlə əlaqələri inkişaf etdiririk. Almaniyadan olan həmkarlarımızla birlikdə biz proteomikanın mühüm sahələrini - tək bir zülalın deyil, bütövlükdə proteomun təhlilini inkişaf etdirməyə çalışırıq. Sitoloji preparatdan başlayaraq bütün sikl yaradılmışdır, mikroskop əsasında lazer mikrodisseksiya sistemi mövcuddur ki, bu da böyük bir şişdən şiş hüceyrələrini təcrid etməyə, sonra kütləvi spektrometriya aparmağa və bu şişdəki bütün zülalların spektrini təyin etməyə imkan verir. .

Tədqiqatların coğrafiyasını genişləndirmək lazımdırmı? Hesab edirəm ki, ölkədə belə bir mərkəzin - Respublika Molekulyar Genetik Kanserogenez Laboratoriyasının olması kifayətdir ki, burada bütün lazımi molekulyar bioloji tədqiqatlar tez bir zamanda aparıla bilər (o cümlədən regionlardan alınan histoloji materialla).

Axın sitometrindən istifadə etməklə təkcə histoloji diaqnostika deyil, həm də ilkin diaqnostika aparmaq imkanımız var. Bir insanın limfa düyünləri çıxarıldıqdan sonra sözün əsl mənasında bir saat ərzində lenfomanın olub olmadığını əvvəlcədən deyə bilərik (və əgər varsa, hansı növ). Bu klinisyenler üçün böyük köməkdir.

Bioloq Anastasiya Paşkeviç nümunələri genetik analizatora yükləyir.

Angelina Jolie nədən qorxurdu?

Respublika Kanserogenez Molekulyar Genetika Laboratoriyasının genetika onkologiya şöbəsinin müdiri Elena Suboch deyir: "Biz şişin inkişafı zamanı baş verən genetik ziyanı öyrənirik". - Mövcud istiqamət xərçəngin inkişafının irsi risklərinin qiymətləndirilməsidir. Şişlərin irsi formaları bütün onkopatologiyaların 1-2%-ni təşkil edir və burada xüsusi müalicə və cərrahi rejimlərdən istifadə edilməlidir. Ailə şiş sindromlarının müəyyən edilməsinin vacib məqsədi patogen mutasiyaları olan xəstənin sağlam qohumlarını müəyyən etməkdir. Nəticədə, xərçəng patologiyasının əlverişsiz nəticələrinin qarşısının alınmasına yönəlmiş bir sıra tədbirlər hazırlamaq mümkündür.

Məsələn, hamıya məlumdur: döş xərçəngi riskini artıran BRCA1 genində mutasiya olan amerikalı aktrisa Ancelina Coli bədxassəli şişin yaranmasının qarşısını almaq üçün radikal əməliyyat keçirib.

Respublika Molekulyar Genetika Kanserogenez Laboratoriyasının alimləri bu patologiyanı tədqiq edirlər.

Belarus Respublika Əsas Tədqiqatlar Fondunun qrantı əsasında 2015-2017-ci illərdə “İnsan süd vəzisinin bədxassəli yenitörəmələrində BRCA1 və BRCA2 genlərinin mutasiya statusunun allel diskriminasiyası sistemi” işi aparılmışdır. Populyasiya tədqiqatı aparıldı və məlum oldu ki, BRCA1 və BRCA2 genlərində mutasiyaların tezliyi qadınlar arasında təxminən 2,5% təşkil edir (mutasiyaların tezlik spektri qonşu ölkələrin sakinlərinin müşahidə etdiyindən fərqlidir).

Hər bir populyasiyanın özünəməxsus genetik xəstəliklər spektri var. Xarakterik mutasiyaları bilməklə əvvəlcə onları sınaqdan keçirə, sonra isə digər variantları axtara bilərsiniz. Tədqiqat layihəsinin nəticəsi real vaxt rejimində polimeraza zəncirvari reaksiyasından istifadə etməklə BRCA1/BRCA2 genlərinin mutasiya statusunun allel ayrı-seçkiliyi üçün sistemin işlənib hazırlanması olmuşdur. Belarus qadınlarında baş verən 5 əsas mutasiyanı müəyyən etdik.

Genetika onkologiya şöbəsinin mütəxəssisləri həmçinin yumurtalıq, endometrium, tiroid, böyrək, kolorektal xərçəng, melanoma və polipoz sindromlarının inkişaf riskini qiymətləndirməyə imkan verən böyük bir marker panelini sınaqdan keçirirlər.

Bu gün məcburi molekulyar genetik tədqiqatlar tələb edən beyin şişləri və limfomaların yeni beynəlxalq təsnifatları mövcuddur. Buna görə də, genetika və hüceyrə texnologiyası şöbələrində biomarkerlərdən istifadə edərək bu cür xəstəliklərin diaqnostikasının alqoritmi hazırlanır.



Xərçəngin diaqnozunun ən müasir və yüksək texnologiyalı üsullarından biri genetik (molekulyar) testlərdir. Bu tədqiqatlar yalnız müəyyən xərçəng növlərinə irsi meylini müəyyən etməyə deyil, həm də kimyaterapiyanın təyin edilməsinin məqsədəuyğunluğunu qiymətləndirməyə və xərçəngin aqressivlik dərəcəsini təyin etməyə imkan verir.

Təl-Əvivdəki Birinci Tibb Mərkəzi hazırda mövcud olan 900-dən çox testdən ən təsirli və sübut edilmiş genetik testləri həyata keçirir. Eyni zamanda, pasiyentin İsrailə uçmasına ehtiyac olmadığı zaman məsafədən sınaq xidməti təqdim edilir. Müəyyən qaydalara riayət etməklə materialın nümunəsini poçtla (ponksiyon və ya əməliyyatdan sonra) göndərmək və tədqiqatın nəticələrini gözləmək kifayətdir.

Oncotype DX

Bu molekulyar test döş xərçəngində istifadə olunur. Tədqiqatın məqsədindən, şişin növündən və xəstənin fərdi xüsusiyyətlərindən asılı olaraq Oncotype DX-nin bir neçə növü fərqləndirilir.

Oncotype DX Döş

Test döş xərçəngi şiş hüceyrələrinin diferensiallaşma dərəcəsini müəyyən etmək üçün istifadə olunur (residiv ehtimalı müvafiq olaraq müəyyən edilir). Kimyaterapiyanın təyin edilməsinin məqsədəuyğunluğunu müəyyən etmək üçün bir şişi çıxarmaq üçün əməliyyatdan sonra istifadə olunur. Tədqiqat estrogen-müsbət şişlər (ER+), regional limfa düyünlərinin metastazı olmayan invaziv döş xərçəngi üçün uyğundur.

Əməliyyatdan sonra müalicə taktikasını seçmək üçün standart əlamətlər:

Genetik testlərin meydana çıxmasından əvvəl, bu üç əlamət sonrakı kimyaterapiya üçün taktikaların müəyyən edildiyi yeganə məlumat mənbəyi idi. Bununla birlikdə, xərçəng hüceyrələrinin aqressivliyi və buna görə də uzaq residiv ehtimalı həmişə şişin ölçüsü və limfa düyünlərində metastazların olması ilə əlaqəli deyil.

Bu gün dünya təbabətində Oncotype DX genetik testi qızıl standart və döş xərçəngi üçün müalicə taktikasının seçilməsində aparıcı meyardır. Bu, həm xəstəliyin residivinin qarşısını almağa, həm də lazımsız kimyaterapiyadan və onunla əlaqəli bütün yan təsirlərdən qaçmağa imkan verir.

Herceptin reseptorları üçün balıq testi

Bu immunohistokimyəvi tədqiqatdır ki, onun köməyi ilə xərçəng hüceyrələrində spesifik reseptorlar (HER-2, PR, ER) aşkar edilir və bu, onu hədəflənmiş dərmanlara həssas edir. Bu, xüsusən də monoklonal antikorlar sinfinə aid olan Herceptin dərmanıdır. O, uzun müddətdir İsraildə döş xərçənginin müalicəsində uğurla istifadə olunur və ömrün uzadılmasında və hətta inkişaf etmiş bir mərhələdə və metastazların mövcudluğunda residivlərin qarşısının alınmasında yaxşı nəticələr göstərmişdir.

Döş xərçənginin təxminən hər 4 hadisəsindən 1-də şiş Herceptin terapiyasına həssasdır və bu, xüsusi reseptorlar üçün molekulyar testlə müəyyən edilə bilər. Standart üsullarla (radioterapiya və kemoterapiya) müqayisədə bioloji preparatlarla müalicənin üstünlüyü zərərli yan təsirlərin olmamasıdır.

CYP2D6 geni üçün molekulyar test

Yalnız hormona bağlı döş şişləri hallarında istifadə olunur. Belə xərçəng hüceyrələrinin tərkibində estrogen və progesteron hormonları üçün reseptorlar var ki, bu da onları hormonal terapiyanın təsirlərinə qarşı həssas edir (xüsusilə menopoz zamanı qadınlarda).

Araşdırmalar göstərib ki, istifadə edilən hormon əvəzedici dərmanlar eyniadlı genin kodlaşdırdığı xüsusi CYP2D6 fermenti sayəsində qaraciyərdə aktiv maddəyə çevrilir. Orta hesabla, insanların 10% -ə qədərində bu genin mutasiyası var, buna görə hormonların tam çevrilməsi mümkün deyil.

Genetik test bu mutasiyanı müəyyən etməyə və beləliklə, hormonal dərmanlarla müalicənin effektiv olub-olmadığını müəyyən etməyə və residiv riskini qiymətləndirməyə imkan verir. Təl-Əvivdəki Birinci Tibb Mərkəzində bu tədqiqat xəstənin tüpürcəyindən alınan materialla aparılır.

Oncotype DX Colon

Residiv riskini və şişin irəliləmə dərəcəsini hərtərəfli ölçmək üçün kolon xərçəngində istifadə edilən molekulyar tədqiqat. Testin mahiyyəti mürəkkəb proqram təminatından istifadə etməklə xərçəng hüceyrəsinin diferensiallaşma, atipiklik və gen aberrasiyaları dərəcəsinə cavabdeh olan 12 DNT geninin təhlilindən ibarətdir. Təhlil nəticəsi ədədi formaya çevrilir və 0-dan 100-ə qədər qiymətə malikdir.

Oncotype DX Colon tədqiqatı ilkin şişi çıxarmaq üçün əməliyyatdan sonra və regional limfa düyünlərində metastazların olmaması şərti ilə 2-ci mərhələdə bədxassəli kolon şişləri olan xəstələrə təyin edilir. Kolon xərçəngi olan xəstələrin təxminən 15% -ində təkrarlanmaya meylli olmayan qeyri-aqressiv bir şiş forması var. Test bu riski qiymətləndirməyə və lazımsız kemoterapiyadan qaçmağa imkan verir.

İsraildə Oncotype DX Colon genetik testinin müddəti təxminən iki həftədir və material birbaşa ilkin şişdən götürülür. Qiymətləndirmə 100 ballıq şkala üzrə aparılır, hərtərəfli nəticə çıxarılır və sonrakı müalicə taktikası seçilir.

K-RAS testi

Setuximab ilə məqsədyönlü terapiyaya kolon xərçənginin həssaslığını təyin etməyə imkan verən xüsusi bir genetik test. Dərman şiş hüceyrələrində EGFR reseptorlarını seçici şəkildə bloklayan monoklonal antikordur. Kolorektal xərçəngin aqressivliyi birbaşa spesifik epidermal böyümə faktoru reseptorlarının (EGFR) ifadəsindən asılıdır.

K-RAS bağırsaq epitelində hüceyrə bölünməsinə nəzarət edən reaksiyalar kaskadında iştirak edən bir proteindir. Bu proteini kodlayan gendəki mutasiyalar Setuximab ilə müalicənin təsirsiz olmasına səbəb olur. İnsanların təxminən 60% -ində bu mutasiya yoxdur, buna görə də testin nəticəsi mənfi olarsa, dərman təyin edilə bilər.

K-RAS testi müasir onkologiyada son dərəcə vacib diaqnostik meyardır. Bu, Setuximab ilə müalicənin ömrünü 2-5 il uzaması və ya hətta kolon və düz bağırsaq şişlərinin mütərəqqi formaları olan xəstələrin tam sağalmasına gətirib çıxarması ilə əlaqədardır. Cəmi 10 il əvvəl mədə-bağırsaq traktının bu hissələrinin metastatik xərçəngi sağalmaz hesab edilirdi və xəstələr palliativ terapiya alırdılar, bioloji terapiyanın tətbiqi ilə xəstələr sağalmaq şansı əldə etdilər.

EGFR mutasiyası üçün test

Bu genetik test kiçik hüceyrəli olmayan ağciyər xərçəngi üçün istifadə olunur. Hüceyrə proliferasiyasına nəzarət edən iki ferment var - tirozin kinaz və epidermal böyümə faktoru EGFR. Buna görə də, hədəflənmiş şiş terapiyasının müasir üsulları bu fermentləri, Erlotinib və Gefetinib'i inhibə edən iki dərmandan istifadə edir.

Statistikaya görə, xəstələrin 15-20% -də EGFR gen mutasiyası var, buna görə də ikinci sıra kemoterapiya əvəzinə monoklonal antikorlar şəklində hədəflənmiş müalicə təyin edilməlidir. Bu, xüsusilə metastazların olması ilə kiçik hüceyrəli olmayan ağciyər xərçənginin 3 və 4-cü mərhələləri üçün doğrudur. Erlotinib və Gefetinib illərdir xərçəng hüceyrələrinin böyüməsini maneə törədə bilər və xəstədə uzunmüddətli remissiyaya səbəb ola bilər. Bundan əlavə, monoklonal antikorların sağlam hüceyrələrə təsir etmədiyi üçün kemoterapi (sitotoksik təsir) kimi mənfi yan təsirləri yoxdur.

Hərtərəfli müayinə İndi Hədəf

Hər bir atipik xərçəng hüceyrəsinin özünəməxsus reseptor dəsti və gen ifadəsi var, hər bir insanın özünəməxsus barmaq izi olduğu kimi. Kimyaterapiyanın və bioloji hədəflənmiş dərmanlarla müalicənin effektivliyi onların mövcudluğundan və ya olmamasından asılıdır.

Monoklonal antikorlarla müalicənin hazırkı inkişafı elə bir əhatə dairəsi qazanmışdır ki, dərmanı mümkün qədər effektiv seçmək üçün çoxlu molekulyar testlər aparmaq lazımdır. Target Now texnikası onların hamısını bir araşdırmada birləşdirməyə imkan verir ki, bu da atipik hüceyrənin genetik kodunu dəqiq əks etdirəcək.

İlk dəfə rəsmi test nəticələri 2009-cu ildə Amerika Xərçəng Araşdırmaları Assosiasiyasının konfransında təqdim edilmişdir. Onların fikrincə, xərçəngin inkişaf etmiş forması (metastazların olması) olan xəstələrin 98%-dən çoxunda molekulyar hədəflərin tam təsvirini əldə etmək və müvafiq hədəflənmiş terapiyanı seçmək mümkün olub. Bundan əlavə, xəstələrin 30-35% -i, Target Now nəticələrinə görə dəyişdirilmiş terapiya nəticəsində həyat keyfiyyətinin əhəmiyyətli dərəcədə yaxşılaşması və gözlənilən ömür uzunluğunun artması ilə qarşılaşdı.

Test əvvəlki müalicənin səmərəsiz olduğu və ya hər hansı bir yerdə metastazları olan xəstələrdə istifadə üçün göstərilir. Tədqiqat aparmaq üçün şiş toxumasından material tələb olunur (biopsiya və ya əməliyyatdan sonra).

Mamma Print

Bu genetik test döş xərçəngindən sonra təkrarlanma riskini təyin etmək üçün nəzərdə tutulub. Amerika Qida və Dərman Administrasiyasının (FDA) tövsiyələrinə əsasən, test limfa düyünlərində metastatik lezyon olmayan və şişin 5 santimetrdən az olması şərti ilə 60 yaşdan kiçik süd vəzi xərçənginin istənilən forması olan xəstələr üçün göstərilir. ölçüdə.

Tədqiqatın mahiyyəti xərçəng hüceyrəsinin 70 geninin ifadəsinin molekulyar təhlili, ardınca şişin aqressivliyinin qiymətləndirilməsi və riyazi düsturdan istifadə edərək son residiv riskinin əldə edilməsidir. Nəticə müalicə taktikasını seçməyə və xəstələrə kemoterapinin təyin edilməsinin məqsədəuyğunluğunu müəyyən etməyə imkan verir.

Mamma Print və oxşar genetik testlər arasındakı fərq, tədqiqatın "təzə" toxuma nümunəsi üzərində aparılmasıdır, ona görə də xəstənin ponksiyon və ya əməliyyat üçün İsraildə qalmasını tələb edir. Nəticə üçün təxminən bir həftə gözləmək lazımdır, lakin prosedurdan sonra evə gedib yazılı cavab ala bilərsiniz.

Müalicə üçün ərizə doldurun