Wyniki testu Direct Coombsa. Pośredni test Coombsa (test antyglobulinowy, wykrywanie niepełnych przeciwciał przeciw erytrocytom), krew

1.Mikrobiologia medyczna. Przedmiot, zadania, metody, powiązania z innymi naukami. Znaczenie mikrobiologii lekarskiej w praktycznej działalności lekarza.
3. Mikroorganizmy i ich miejsce w systemie świata ożywionego. Nazewnictwo bakterii. Zasady klasyfikacji.
6. Wzrost i rozmnażanie bakterii. Fazy reprodukcji.
7. Odżywianie bakterii. Rodzaje i mechanizmy odżywiania bakterii. Autotrofy i heterotrofy. Czynniki wzrostowe. Prototrofy i auksotrofy.
8. Pożywki. Sztuczne pożywki: proste, złożone, ogólnego przeznaczenia, planowe, diagnostyka różnicowa.
9. Bakteriologiczne metody badania mikroorganizmów. Zasady i metody izolacji czystych kultur bakterii tlenowych i beztlenowych. Charakter wzrostu mikroorganizmów na pożywkach płynnych i stałych.
13. Krętki, ich morfologia i właściwości biologiczne. Gatunek chorobotwórczy dla człowieka.
14. Riketsje, ich morfologia i właściwości biologiczne. Rola riketsii w patologii zakaźnej.
15. Morfologia i ultrastruktura mykoplazm. Gatunek chorobotwórczy dla człowieka.
16. Chlamydia, morfologia i inne właściwości biologiczne. Rola w patologii.
17. Grzyby, ich morfologia i cechy biologiczne. Zasady taksonomii. Choroby wywoływane przez grzyby u ludzi.
20. Oddziaływanie wirusa z komórką. Fazy cyklu życia. Pojęcie trwałości wirusów i uporczywych infekcji.
21. Zasady i metody diagnostyki laboratoryjnej infekcji wirusowych. Metody hodowli wirusów.
24. Struktura genomu bakterii. Ruchome elementy genetyczne, ich rola w ewolucji bakterii. Pojęcie genotypu i fenotypu. Rodzaje zmienności: fenotypowa i genotypowa.
25. Plazmidy bakteryjne, ich funkcje i właściwości. Zastosowanie plazmidów w inżynierii genetycznej.
26. Rekombinacje genetyczne: transformacja, transdukcja, koniugacja.
27. Inżynieria genetyczna. Zastosowanie metod inżynierii genetycznej do otrzymywania leków diagnostycznych, profilaktycznych i terapeutycznych.
28.Rozmieszczenie drobnoustrojów w przyrodzie. Mikroflora gleby, wody, powietrza, metody jej badania. Charakterystyka mikroorganizmów wskaźnikowych sanitarnych.
29. Prawidłowa mikroflora organizmu człowieka, jej rola w procesach fizjologicznych i patologii. Pojęcie dysbakteriozy. Preparaty przywracające prawidłową mikroflorę: eubiotyki (probiotyki).
31. Formy manifestacji infekcji. Trwałość bakterii i wirusów. Pojęcie nawrotu, ponownej infekcji, nadkażenia.
32. Dynamika rozwoju procesu zakaźnego, jego okresy.
33. Rola mikroorganizmów w procesie zakaźnym. Patogeniczność i zjadliwość. Jednostki miary zjadliwości. Pojęcie czynników patogeniczności.
34. Klasyfikacja czynników chorobotwórczych wg o.V. Bucharin. Charakterystyka czynników chorobotwórczych.
35. Pojęcie immunitetu. Rodzaje odporności.
36. Nieswoiste czynniki chroniące organizm przed infekcją. Rola I.I. Miecznikowa w tworzeniu komórkowej teorii odporności.
37. Antygeny: definicja, podstawowe właściwości. Antygeny komórek bakteryjnych. Praktyczne zastosowanie antygenów bakteryjnych.
38. Budowa i funkcje układu odpornościowego. Współpraca komórek immunokompetentnych. Formy odpowiedzi immunologicznej.
39. Immunoglobuliny, ich budowa molekularna i właściwości. Klasy immunoglobulin. Pierwotna i wtórna odpowiedź immunologiczna. :
40. Klasyfikacja nadwrażliwości według Jaila i Coombsa. Etapy reakcji alergicznej.
41. Nadwrażliwość natychmiastowa. Mechanizmy występowania, znaczenie kliniczne.
42. Wstrząs anafilaktyczny i choroba posurowicza. Przyczyny występowania. Mechanizm. Ich ostrzeżenie.
43. Nadwrażliwość opóźniona. Testy alergiczne skórne i ich zastosowanie w diagnostyce niektórych chorób zakaźnych.
44. Cechy odporności przeciwwirusowej, przeciwgrzybiczej, przeciwnowotworowej, odporności transplantacyjnej.
45. Pojęcie immunologii klinicznej. Stan odporności człowieka i czynniki na niego wpływające. Ocena stanu odporności: główne wskaźniki i metody ich określania.
46. Pierwotne i wtórne niedobory odporności.
47. Oddziaływanie antygenu z przeciwciałem in vitro. Teoria struktur sieciowych.
48. Reakcja aglutynacji. Komponenty, mechanizm, metody montażu. Aplikacja.
49. Reakcja Coombsa. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
50. Bierna reakcja hemaglutynacji. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
51. Reakcja hamowania hemaglutynacji. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
53. Reakcja wiązania dopełniacza. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
54. Reakcja neutralizacji toksyny antytoksyną, neutralizacja wirusów w hodowli komórkowej i organizmie zwierząt laboratoryjnych. Mechanizm. Składniki. Metody inscenizacji. Aplikacja.
55. Reakcja immunofluorescencyjna. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
56. Test immunologiczny enzymatyczny. Immunoblot. Mechanizmy. Składniki. Aplikacja.
57. Szczepionki. Definicja. Współczesna klasyfikacja szczepionek. Wymagania dotyczące produktów szczepionkowych.
59. Profilaktyka szczepionkowa. Szczepionki wykonane z zabitych bakterii i wirusów. Zasady gotowania. Przykłady zabitych szczepionek. Powiązane szczepionki. Zalety i wady zabitych szczepionek.
60. Szczepionki molekularne: toksoidy. Paragon. Zastosowanie toksoidów w profilaktyce chorób zakaźnych. Przykłady szczepionek.
61. Szczepionki modyfikowane genetycznie. Paragon. Aplikacja. Zalety i wady.
62. Terapia szczepionkowa. Koncepcja szczepionek terapeutycznych. Paragon. Aplikacja. Mechanizm akcji.
63. Diagnostyczne preparaty antygenowe: diagnostyka, alergeny, toksyny. Paragon. Aplikacja.
64. Sera. Definicja. Współczesna klasyfikacja serum. Wymagania dotyczące preparatów serwatkowych.
65. Preparatami przeciwciał są surowice stosowane w leczeniu i zapobieganiu chorobom zakaźnym. Metody uzyskiwania. Powikłania podczas stosowania i ich zapobieganie.
66. Preparaty przeciwciał to surowice stosowane w diagnostyce chorób zakaźnych. Metody uzyskiwania. Aplikacja.
67. Pojęcie immunomodulatorów. Zasada działania. Aplikacja.
68. Interferony. Natura, metody produkcji. Aplikacja. Nr 99 Interferony. Natura, metody produkcji. Aplikacja.
69. Leki do chemioterapii. Pojęcie wskaźnika chemioterapeutycznego. Główne grupy leków chemioterapeutycznych, mechanizm ich działania przeciwbakteryjnego.
71. Lekooporność drobnoustrojów i mechanizm jej występowania. Pojęcie szpitalnych szczepów mikroorganizmów. Sposoby przezwyciężenia lekooporności.
72. Metody diagnostyki mikrobiologicznej chorób zakaźnych.
73. Czynniki wywołujące dur brzuszny i dur brzuszny. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
74. Patogeny escherichiozy. Taksonomia. Charakterystyka. Rola Escherichia coli w stanach normalnych i patologicznych. Diagnostyka mikrobiologiczna escherichiozy.
75. Patogeny shigellozy. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
76. Patogeny salmonellozy. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna salmonellozy. Leczenie.
77. Patogeny cholery. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
78. Gronkowce. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna chorób wywoływanych przez gronkowce. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
79. Streptokoki. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna zakażeń paciorkowcami. Leczenie.
80. Meningokoki. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna zakażeń paciorkowcami. Leczenie.
81. Gonokoki. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna rzeżączki. Leczenie.
82. Czynnik sprawczy tularemii. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
83. Czynnik sprawczy wąglika. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
84. Czynnik sprawczy brucelozy. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
85. Czynnik wywołujący zarazę. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
86. Patogeny beztlenowej infekcji gazowej. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
87. Czynniki wywołujące zatrucie jadem kiełbasianym. Taksonomia i charakterystyka Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
88. Czynnik sprawczy tężca. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka i leczenie mikrobiologiczne.
89. Beztlenowce nie tworzące przetrwalników. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka i leczenie mikrobiologiczne.
90. Czynnik sprawczy błonicy. Taksonomia i charakterystyka. Warunkowo patogenne maczugowców. Diagnostyka mikrobiologiczna. Wykrywanie odporności anoksycznej. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
91. Patogeny krztuśca i parakokluszu. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
92. Patogeny gruźlicy. Taksonomia i charakterystyka. Warunkowo chorobotwórcze prątki. Diagnostyka mikrobiologiczna gruźlicy.
93. Promieniowce. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Leczenie.
95. Czynnik sprawczy chlamydii. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Leczenie.
96. Czynnik sprawczy kiły. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Leczenie.
97. Czynnik sprawczy leptospirozy. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna. Specyficzna profilaktyka. Leczenie.
98. Czynnik sprawczy boreliozy. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka mikrobiologiczna.
99. Mikrobiologia kliniczna, jej zadania. Vbi, cechy przyczyny występowania.Rola drobnoustrojów warunkowo chorobotwórczych w występowaniu zakażeń szpitalnych.
100. Klasyfikacja grzybów. Charakterystyka. Rola w patologii. Diagnostyka laboratoryjna. Leczenie.
101. Klasyfikacja grzybic. Grzybice powierzchowne i głębokie. Grzyby drożdżopodobne z rodzaju Candida. Rola w patologii człowieka.
102. Czynnik wywołujący grypę. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka laboratoryjna. Specyficzna profilaktyka i leczenie.
103. Czynnik sprawczy polio. Taksonomia i charakterystyka. Diagnostyka laboratoryjna. Specyficzna profilaktyka.
104. Patogeny wirusowego zapalenia wątroby typu a i e. Taksonomia. Charakterystyka. Diagnostyka laboratoryjna. Specyficzna profilaktyka.
stosować u pacjentów z hemolizą wewnątrznaczyniową. U niektórych z tych pacjentów wykrywane są przeciwciała anty-Rhesus, które są niekompletne i monowalentne. W szczególności oddziałują z erytrocytami Rh-dodatnimi, ale nie powodują ich aglutynacji. Obecność takich niekompletnych przeciwciał określa się za pomocą pośredniego testu Coombsa. W tym celu do układu przeciwciał anty-Rh + erytrocyty Rh-dodatnie dodaje się surowicę antyglobulinową (przeciwciała przeciwko immunoglobulinom ludzkim), co powoduje aglutynację erytrocytów. Za pomocą reakcji Coombsa diagnozuje się stany patologiczne związane z wewnątrznaczyniową lizą erytrocytów pochodzenia immunologicznego, na przykład chorobę hemolityczną noworodka: erytrocyty płodu Rh-dodatniego łączą się z niepełnymi przeciwciałami przeciwko krążącemu we krwi czynnikowi Rh, które mają przeszło przez łożysko od matki Rh-ujemnej.
Mechanizm. Trudność w identyfikacji przeciwciał niekompletnych (monowalentnych) wynika z faktu, że przeciwciała te wiążąc się z epitopami konkretnego antygenu nie tworzą struktury siatkowej, a reakcji pomiędzy antygenami a przeciwciałami nie wykrywa się ani poprzez aglutynację, wytrącanie, ani lub inne testy. Do identyfikacji powstających kompleksów antygen-przeciwciało konieczne jest zastosowanie dodatkowych układów testowych. W celu wykrycia niekompletnych przeciwciał np. przeciwko antygenowi Rh erytrocytów w surowicy krwi kobiety ciężarnej reakcję przeprowadza się dwuetapowo: 1) erytrocyty zawierające antygen Rh dodaje się do dwukrotnych rozcieńczeń surowicy testowej i przechowuje w 37 ° C przez godzinę; 2) Do dokładnie umytych po pierwszym etapie erytrocytów dodaje się króliczą surowicę anty-ludzką i antyglobulinę (we wstępnie miareczkowanym rozcieńczeniu roboczym). Po inkubacji przez 30 minut w temperaturze 37°C wyniki ocenia się na podstawie obecności hemaglutynacji (reakcja dodatnia). Należy kontrolować składniki reakcji: 1) surowica antyglobulinowa + krwinki czerwone, o których wiadomo, że są uczulone specyficznymi przeciwciałami; 2) erytrocyty traktowane surowicą prawidłową + surowicą antyglobulinową; 3) Erytrocyty Rh-ujemne traktowane surowicą testową + surowicą antyglobulinową.
50. Bierna reakcja hemaglutynacji. Mechanizm. Składniki. Aplikacja.
Pośrednia (bierna) reakcja hemaglutynacji(RNGA, RPGA) polega na wykorzystaniu erytrocytów (lub lateksu) z zaadsorbowanymi na ich powierzchni antygenami lub przeciwciałami, których oddziaływanie z odpowiednimi przeciwciałami lub antygenami surowicy krwi pacjenta powoduje, że erytrocyty sklejają się i opadają na dno naczynia krwionośnego. probówka lub kuweta w postaci zapiekanego osadu.
Składniki. Do przeprowadzenia RNGA można wykorzystać erytrocyty owiec, koni, królików, kurczaków, myszy, ludzi i innych, które przechowuje się do przyszłego wykorzystania poprzez działanie formaldehydem lub aldehydem glutarowym. Zdolność adsorpcyjna erytrocytów wzrasta, gdy traktuje się je roztworami garbników lub chlorku chromu.
Antygenami w RNGA mogą być antygeny polisacharydowe mikroorganizmów, ekstrakty szczepionek bakteryjnych, antygeny wirusów i riketsj, a także inne substancje.
Czerwone krwinki uwrażliwione na nadciśnienie nazywane są diagnostyką erytrocytów. Do przygotowania diagnostyki erytrocytów najczęściej wykorzystuje się erytrocyty owcze, które charakteryzują się dużą aktywnością adsorbcyjną.
Aplikacja. RNGA służy do diagnozowania chorób zakaźnych, oznaczania hormonu gonadotropowego w moczu podczas ustalania ciąży, wykrywania nadwrażliwości na leki, hormony i w niektórych innych przypadkach.
Mechanizm. Test hemaglutynacji pośredniej (IRHA) ma znacznie wyższą czułość i swoistość niż test aglutynacji. Służy do identyfikacji patogenu na podstawie jego struktury antygenowej lub do wskazania i identyfikacji produktów bakteryjnych - toksyn w badanym materiale patologicznym. W związku z tym stosuje się standardową (komercyjną) diagnostykę przeciwciał erytrocytowych, uzyskiwaną poprzez adsorpcję specyficznych przeciwciał na powierzchni garbowanych (poddanych działaniu garbników) erytrocytów. W studzienkach plastikowych płytek przygotowuje się seryjne rozcieńczenia materiału testowego. Następnie do każdej studzienki dodaje się równą objętość 3% zawiesiny czerwonych krwinek obciążonych przeciwciałami. Jeśli to konieczne, reakcję prowadzi się równolegle w kilku rzędach dołków z erytrocytami obciążonymi przeciwciałami o różnej swoistości grupowej.
Po 2 godzinach inkubacji w temperaturze 37°C wyniki uwzględnia się w ocenie wygląd osad erytrocytów (bez wytrząsania): przy reakcji negatywnej na dnie studzienki pojawia się osad w postaci zwartego krążka lub pierścienia, przy reakcji pozytywnej - charakterystyczny koronkowy osad erytrocytów, cienki film o nierównych krawędziach .

Zasada antyglobuliny. Przeciwciała przeciw erytrocytom typu niekompletnego oraz cząsteczki dopełniacza (C) znajdujące się na powierzchni erytrocytów wykrywa się – metodą bezpośrednią – poprzez ich aglutynację w kontakcie z surowicą zwierzęcą zawierającą przeciwciała przeciwko antyglobulinie ludzkiej (surowica antyglobulinowa). Niekompletne przeciwciała wolne w surowicy wykrywa się – test pośredni – poprzez przyłączenie ich do mieszaniny prawidłowych czerwonych krwinek grupy 0, których wszystkie antygeny należą do znanego układu Rh, a następnie ulegają aglutynacji pod wpływem surowicy antyglobulinowej.

Materiały, odczynniki do testu antyglobulinowego Coombsa: probówki 10/100 ml; pipety miarowe 1, 2 ml; Pipety Pasteura; statywy; nieszlifowane szkiełka; 8,5‰ roztwór NaCl; Czerwone krwinki. Czerwone krwinki pacjenta, a także te z grupy 0, zostaną pobrane ze świeżo pobranej krwi z zastosowaniem środka przeciwzakrzepowego (roztwór EDTA).

Krwinki czerwone grupy 0 należy wybierać w taki sposób, aby pochodziły od zdrowych osób i zawierały wszystkie Antygeny Rh. Można je przechowywać do 7 dni w autologicznym osoczu w temperaturze + 4°C. W przypadku braku czerwonych krwinek grupy 0 można zastosować znaną mozaikę antygenową, mieszaninę czerwonych krwinek grupy 0, czerwonych krwinek Rh dodatnich i Rh ujemnych.

Serum pacjent musi być świeżo wybrany.

Surowica antyglobulinowa wyprodukowane przez Instytut. Dr I. Cantacuzino dostępny jest w postaci liofilizowanej w ampułkach 1 ml. Po rozpuszczeniu przechowywać surowicę w temperaturze -20°C.

Technika testu antyglobulinowego Coombsa:
A) Bezpośredni test Coombsa: Przepłucz czerwone krwinki pacjenta 3 razy roztworem NaCl o stężeniu 8,5‰.
Na kilka szkiełek nałożyć dużą kroplę rozcieńczeń surowicy antyglobulinowej, a obok niej małą kroplę osadu erytrocytów pacjenta; wymieszaj krople z rogiem szklanki. Przygotowany materiał pozostawić na stole na 5 minut, następnie zbadać na obecność aglutynianów. Gdy wynik pozytywny określić maksymalne miano aglutynacji.

B) Pośredni test Coombsa: erytrocyty grupy 0, Rh-dodatnie i Rh-ujemne, przepłukać 3 razy 8,5‰ roztworem NaCl i poddać działaniu surowicy pacjenta w ilości 2 krople erytrocytów na 8-10 kropli surowicy, następnie inkubować 60 minut w temperaturze temperatura 37°C. Następnie ponownie trzykrotnie przemyj czerwone krwinki i potraktuj je surowicą antyglobulinową, zgodnie z instrukcją bezpośredniego testu Coombsa.

Gdy mówimy o o zimnych aktywnych przeciwciałach uwrażliwiać krwinki czerwone grupy 0 na 60 minut. w temperaturze +4°C.

Notatka: 1) Nie należy wykonywać bezpośredniego testu Coombsa na krwinkach czerwonych przechowywanych przez jeden lub więcej dni w temperaturze + 4°C lub temperatura pokojowa, ponieważ wyniki mogą okazać się fałszywie dodatnie z powodu utrwalenia niekompletnych przeciwciał aktywnych na zimno obecnych w normalnej surowicy. 2) W przypadku ciężkiej hiperproteinemii przemyć krwinki czerwone 4-5 razy i sprawdzić, czy w ostatnim płynie płuczącym nie ma białek surowicy, stosując kwas sulfosalicylowy.

Ewentualna pozostałość 2 μg IgG/ml w osadzie erytrocytów może neutralizować surowicę antyglobulinową. Test Coombsa można także wykonać stosując surowice anty-IgG, -IgM, -IgA -C3 i -C4 w celu określenia rodzaju komórek znajdujących się na powierzchni czerwonych krwinek np. u pacjentów cierpiących na autoimmunologiczną chorobę hemolityczną niedokrwistość.

Test Coombsa– test wykrywający przeciwciała przyczepione do powierzchni lub rozpuszczone w osoczu. Służy do wykrywania immunizacji i przeciwciał przeciwko czerwonym krwinkom. Druga nazwa to test antyglobulinowy. Może być bezpośredni lub pośredni.

Na bezpośredni test antyglobulinowy wykrywa przeciwciała utrwalone na powierzchni czerwonych krwinek. Wykonuje się je w przypadku podejrzenia innych chorób autoimmunologicznych, po zażyciu leków (metylodopa, penicylina, chinina) itp.

Czerwone krwinki zostały in vivo uwrażliwione – przeciwciała są już do nich mocno przyłączone, a dodatek surowicy antyglobulinowej (anty-IgG) powoduje, że uwrażliwione komórki sklejają się ze sobą, co jest widoczne gołym okiem.

Pośredni test Coombsa wykrywa przeciwciała antyerytrocytowe w osoczu krwi, wykonuje się je przed transfuzją krwi i w jej trakcie.

Przeciwciała przeciw erytrocytom są rodzajem autoprzeciwciał, tj. przeciwciała przeciwko własnym tkankom. Autoprzeciwciało pojawia się podczas reaktywności patologicznej układ odpornościowy na przykład w przypadku niektórych leków wysokie dawki penicylina.

Czerwone krwinki na swojej powierzchni zawierają różne struktury chemiczne(glikolipidy, sacharydy, glikoproteiny i białka), w medycynie zwane antygenami. Osoba dziedziczy od rodziców specyficzną mapę antygenów na każdej czerwonej krwince.

Antygeny łączy się w grupy, a następnie krew dzieli na kilka grup – według układu AB0, Rh, Kell, Lewis, Kidd, Duffy. Najbardziej znane i znaczące w pracy lekarza to AB0 i czynnik Rh (Rh).

systemu AB0

Status Rh danej osoby jest określany na podstawie obecności tych antygenów. Szczególnie ważnym antygenem erytrocytów jest antygen D. Jeśli jest obecny, to mówi się o nim Krew Rh dodatnia RhD, a jeśli go tam nie ma – och Rh ujemny Rhd.

Jeśli odpowiednie przeciwciało przyłączy się do antygenów erytrocytów, erytrocyt ulega zniszczeniu - hemoliza.

Wskazania

Głównym wskazaniem do bezpośrednitest antyglobulinowy- podejrzenie niedokrwistości hemolitycznej. Najczęściej wykonuje się go w przypadku pierwotnych chorób autoimmunologicznych. niedokrwistość hemolityczna, hemoliza w chorobach reumatycznych, nowotworowych, choroba zakaźna, hemoliza polekowa.

Jeśli niedokrwistość pojawi się kilka dni lub miesięcy po transfuzji krwi lub w jej trakcie długotrwała żółtaczka U noworodka przeprowadza się także bezpośredni test Coombsa.

Pośredniwykonuje się badanie antyglobulinowe przed transfuzją krwi i podczas ciąży u kobiety z ujemnym czynnikiem Rh.

Autoimmunologiczna niedokrwistość hemolityczna

Autoimmunologiczna niedokrwistość hemolityczna (pierwotna)– klasyczna choroba autoimmunologiczna z nieznane powody. Interakcja w obrębie układu odpornościowego zostaje zakłócona, co prowadzi do postrzegania własnych czerwonych krwinek jako obcych. Przeciwciała są syntetyzowane w węzłach chłonnych Klasa IgG(reagują w temperaturze t 37°C) i/lub IgM (w temperaturze t 40°C), które przyczepione do powierzchni erytrocytu uruchamiają szereg enzymów (układ dopełniacza) i „perforują” ścianę erytrocytu , co prowadzi do jego zniszczenia - hemolizy.

Pierwsze objawy są spowodowane zarówno zniszczeniem czerwonych krwinek, jak i spadkiem poziomu hemoglobiny. Pomiędzy nimi:

zmęczenie, ogólna słabość, drażliwość
duszność
ból brzucha i klatki piersiowej, nudności
ciemny kolor moczu
ból pleców
żółtaczkowe przebarwienie skóry i błon śluzowych
zmniejszenie liczby czerwonych krwinek i

Wynik pozytywny bezpośrednio Testy Coombsa W 100% potwierdza rozpoznanie autoimmunologicznej niedokrwistości hemolitycznej, potwierdzając jej podłoże autoimmunologiczne. Jednocześnie wynik negatywny- nie pozwala na usunięcie diagnozy.

Wtórna niedokrwistość hemolityczna

Wtórna autoimmunologiczna niedokrwistość hemolityczna i pozytywny test Coombs może wystąpić w przypadku następujących chorób:

Zespół Evansa
infekcja płuc

Dodatni wynik testu antyglobulinowego w kierunku tych chorób jest jednym z objawów, a nie kryterium rozpoznania.

Choroba hemolityczna noworodka

Przyczyna choroba hemolityczna noworodki - niezgodność grupy krwi matki i płodu, w większości przypadków według układu Rh, w pojedynczych przypadkach – według układu AB0, kazuistycznie – według innych antygenów.

Konflikt Rh rozwija się, jeśli płód kobiety Rh ujemnej odziedziczy od ojca krew Rh dodatnią.

Choroba rozwija się u noworodka tylko wtedy, gdy u matki wykształciły się już przeciwciała przeciwko odpowiednim antygenom, co ma miejsce po poprzednich ciążach, poronieniach, transfuzjach niekompatybilna krew. Bardzo powszechny powód wywołanie syntezy przeciwciał przeciwko antygenom błony erytrocytów - poród (krwawienie płodowo-matczyne). Pierwszy poród na ogół przebiega bez powikłań, natomiast kolejne w pierwszych dniach po porodzie obarczone są chorobą hemolityczną noworodka.

Objawy choroby hemolitycznej noworodka:

zażółcenie skóry
i błony śluzowe
powiększona wątroba i śledziona
problemy z oddychaniem
obrzęk całego ciała
pobudzenie i stopniowa depresja ośrodkowego układu nerwowego

Niedokrwistość po transfuzji krwi

Pośredni test Coombsa przeprowadza się przed transfuzją krwi w celu oceny zgodności, a bezpośredni test Coombsa – po nim, jeśli podejrzewa się hemolizę potransfuzyjną, tj. w przypadku wystąpienia objawów takich jak gorączka, łzawienie (czytaj poniżej). Celem analizy jest identyfikacja przeciwciał przeciwko przetoczonym krwinkom czerwonym, które związały się z krwinkami czerwonymi biorcy i są przyczyną hemolizy potransfuzyjnej, a także przedwczesnego usunięcia czerwonych krwinek dawcy z krwiobiegu biorcy. odbiorca (ten, który otrzymał krew).

Objawy:

wzrost temperatury ciała
wysypka na skórze
ból pleców
czerwony
mdłości
zawroty głowy

Rozszyfrowanie

Warto przypomnieć, że podstawowe zasady rozszyfrowania bezpośrednich i pośrednich testów antyglobulinowych są takie same. Jedyną różnicą jest lokalizacja przeciwciał – we krwi lub na czerwonych krwinkach.

Jeśli bezpośredni test Coombsa jest negatywny– oznacza to, że przeciwciało nie „osiada” na czerwonych krwinkach i należy szukać dalej przyczyny objawów i przeprowadzić ją próbka pośrednia Coombsa
w przypadku wykrycia pozytywnego wyniku testu Coombsa po przetoczeniu krwi, infekcjach, lekach - dodatni wynik utrzymuje się do 3 miesięcy (czas życia czerwonych krwinek wynosi 120 dni - 3 miesiące)
dodatni wynik testu antyglobulinowego choroby autoimmunologiczne trwa miesiące, a nawet lata

Norma

bezpośredni test Coombsa - negatywny
pośredni test Coombsa - negatywny

Wynik jakościowo pozytywny mierzony jest liczbą plusów od jednego do czterech (+, ++, +++, ++++), a ilościowo w formie cyfrowej - 1:16, 1:256 itd.

Tak. Twój lekarz na pewno powinien wiedzieć, że miałeś transfuzję krwi, ponieważ ma to teraz wpływ na prawidłową interpretację wyników badań. Kiedy otrzymujesz cudzą (aczkolwiek wielokrotnie badaną) krew, zawsze istnieje możliwość, że w Twoim organizmie wykształcą się przeciwciała przeciwko przetaczanej krwi. To właśnie te przeciwciała zapewnią zły wpływ na temat stanu zdrowia. W przypadku kolejnych transfuzji krwi lekarz musi wiedzieć, że pacjent już otrzymał transfuzję, co oznacza, że nadszedł czas na syntezę przeciwciał. Dla kobiet w ciąży ta informacja jest jeszcze bardziej aktualne.

3. Czy w przypadku niedopasowania współczynnika Rh pomiędzy matką i dzieckiem, czy wszystkie dzieci będą chore?

Zależy od tego, czy dziecko ma czynnik Rh dodatni czy ujemny (RhD). Nosiciele grup krwi I, II, III i IV mogą być Rh dodatnie lub ujemne. W sytuacji, gdy matka jest Rh ujemna, a dziecko Rh dodatnie, przeciwciała będą wytwarzane już w pierwszej ciąży, ale dopiero po pierwszym porodzie (lub zakończeniu ciąży) nastąpi bezpośredni kontakt krwi matki z krwią. dziecko. Efekt hemolityczny przeciwciał zostanie zrealizowany dopiero w drugim i następne narodziny, co doprowadzi do choroby hemolitycznej u noworodka.

Każda kobieta z ujemny współczynnik Rh należy dokładnie zbadać w czasie ciąży i po porodzie leczenie zapobiegawcze aby zapobiec pojawieniu się przeciwciał i dalszym powikłaniom.

4. Czy w czasie ciąży konieczne jest poznanie grupy krwi męża przed wykonaniem testu Coombsa?

Musisz nie tylko poznać, ale także sprawdzić grupę krwi biologicznego ojca dziecka w czasie ciąży.

Dane

po raz pierwszy zaproponowano w Cambridge w 1945 r
próg wrażliwości - co najmniej 300 utrwalonych cząsteczek przeciwciał na jednej czerwonej krwince
liczba przeciwciał wywołujących hemolizę – indywidualnie dla każdej osoby (od 16-30 do 300)
dynamika innych parametry laboratoryjne niedokrwistość hemolityczna (hemoglobina, bilirubina, retikulocyty) może wrócić do normy, a test Coombsa pozostanie na tym samym poziomie

Test Coombsa był ostatnio modyfikowany: 16 marca 2018 r. przez Marii Bodyan

Test Coombsa to specyficzny test laboratoryjny, który wykrywa przeciwciała znajdujące się w lub na powierzchni czerwonych krwinek. Tej procedury pozwala zdiagnozować układ odpornościowy, w tym u noworodków, a także zidentyfikować hemolityczne reakcje transfuzyjne. Test Coombsa jest aktywnie stosowany w Medycyna sądowa i genetyka naukowa w celu określenia antygenów erytrocytów. Przestrzeganie wszystkich zasad przeprowadzania takiej analizy pozwala uzyskać najbardziej wiarygodny wynik.

Cel testu antyglobulinowego

Bezpośredni test Coombsa pozwala wykryć przeciwciała przeciwko erytrocytom, które są utrwalone na czerwonych krwinkach. Pozytywna reakcja w takim badaniu wskazuje na rozwój choroby autoimmunologicznej.Należy zauważyć, że wynik negatywny nie wyklucza obecności przeciwciał, ponieważ przeciwciała często występują w wolnej postaci, to znaczy nie mają związku z czerwoną krwią komórki. W takich przypadkach wskazane jest przeprowadzenie pośredniego testu Coombsa, który pozwoli na oznaczenie substancji autonomicznych w

Jak przeprowadzana jest analiza?

rodzić krew żylna pacjent przeprowadza się rano na czczo, mimo że nie ma na to znaczących czynników wpływających ostateczny wynik nie znaleziono takiego testu. Pobrany materiał wolno przechowywać w temperaturze od 2 do 8°C nie dłużej niż 7 dni. Aby uzyskać wskaźniki to badanie były jak najbardziej dokładne pełna krew należy dostarczyć do laboratorium w ciągu pierwszych dwóch godzin. Idealnie, test Coombsa powinien wykazywać wynik negatywny, co wskazuje na brak zmian hemolitycznych w organizmie.

Dekodowanie wskaźników końcowych

Test Coombsa jest dość pracochłonną metodą badawczą, wymagającą starannego i precyzyjnego wykonania. Podczas stosowania takiego testu mogą pojawić się pewne trudności związane z błędną interpretacją wyników końcowych ze względu na słabe objawy pozytywne reakcje. Należy zaznaczyć, że nierzetelność analizy – czyli pozytywny wynik testu Coombsa – może być konsekwencją nieskutecznego przemywania czerwonych krwinek, kontaktu z tłuszczami
powierzchni, a także neutralizacja odczynników antyglobulinowych przez składniki

serum. Kolejną wadą tej metody badawczej jest niestabilność pobranego materiału, którego przechowywanie ma pewne cechy.

Powód wynik fałszywie ujemny Podczas ponownego zawieszania może wystąpić nadmierne wstrząsanie zawiesiną czerwonych krwinek. Błędne wyniki mogą wynikać także z obecności zanieczyszczeń w postaci przeciwciał antykomplementarnych, które w trakcie inkubacji ulegają adsorbcji na powierzchni badanych krwinek czerwonych, co skutkuje pojawieniem się wyniku dodatniego. Jeśli próbki do badań zostaną dokładnie umyte i kontrolowane warunki reakcji, niedociągnięcia te można łatwo wyeliminować, co zwiększy szanse na uzyskanie maksimum wiarygodne wskaźniki Testy Coombsa.