Bacillus saman təsviri. Bacillus subtilis

İxtira biotexnologiyaya, baytarlığa aiddir və probiyotiklər qrupundan dərman almaq üçün istifadə edilə bilər. Bacillus subtilis BKM B-2287 bakteriya ştammı torpaqdan təcrid edilmişdir. Hüceyrələr qram-müsbətdir, kapsul əmələ gətirmir, dairəvi sporlar əmələ gətirir, tənəffüs növü aerobdur. Qlükozanı, mannitolu, laktozu hidroliz edir. Saxaroza, inositol, sorbitol, maltoza fermentləşdirmir. Fermentasiya zamanı qaz əmələ gətirmir. Stafilokokların, E. coli, enterobakteriyaların, sitrobakteriyaların, aeromonaların böyüməsini maneə törədir. Ştamm, müəlliflər tərəfindən “Subtilis+” adlandırılan probiotik preparatı əldə etmək üçün istehsal ştammı kimi istifadə olunur. Dərman kənd təsərrüfatı heyvanlarının, quşların və balıqların mədə-bağırsaq traktının fəaliyyətini normallaşdırır; bakterial infeksiyaların müalicəsində və qarşısının alınmasında perspektivlidir. 1 masa

İxtira biotexnologiyaya aiddir və mikrobioloji sənayedə müalicə və profilaktika məqsədilə baytarlıqda istifadə olunan probiotik preparatı əldə etmək üçün istifadə edilə bilər. mədə-bağırsaq xəstəlikləri heyvanlar, quşlar və balıqlar.

Məlum olan Bacillus subtilis 534 ştammı mədə-bağırsaq traktının və disbiozun qarşısının alınması və müalicəsi üçün nəzərdə tutulmuş "Sporobacterin" probiotikinin istehsalçısıdır. SU 1708350, sinif. A 61 K 35/66.

Dezavantajı qısa raf ömrüdür, çünki... edə bilməyən canlı bakteriyaları ehtiva edir uzun müddət xassələrini, dar əhatə dairəsinə malik olan preparatın aşağı təmizliyini qoruyur - heyvanlar üçün yem əlavəsi kimi. Ştamm, dərmanın istifadə dairəsini məhdudlaşdıran polimiksin istisna olmaqla, antibiotiklərə də həssasdır.

Antibiotiklərə davamlılıq xüsusiyyətinə malik olan Bacillus subtilis 3H (GISC No 248) ştammından disbiozun müalicəsi və profilaktikası üçün antibiotiklərlə birlikdə istifadə edilən “Bactisporin” probiotik preparatını əldə etmək üçün istifadə olunur, ferment çatışmazlığı həzm orqanları, irinli infeksiyalar, qida allergiyası. RU 2067616 C1, sinif. A 61 K 35/74, 10.10.1996.

Bacillus subtilis TPAXC-KM-117-nin məlum ştammı patogen mikroorqanizmlərə qarşı inhibitor fəaliyyət göstərir və çoxlu dərmanlara davamlıdır. Ştamm tetrasiklin, rifampisin, alenisilin, xloramfenikol və aprektomisinə davamlıdır. Onun əsasında eyni adlı antibiotik terapiyası zamanı yoluxucu xəstəliklərin müalicəsi və qarşısının alınması üçün antibiotikə davamlı probiotik hazırlanır (RU 2118364 C1, sinif C 12 N 1/20, 27/08/1988).

Bacillus subtilis VKM B-2250-nin məlum ştammı (RU No 2184774, sinif A 61 K 35/74, 07/10/02), baytarlıq və balıqçılıq məqsədləri üçün preparatın əsasını təşkil edir.

İxtiranın qarşıya qoyulduğu problem baytarlıq və balıqçılıq məqsədləri üçün probiotik preparatın yeni effektiv ştamm istehsalçısını müəyyən etməkdir.

İxtiranın həyata keçirilməsi ilə əldə edilən texniki nəticə təklif olunan istehsalçı ştamına əsaslanan probiotik preparatdan istifadə etməklə, müalicənin effektivliyini artırmaq, yemin həzm qabiliyyətini, heyvanların, quşların, balıqların məhsuldarlığını və çəki artımını artırmaqdan ibarətdir. geniş mühit temperaturunda saxlandıqda hazırlıq.

Bacillus subtilis B-9 ştammı torpaqdan təcrid olunmuş və VKM B-2287 nömrəsi ilə Ümumrusiya Mikroorqanizmlər Kolleksiyasına (K.G.Skryabin adına İBFM) yerləşdirilmişdir.

Bacillus subtilis ştammı VKM B-2287 bir neçə il liyofilləşdirilmiş vəziyyətdə və ya eyni mühitdə ən azı 2 ayda bir dəfə məcburi subkulturaya malik ət-pepton bulyonu əsasında ağar mühiti olan ehtiyatlarda saxlanıla bilər.

Gərginliyin xüsusiyyətləri.

Kulturoloji və morfoloji xüsusiyyətləri. Çubuqlar. Bir günlük agar kulturasının ölçüsü 3-5 mikrondur. Hüceyrələr Gram-müsbət rəngə boyanır, mərkəzi diametrləri hüceyrə diametrindən kiçik olan yuvarlaq, tək sporlar əmələ gətirir. MPA üzərindəki koloniyalar ağ rəngdədir və mühitə piqment buraxmır.

Fizioloji əlamətlər. Aerob, optimal böyümə temperaturu 37° C və pH 3.5-8.0. Artım 4-50 ° C temperatur aralığında mümkündür. NaCl ilə əlaqəsi - 3% -ə qədər məzmunda böyümə.

Biokimyəvi əlamətlər. Qlükoza, laktoza, mannitolu parçalayır. Qeyri-fermentasiya olunmayan karbon birləşmələri: saxaroza, inositol, sorbitol, maltoza, laktoza. Sitrat və asetatı təkrar emal edir. Fermentasiya zamanı qaz əmələ gətirmir. Oksidaza, katalaza istehsal edir.

Antaqonist əlamətlər. Bacillus subtilis ştammı BKM B-2287 stafilokoklar, Proteus, Klebsiella, Escherichia coli, Enterobacteriaceae, Citrobacteriaceae, Aeromonas və maya göbələklərinin böyüməsini maneə törədir.

Bacillus subtilis ştammı BKM B-2287 bitkilər, heyvanlar, balıqlar və insanlar üçün patogen deyil.

Cədvəl 1-dəki məlumatlar mikroorqanizmlərin sınaq ştammlarının antaqonist fəaliyyətini göstərir (gecikmiş antaqonizm üsulu).

Bacillus subtilis BKM B-2287 ştammını yetişdirmək üçün tərkibində kazein hidrolizat olan maye qida mühitindən istifadə olunur - 5 sm 3 dm -3 (N aM = 300 mq%); qarğıdalı ekstraktı - 80 sm 3 dm -3 (N am = 290 mg%), MnSO 4 5H 2 O - 0,250 g-dm -3; MgSO 4 7H 2 O - 0,300 q-dm -3; FeSO 4 7H 2 O - 0,015 q-dm -3; CaCl 2 2H 2 O - 0,052 g-dm -3; NaCl - 11000 g-dm -3, distillə edilmiş su.

Mikroorqanizmlərin əvvəlcədən qurudulmuş biokütləsi bulyonu olan sınaq borusuna səpilir. Görünən böyümə göründükdə, koloniyalar sınaq borularında ətli pepton ağarına subkulturasiya edilir.

Tipik koloniyalar seçilir və subkulturasiya edilir maye mühitşüşələrdə. 22 saatdan sonra bütün yetişdirilmiş kütlə 10 litr qida mühiti olan 20 litrlik şüşəyə köçürülür və toxum materialı əldə edərək 37-39 ° C-də 26 saat ərzində becərilir.

Kazein hidrolizatına əsaslanan qida mühiti bioloji reaktora yerləşdirilir, 1 atm temperaturda 60 dəqiqə sterilizasiya edilir, 39°C-yə qədər soyudulur və 1:9 nisbətində şüşədən toxumla səpilir.

Aerob becərmə zamanı mühitin pH-ı (6,8-7,2) vahid diapazonunda saxlanılır. pH, mühiti (10-15)% qlükoza ilə (0,1-0,2)% son konsentrasiyaya qədər qidalandırmaq. BK-ya görə bioloji konsentrasiya (15-20) 10 9 hüceyrə sm -3 və BKt-a görə (8-10) 10 9 hüceyrə sm -3 olduqda, pH 4.0-a düşənə qədər qlükoza əlavə etməyi dayandırın və hava tədarükünü bağlayın. . Sonra reaktorun qızdırılması söndürülür, mühit (15-19) ° C-yə qədər soyudulur. Nəticədə soyudulmuş mədəniyyət qablara pompalanır və ya flakonlarda qablaşdırılır.

Göstərilən becərmə üsulu ilə Bacillus subtilis VKM B-2287 bakteriya ştammının (80-95)% sporlar və canlı vegetativ hüceyrələri olan maye formada probiotik preparat alınır.

Təklif olunan probiotik preparat zərərsizdir və tərkibində xarici mikroflora yoxdur. Zərərsizliyi 1,0 ml həcmdə dərmanı şifahi olaraq qəbul edən (18-20) g ağırlığında ağ siçanlarda sınaqdan keçirilmişdir.

Dərman spesifik aktivliyə malikdir: dərmanın bir dozasında hüceyrələrin sayı (8-20)10 9 hüceyrə sm -3, antaqonist aktivlik - test mikroorqanizmlərinin böyüməsini maneə törətmə zonası 10 ilə 38 mm arasında dəyişir.

Beləliklə, təklif olunan Bacillus subtilis VKM B-2287 ştammı heyvanların, quşların və balıqların mədə-bağırsaq xəstəliklərinin qarşısının alınması və müalicəsi üçün tövsiyə olunan probiotik preparatı əldə etmək üçün istehsal ştammı kimi istifadə oluna bilər.

İxtira nümunələrlə təsvir edilmişdir.

Nümunə 1. Təklif olunan probiotik preparatın yeni doğulmuş buzovlar və donuz balaları üzərində sınaqdan keçirilməsi.

Təklif olunan Bacillus subtilis VKM B-2287 ştammı əsasında preparatın effektivliyi təsərrüfatda ağır epizootik vəziyyət fonunda baş vermiş ishal diaqnozu qoyulmuş yeni doğulmuş buzovlar və donuz balaları üzərində sınaqdan keçirilmişdir. Dana və donuz balalarının nəzarət qrupları təsərrüfatda qəbul edilmiş texnologiyaya uyğun saxlanılmışdır. Eksperimental qrupların buzovlarına və donuz balalarına əlavə olaraq təklif olunan Bacillus subtilis BKM B-2287 ştammı əsasında preparat yemdən 20 dəqiqə əvvəl az miqdarda su ilə şifahi olaraq danalar üçün 15 ml və 20 ml baş başına bir dozada verilmişdir. üç gün ərzində gündə üç dəfə piglets. Müşahidələr göstərmişdir ki, təcrübi qruplarda preparatın tətbiqindən bir gün sonra bütün heyvanların ümumi vəziyyəti yaxşılaşmış, ishal dayanmış, daha iki gündən sonra bütün heyvanlar praktiki olaraq sağlam olmuşdur. Nəzarət qruplarında heyvanların vəziyyəti ishal vəziyyətinin davam etməsi ilə xarakterizə olunurdu, ölüm buzovlarda 10%, donuzlarda isə 22% təşkil etmişdir.

Nümunə 2. “Subtilis+” probiotik preparatının akvarium balıqlarının qidasına əlavə edilməsi.

Yetkinlik yaşına çatmayan qızıl balıqlar (oranda) “Subtilis+” probiotik preparatının əlavə edilməsi ilə ekstrüde edilmiş yemlə qidalanırdılar. Yemin miqdarı 10 kq, əlavə olunan probiotik 1 ml idi. Təcrübə və nəzarət qruplarında balıqların sayı hər biri 250 nümunə olmuşdur. Qidalanma gündə 4-6 dəfə həyata keçirilir. Yemək asanlıqla yeyilirdi. Nəzarət qrupu ilə müqayisədə eksperimental qrupda yetkinlik yaşına çatmayanların böyümə sürəti 22% təşkil etmişdir. Təcrübə qrupunda balıq məhsuldarlığı 98%, nəzarət qrupunda 78% olmuşdur. Akvariumların suyu xarab olmayıb, bulanıqlıq olmayıb.

Misal 3. İlk həftələrdə toyuqların təhlükəsizliyi.

“Subtilis+” sınağı broyler toyuqlarda (təcrübə və nəzarət qruplarında 5 quşçuluqda) aparılmışdır. Probiotik qəbul etməyən nəzarət qrupunda toyuqların tullantıları 4%, eksperimental qrupda 0,2% təşkil edib. Təcrübə qruplarında toyuqlar daha intensiv kökəldilər. İlk üç gündən sonra nəzarət qrupunda toyuqun orta çəkisi 61 q, eksperimental qrupda 70 q olmuşdur.

Aparılan sınaqlar təklif olunan Bacillus subtilis BKM B-2287 ştammı əsasında alınmış “Subtilis+” preparatının effektivliyini göstərib.

İDDİA

Bakteriya ştammı Bacillus subtilis BKM B-2287, heyvanların, quşların və balıqların mədə-bağırsaq xəstəliklərinin qarşısının alınması və müalicəsi üçün nəzərdə tutulmuş probiotik preparatı əldə etmək üçün istifadə olunur.

Bacillus subtilis və ya saman çubuğu(lat. Bacillus subtilis) - qram-müsbət spor əmələ gətirən aerob bakteriyaların bir növü, Bacillus cinsinin nümayəndələri ( Bacillus). Bacillus subtilis- ən yaxşı öyrənilmiş mikroorqanizmlərdən biridir.

ad saman çubuğu əvvəllər olduğu üçün baş verir Bacillus subtilis yalnız ot həlimlərindən təcrid olunur. Bacillus subtilis rəngsiz düz çubuq görünüşünə malikdir, qalınlığı təxminən 0,7 mikron və uzunluğu 2-8 mikrondur. Bacillus subtilis Bölünmə və sporlarla çoxala bilir. Bəzən ayrı Bacillus subtilis, eninə bölmədən sonra, iplərdə bağlı qalın.

Bacillus subtilis(bacillus subtilis), istehsal etdiyi antibiotiklərə və ətraf mühiti turşulaşdırmaq qabiliyyətinə görə salmonella, proteus, stafilokokklar, streptokokklar, maya göbələkləri kimi patogen və fürsətçi mikroorqanizmlərin antaqonistidir; çürük toxuma parçalanma məhsullarını çıxaran fermentlər istehsal edir; amin turşularını, vitaminləri və immun-aktiv faktorları sintez edir. Bəzi suşlar Bacillus subtilis hialuron turşusu istehsalçılarıdır.

Bacillus subtilis insan qida zəhərlənməsinə səbəb ola bilər (ICD-10 kodu A05.4).

Bacillus subtilis dərmanların aktiv tərkib hissəsidir

Bacillus subtilis (Bacillus subtilis) bəzi dərmanların aktiv tərkib hissəsidir. Bu kontekstdə “Bacillus subtilis” termini növün bakteriyasının xüsusi ştam(lar)ına aiddir. Bacillus subtilis. Farmakoloji göstəriciyə görə, Bacillus subtilis "İshal əleyhinə" və "Digər immunomodulyatorlar" qruplarına aiddir. ATC-yə görə, Bacillus subtilis "A07FA Antidiarrheal mikroorqanizmlər" koduna malikdir. Bacillus subtilis istifadəsinə göstərişlər:

• uşaqlarda kəskin bağırsaq infeksiyaları
• müxtəlif təbiətli bağırsaq disbiozu
• bakterial vaginoz
• əməliyyatdan sonrakı dövrdə irinli-septik ağırlaşmaların qarşısının alınması.

Dərmanların aktiv maddəsi kimi canlı antaqonist aktiv ştammın liyofilləşdirilmiş mikrob kütləsi istifadə olunur. Bacillus subtilis 534 və ya gərginlik Bacillus subtilis 3H,
antibiotikə xromosom müqavimətinə görə seçilmiş - istehsal ştamından rimfapisin Bacillus subtilis 534. Rusiya müəssisələri 48 Rusiya Müdafiə Nazirliyinin Mərkəzi Tədqiqat İnstitutu, Yekaterinburq Federal Dövlət Müəssisəsi, "Biopharma" ASC və bir neçə Ukrayna müəssisəsi tərkibində qarışıq olan Biosporin dərmanı istehsal edir. Bacillus subtilis gərginlik 2335 (həmçinin deyilir Bacillus subtilis 3) və Bacillus licheniformis 2336 (həmçinin deyilir Bacillus licheniformis 31) 3:1 nisbətində.

Əsas aktiv maddənin olduğu dərmanlar Bacillus subtilis:(534 ştammı), Baktisporin (ştam N 3H).

Bacillus subtilis əsasında hazırlanan preparatlar Bacillus subtilis(Sporobacterin, Biosporin, Bactisporin) və oxşar mikroorqanizmlər Bacillus cereus(Baktisubtil) antimikrobiyal aktivliyə malikdir və antibiotik qəbul etmək mümkün olmadıqda bakterial infeksiyalar üçün və ya həddindən artıq olduqda nazik bağırsağın selektiv dekontaminasiyası üçün istifadə edilə bilər. bakteriya artımı. Bu bakteriyaların sporları kolonda aktiv formalara çevrilərək, həyatları boyunca turşu metabolitləri - üzvi turşular istehsal edir. Eyni zamanda, kolonda pH turşu tərəfə keçir və patogen və fürsətçi mikroorqanizmlərin inkişafı yatırılır (Belousova E.A., Zlatkina A.R.).

Ukraynada istifadəyə icazəsi olan (sonradan götürülən) Enzymtal preparatının tərkibində göbələk amilazası - göbələklərdən alınan amilolitik ferment var. Aspergillus oryzae və patogen olmayan bakterial mədəniyyətlər Bacillus subtilis(Kirik D.L., Polyakova İ.F.).

Bacillus subtilis - probiotik

Yuxarıda sadalanan probiotik dərmanlara əlavə olaraq, suşlar Bacillus subtilis qida əlavələrinə daxildir. Rusiyada pəhriz əlavələri ehtiva edir Bacillus subtilis: Baktistatin, Supradin Kinder gel (Almaniya istehsalı), Vetom və s.

Baktistatin pəhriz əlavəsi hüceyrəsiz mədəniyyət mayesinin metabolitlərini ehtiva edir Bacillus subtilisştam 3 (E vitamini daxil olmaqla), seolit ​​daşıyıcısı, fermentləşdirilmiş soya unu hidrolizat, qaşınma əleyhinə agent kalsium stearat (və ya aerosil), kapsulun tərkib hissələri (tibbi jelatin, titan dioksid, indiqotin). Baktistatin müxtəlif müəlliflər tərəfindən, xüsusən də yüngül bakterial böyümə sindromunun korreksiyası üçün tövsiyə olunur (Loginov V.A.), kimi əlavə vasitələr: bağırsaq çatışmazlığı sindromu üçün (Levchenko S.A.), H. pylori-əlaqəli qastrit (Grischenko E.B.) və başqaları.

Ştammlar Bacillus subtilis bir sıra dərman və baytarlıq və kənd təsərrüfatı məhsullarında istifadə olunur. Xüsusilə, canlı bakteriya sporlarının mikrob kütləsini ehtiva edən probiotik "Subtilis" (maye forması "Subtilis-Z" və toz "Subtilis-S") Bacillus subtilis Və Bacillus licheniformis heyvandarlıqda, quşçuluqda, balıqçılıqda bakterial etiologiyalı mədə-bağırsaq xəstəliklərinin, disbakteriozun, ağciyər infeksiyalarının qarşısının alınması və müalicəsi, məhsuldarlığın artırılması, sağlam nəsillərin yetişdirilməsi, patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin böyüməsinin qarşısını almaq üçün istifadə olunur (

480 rub. | 150 UAH | $7.5 ", MOUSEOFF, FGCOLOR, "#FFFFCC",BGCOLOR, "#393939");" onMouseOut="return nd();"> Dissertasiya - 480 RUR, çatdırılma 10 dəqiqə, gecə-gündüz, həftənin yeddi günü və bayram günləri

Qataullin Ayrat Qafuanoviç. Yeni probiyotiklərin yaradılması üçün perspektivli Bacillus subtilis suşlarının bioloji xüsusiyyətləri: Dis. ...cand. biol. Elmlər: 03.00.07 Moskva, 2005 131 s. RSL OD, 61:05-3/1040

Giriş

Fəsil 1. Mikrob antaqonizmi - disbiotik şəraitin düzəldilməsi üçün bioterapevtik preparatların yaradılması üçün əsas 9

Fəsil 2. Spor probiotiklər və onların makroorqanizmə təsiri 18

2.1. Bacillus 18 cinsinin bakteriyalarından preparatlar

2.2. Müasir təmsillər Bacillus 26 cinsinin bakteriyalarından olan probiyotiklərin terapevtik və profilaktik təsir mexanizmləri haqqında

2.3. Aerob spor əmələ gətirən bakteriyaların yaratdığı bioloji aktiv maddələr 32

2.4. Bacillus cinsinin bakteriyalarının patogenlik faktorları 34

Fəsil 3. Tədqiqatın obyektləri və metodları 41

3.1. Tədqiqat obyektləri 41

3.2. Tədqiqat üsulları 43

3.2.1. Avadanlıq və texnika 45

4-cü fəsil. İzolyasiya edilmiş ştammların xüsusiyyətləri 53

4.1. Ştammların morfoloji və fizioloji-biokimyəvi xassələrinin öyrənilməsi 53

4.2. B.subtilis suşlarının in vitro təcrübələrində antaqonist və yapışdırıcı fəaliyyəti 55

4.3. B.subtilis ştammlarının antibiotik müqavimətinin və plazmid profilinin təyini 57

Fəsil 5. B.subtilis 1719 ştamının makroorqanizmə təsiri 62

5.1. B.subtilis ştamının toksikliyinin, toksigenliyinin, virulentliyinin və probiotik aktivliyinin öyrənilməsi 1719 in vivo təcrübələr 62

5.2. Eksperimental dysbiosis ilə in vivo təcrübələrdə B.subtilis 1719 ştammının toxunulmazlıq parametrlərinə təsirinin öyrənilməsi 70

Fəsil 6. Probiotik preparatın əsası kimi B.subtilis 1719 ştamının texnoloji xüsusiyyətləri 76

6.1. Müxtəlif maye qida mühitlərində böyümə xüsusiyyətlərinin qiymətləndirilməsi 76

6.2. B.subtilis ştammının 1719-un saxlanma zamanı canlılığının və antaqonist fəaliyyətinin öyrənilməsi 84

Fəsil 7. B.subtilis ştammı\l\9 və bəzi kommersiya probiotik preparatlarının əsasını təşkil edən ştamların xassələrinin müqayisəli xarakteristikası. 94

Nəticə 98

Nəticələr 107

İstinadlar 108

İşə giriş

Problemin aktuallığı

V Müasir mərhələdə tibbi mikrobiologiyada yeni

həyati prosesləri zamanı patogen mikroorqanizmlərin böyüməsini maneə törədən bioloji aktiv maddələr (BAS) istehsal etməyə qadir olan saprofit mikrofloranın istifadəsini əsaslandıran məlumatlar; bədxassəli şişlər və insan orqanizmində müxtəlif patoloji və biokimyəvi proseslərin normallaşdırılması.

Son onillikdə mədə-bağırsaq traktının xəstəliklərinin profilaktikası və müalicəsi üçün spor əmələ gətirən bakteriyaların canlı mikrob kulturalarına əsaslanan bioloji məhsullardan geniş istifadə olunur.

Bakteriya cinsi basil, Mikroorqanizmlərin ən müxtəlif və geniş yayılmış qruplarından biri, insan və heyvanların ekzogen florasının mühüm komponentləridir.

* Cins Bacillus qədim zamanlardan tədqiqatçıların diqqətini cəlb etmişdir. Nako-

- mikrobiologiya, fiziologiya, biokimya, genetika sahəsində əldə edilmiş biliklər

bakteriya faydalarını göstərir Bacillus bioloji aktiv maddələrin istehsalçıları kimi: fermentlər, antibiotiklər, insektisidlər. Müxtəlif yaşayış şəraitinə yüksək uyğunlaşma qabiliyyəti (oksigenin olması və ya olmaması, geniş temperatur diapazonunda böyümə və inkişaf, müxtəlif üzvi və ya qeyri-üzvi birləşmələrin qida mənbəyi kimi istifadəsi və s.) çöplərin torpaqda, suda, hava, qida məhsulları və digər xarici obyektlər

]t ətraf mühitdə, eləcə də insanların və heyvanların orqanizmində.

I Metabolik proseslərin müxtəlifliyi, genetik və biokimyəvi

dəyişkənlik, litikaya qarşı müqavimət və həzm fermentləri, təbabətin müxtəlif sahələrində basillərin istifadəsi üçün əsas rolunu oynadı.

"4 cins. Qida və Dərman İdarəsi

ABŞ vəsaitləri mənimsənilib Bacillus subtilis GRAS statusu (ümumiyyətlə təhlükəsiz hesab olunur) - olduqca təhlükəsiz orqanizmlər, bu ilkin şərtdir

Bu bakteriyaların dərman istehsalında istifadəsi üçün 5.

Basillərin fəaliyyəti patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin geniş spektrinə qarşı özünü göstərir. Müxtəlif fermentlərin və digər maddələrin sintezi sayəsində həzmi tənzimləyir və stimullaşdırır, antiallergen və antitoksik təsir göstərir. Bacilli istifadə edərkən makroorqanizmin qeyri-spesifik müqaviməti əhəmiyyətli dərəcədə artır. Bu mikroorqanizmlərin istehsalı asan, rəfdə dayanıqlı və ən əsası ekoloji cəhətdən təmizdir.

Yaşayan qeyri-patogen mikroblara əsaslanan, təbii qəbul üsulu ilə mikrobioloji vəziyyətini optimallaşdırmaqla ev sahibi orqanizmin fizioloji və biokimyəvi funksiyalarına faydalı təsir göstərməyə qadir olan terapevtik və profilaktik preparatlar hazırda probiotik dərmanlar kimi təsnif edilir.

Basillərdən ən çox maraq doğuran suşlardır B. subtilis. Genetik və fizioloji xassələri bilmək baxımından onlar sonra ikinci yeri tuturlar E. coli. Böyük imkanlar haqqında B. subtilis biotexnologiyada bu ştamın molekulyar genetikası haqqında məlumat bankının yaradılması sübut olunur - bakterial genom haqqında bütün məlumatların daxil olduğu SubtiList.

Ölkəmizdə və xaricdə aparılan elmi tədqiqatların nəticələrinin təhlili bu cinsin bakteriyalarının istifadəsinin miqyasını göstərir. Bacillus bakterial biokütlədən və ya onların metabolitlərindən məhsul əldə etmək. Məlum üsullar cinsinin bakteriyalarının becərilməsi Bacillus bir sıra bakterial və ferment preparatlarının istehsalı texnologiyası üçün əsasdır. .

Bacillus cinsinin canlı bakteriyaları əsasında makroorqanizm üçün zərərsiz, geniş terapevtik və profilaktik təsir göstərən və ekoloji cəhətdən təhlükəsiz olan probiotik preparatlar yaradılmışdır. Heyvandarlıqdan istifadəyə dair nəticələr mühüm elmi və praktiki əhəmiyyətə malikdir.

cinsin yeni mikrob kulturları Bacillus insanlarda və kənd təsərrüfatı heyvanlarında mədə-bağırsaq xəstəliklərinin müalicəsi üçün.

Hal-hazırda praktiki səhiyyədə məşhur probiotik preparatlardan geniş istifadə olunur: baktisubtil, sporobakterin, biosporin, baktisporin, subalin, sereobiogen, enterogermin və s.

Terapevtik istifadə üçün göstərişlər və bu dərmanların terapevtik effektivliyi onların istehsalı üçün istifadə olunan suşların xüsusiyyətləri ilə məhdudlaşır. İnsan və ya heyvan orqanizminin müxtəlif biotoplarında mikroekoloji pozğunluqlara səbəb olan patogen və fürsətçi mikroorqanizmlərə qarşı antaqonist fəaliyyət spektri həlledici əhəmiyyət kəsb edir. Bundan əlavə, çöplərin bioloji aktiv maddələr (polipeptid antibiotiklər, fermentlər və s.) əmələ gətirmə qabiliyyətini və onların antibiotiklərə qarşı müqavimətini nəzərə almamaq olmaz.

Bir tərəfdən disbiotik pozğunluqların inkişafında iştirak edən mikroorqanizmlərin müxtəlifliyi və yaranan antibiotik müqaviməti, həmçinin müxtəlif suşlarda biosintetik imkanların dəyişkənliyi. B. subtilis, digər tərəfdən, hədəf probiotik aktivliyi olan və/yaxud müxtəlif bioloji aktiv maddələrin istehsalçısı olan ştamların daimi monitorinqinin məqsədəuyğunluğunu müəyyən edir.

İşin məqsədi:

İzolyasiya edilmiş ştammların bioloji xüsusiyyətlərini öyrənin B. subtilis və onların orijinal spor probiotikinin inkişafı üçün istifadə imkanlarını qiymətləndirmək.

Tədqiqat məqsədləri:

1. Təcrid olunmuş kulturaların morfoloji, fizioloji-biokimyəvi, antaqonist, yapışdırıcı və digər xassələrini öyrənmək. B. subtilis in vitro təcrübələr və gələcək tədqiqatlar üçün ən perspektivli ştammı seçin.

Seçilmiş ştammın probiotik fəaliyyətini qiymətləndirin B. subtilis in vivo təcrübələr.

Tədqiq olunan ştammın biokütləsinin toplanması üçün optimal olan qida mühitini seçin B. subtilis.

Seçilmiş ştammın canlılığını və antaqonist fəaliyyətini müəyyənləşdirin B. subtilis saxlama zamanı.

Orijinal ştamın xüsusiyyətlərini müqayisə edin B. subtilis və kommersiya probiotik preparatlarının istehsalı üçün istifadə edilən mədəniyyətlər.

Elmi yenilik.

Təcrid olunmuş ştamların morfoloji, fizioloji-biokimyəvi, genetik və digər bioloji xüsusiyyətlərinin öyrənilməsi əsasında plazmidsiz ştam seçilmişdir. B. subtilis 1719, müxtəlif taksonomik qrupların fürsətçi və patogen mikroorqanizmlərinə qarşı antaqonizm nümayiş etdirən, aşağı yapışdırıcı aktivliyə malik, gentamisin, polimiksin və eritromisinə davamlıdır.

İstehsal texnologiyasının yaradılmasına yanaşmalar, o cümlədən ştamın böyümə xüsusiyyətlərinin öyrənilməsi eksperimental olaraq əsaslandırılmışdır. B. subtilis 1719 orijinal qida mühiti, onun canlılığını və antaqonist fəaliyyətini sabitləşdirmək üçün şərtlər, yeni probiotik preparatın əldə edilməsi mərhələləri.

İxtira üçün ərizə verilmişdir (19 aprel 2005-ci il tarixli № 2005111301): “Bakteriya ştammı Bacillus subtilis 1719 patogenlərə, həmçinin proteolitik, amilolitik və lipolitik fermentlərə qarşı antaqonist aktiv biokütlə istehsalçısıdır.

Praktik əhəmiyyəti.

İzolyasiya edilmiş və müəyyən edilmiş gərginlik B. subtilis adına GISC-nin Dövlət Mədəniyyətlər Kolleksiyasında saxlanılan 1719. L.A. Taraseviç 277 saylı altında və

Müdafiəyə təqdim edilən əsas müddəalar:

Müəyyən edilmiş üç bakterial kultura ştammı morfoloji, fizioloji, biokimyəvi və digər xüsusiyyətlərə görə növlərə uyğundur. B. subtilis. Onların tərkibində plazmidlər yoxdur və fürsətçilərə qarşı antaqonist aktivdirlər patogen bakteriyalar müxtəlif taksonomik qruplar, aşağı və ya orta səviyyədə yapışma qabiliyyətinə malikdir.

Gərginləşdirmək B. subtilis 1719, kəmiyyət və keyfiyyət tərkibinin bərpası ilə fürsətçi və patogen mikroorqanizmlərin aradan qaldırılmasında özünü göstərən probiotik xüsusiyyətlərə malikdir. normal mikroflora eksperimental dysbiosis ilə, həmçinin makroorqanizmə immunomodulyator təsir göstərir.

Texnoloji xüsusiyyətlərə görə, gərginlik B. subtilis 1719 orijinal probiotik dərmanın yaradılması üçün namizəd kimi tövsiyə edilə bilər.

9 ƏDƏBİYYAT İNCƏLİ Fəsil 1. Mikrob antaqonizmi disbiotik şəraitin korreksiyası üçün bioterapevtik preparatların yaradılması üçün əsasdır.

Makroorqanizm və onun mikroflorası vahid ekoloji sistemdir, doğulduğu andan formalaşmağa başlayır və dinamik tarazlıq vəziyyətindədir, patoloji təsirlərə qarşı təbii qoruyucu mexanizmdir. Açıq biosenozu təmsil edən mədə-bağırsaq traktının mikroflorasına insan və ya heyvan orqanizmində bu və ya digər biotopu tutan çoxlu yerli mikrobiosenozlar daxildir. Həzm sisteminin biotopları şaquli (proksimodistal) və üfüqi istiqamətlərdə yerləşir. Lümenə əlavə olaraq, üfüqi istiqamətdə bağırsaq mikroflorası selikli qişanın iki bölməsində lokallaşdırıla bilər: selikli qişanın qlikoproteinləri təbəqəsində, epitel hüceyrələrinin membranlarının üstündəki glikoproteinlərdən və qlikolipidlərdən ibarət glikokaliks.

Sağlam insanların və heyvanların normal mikroflorası adətən yerli və ya rezident, müəyyən bir növə xas olan və keçici olaraq bölünür. Həzm sistemində 500-ə yaxın mikroorqanizm növü aşkar edilmişdir. 97%-dən çox ümumi sayı bağırsaq bakteriyalarına spor olmayan anaeroblar daxildir - Bifidobakteriyalar, Bacteroides, Lactobacillus, Eubacterium, tərkibi 1 qram nəcisdə 10% CFU-a çatır.Fakultativ anaerob mikroorqanizmlərin sayı (Escherichia coli, Enterococcus spp., Staphylococcus spp. s.) yüzlərlə dəfə aşağıdır.

Normal mikrofloranın bakteriyalarının qoruyucu funksiyasının mühüm aspektlərindən biri patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərə qarşı antaqonist fəaliyyətdir. Mədə-bağırsaq traktının mikroekoloji sisteminin nümayəndələrinin biokimyəvi fəaliyyəti sayəsində açıq şəkildə antaqonist aktivliyə malik maddələrin istehsalını təmin edir, xaricdən daxil olan patogen mikroorqanizmlər tez bir zamanda aradan qaldırılır.

10 bağırsaqdan. Bu, yoluxucu bir prosesin inkişafına mane olur.

* Bakterial antaqonizm hüceyrə səbəbiylə həyata keçirilə bilər

əlaqə, bunun nəticəsində antibakterial agentlər inhibitor ştammlardan hədəf ştama köçürülür. Bəzi hallarda kolonizasiya müqaviməti normal mikrofloranın müəyyən nümayəndələrinin və (və ya) onların metabolitlərinin antaqonist təsirinin, habelə spesifik antikorların meydana gəlməsinin birləşməsi yolu ilə həyata keçirilir.

Fuller R. və Lenzner A.A. həmmüəlliflə laktobakteriyaların süd turşusu istehsalı və yoğun bağırsağın epitelinə spesifik yapışması hesabına mikrob balansının saxlanmasında rolunu sübut etmişdir. Xüsusilə patogen bakteriyalara qarşı onların antaqonist fəaliyyəti nümayiş etdirilmişdir Salmonella typhimurium.

Sirkə və laktik turşular istehsal edən bifidobakteriyalar çürük və patogen mikrofloranın çoxalmasının qarşısını alır, periferik prosesləri normallaşdırır.

^ polad, həmçinin kalsium, dəmir, D vitamini və udulmasını təşviq edir

vitamin əmələ gəlməsi proseslərində iştirak edir.

Vollard E.J. və b. qeyd etdi ki, E. coli selikli qişa ilə əlaqəli yerli immun sisteminin inkişafına və vəziyyətinə təsir göstərir və ev sahibini enteropatogen mikroorqanizmlərin yaratdığı infeksiyalardan qoruyur. Zülalların və karbohidratların parçalanmasında, xolesterolun, öd turşularının metabolik çevrilməsində iştirak edir, yağ turşuları.

U E.coli həm də karsinolitik xüsusiyyətlərə malikdir. Karapetyan A.O.

J bağırsaqlardan təcrid olunur sağlam fərdlər E. coli və nəcisin suşları

go enterococcus, in vitro xərçəng hüceyrələrinin nekrozuna səbəb olmaq qabiliyyətinə malikdir. Eyni zamanda, xərçəng xəstələrindən təcrid olunmuş bakteriyalar

t belə xassələrə malik deyildi. Bu mikrob 8 vi-

taminlər: B] 5 B 2, B 6, B12, K, nikotinik və pantotenik turşular, biotin. Bundan başqa, E.coli ciddi anaerob üçün zəruri anaerob mühit yaradır

bov, qan dövranı sistemindən bağırsaq divarı vasitəsilə lümenə yayılan O2 udma. Yenidoğulmuşların bağırsaqlarının təbii mikrob kolonizasiyasının müşahidələri və qnotobioloji heyvanların bağırsaqlarına mikrobların implantasiyası üzrə aparılan təcrübələr müəyyən etmişdir ki, anaerob bakteriyalar adətən yalnız bakteriyalardan sonra kolonizasiyaya başlayırlar. E.coli.

Bağırsaqda bakteriya artımının mühüm tənzimləyiciləri müxtəlif bioloji aktiv maddələr, ekzofermentlər və bakteriosinlərdir, məsələn, kolisinlər, mikrosinlər, lizozim və s. Müəlliflərin əksəriyyəti bakteriosinlərin “klassik” antibiotiklərdən daha dar spektrdə fərqləndiyinə inanırlar. antibakterial fəaliyyət, çünki onlar eyni və ya filogenetik cəhətdən əlaqəli növlərin bakteriyalarının böyüməsini xüsusi olaraq maneə törədirlər. Məsələn, patogen enterobakteriyalar normal mikrofloranı boğur və bağırsaqlarda maneəsiz yayılır. Ola bilsin ki, Escherichia coli nümayəndələrində olan kolisinlər mikroorqanizmlərin böyüməsini boğaraq, makroorqanizmin təbii müqavimət amilləri rolunu oynayır.

Qeyd etmək lazımdır ki, müstəmləkəçilik müqaviməti həm üstünlük təşkil edən anaerob mikrofloranın nümayəndələri, həm də keçən əsrin 70-ci illərində əhəmiyyəti süni şəkildə qiymətləndirilməyə başlayan fakultativ aerob bakteriyalar tərəfindən təmin edilir. Qoruyucu xüsusiyyətlər E.coli yalnız metabolik səviyyədə antaqonizm (bifidobakteriyalar, laktobakteriyalar) səbəb deyil, həm də makroorqanizm vasitəsilə dolayı ola bilər. Ancaq intim münasibət E.coli onunla bağırsaq mukozasının epitelinin "yetişməsini" və sözdə təbii toxunulmazlığın formalaşmasını təmin edərək, mikrobun daha "aqressiv" davranışına səbəb olur.

Normal mikroflora makroorqanizmin postnatal inkişafında immunitetin və spesifik qoruyucu reaksiyaların formalaşma mexanizmində mühüm tetikleyici rol oynayır.

Mikrofloranın immun cavabın inkişafındakı rolu onun universal immunomodulyator xüsusiyyətlərinə bağlıdır, o cümlədən immuno-

stimullaşdırılması və immunosupressiya, eləcə də mühüm köməkçi və immunogen xüsusiyyətləri. Məlumdur ki, bakterial lipopolisaxaridlər (LPS) Ig A - immun cavabına immuntənzimləyici təsir göstərir və köməkçi maddələr rolunu oynayır. Mikroflora uyğunlaşma və qoruyucu mexanizmlər formalaşdıran qeyri-spesifik və spesifik immunoloji reaksiyalar kompleksinin inkişafını təmin edir.

Beləliklə, həzm traktının mikroflorasını təkamül zamanı formalaşmış, ev sahibi orqanizmin çoxsaylı funksiyalarını yerinə yetirən və tənzimləyən, kolonizasiya müqavimətini saxlayan və bununla da öz homeostazını saxlayan vahid mikroekoloji sistem kimi qəbul etmək lazımdır.

Fransız tədqiqatçıları normal mikrofloranın keçici hissəsinin həm digər bakteriyalara, həm də makroorqanizmlərə münasibətdə laqeydliyi barədə hökm sürən rəyi təkzib ediblər. Keçici Escherichia və bifidobakteriyaların bəzi suşları toksin istehsalını əhəmiyyətli dərəcədə azaldır C.difficile gnotobiont heyvanların bağırsaq traktında. Bacillus cereus- torpaqdan təcrid olunmuş aerob spor əmələ gətirən mikroorqanizmdən uşaqlarda ishal xəstəliklərinin müalicəsi üçün “Cereobiogen” (Çin) preparatında keçici mikrofloranın nümayəndəsi kimi istifadə edilmişdir. Bağırsaqlarda qalma müddəti 4 gündür, lakin bu müddət ərzində bifid floranın yayılmasına və xəstəliyin klinik əlamətlərinin demək olar ki, tamamilə yox olmasına kömək edir. Hindistan alimləri müəyyən ediblər ki, təkcə rezident mikrofloranın nümayəndələri deyil, keçici statusu olan mikroblar da vitamin istehsal etməyə və zəhərli məhsulların zərərsizləşdirilməsinə qadirdir. Cinsin növlərini müəyyən etdilər Bacillus lobyada mövcud olan neyrotoksinləri, hemaqlütininləri məhv etməyə qadir olan siçovulların kiçik bağırsaqlarından. nəslin nümayəndələri Bacillus vəKlebsiella B6, B2, B^ vitaminlərini, nikotinik və fol turşularını sintez edir.

Yoluxucu və qeyri-infeksion xarakterli müxtəlif xəstəliklər, eləcə də bir çox digər əlverişsiz amillər (iqlim dəyişiklikləri)

13 loviy, radiasiyaya məruz qalma, qidalanmada səhvlər, ümumi fizioloji vəziyyətin pisləşməsi, somatik pozğunluqlar, dərman preparatlarının istifadəsi, orqanizmdə yaşa bağlı dəyişikliklər və s.), birbaşa və ya dolayısı ilə fəaliyyət göstərən kompleks mikroekoloji sistemə mənfi təsir göstərir. makroorqanizm fürsətçi mikrofloranın aktivləşməsinin lehinə.

Disbakterioz- bu, müəyyən bir biotop üçün xarakterik olan, ekzogen və endogen təbiətli müxtəlif amillərin təsiri nəticəsində bir insanın və ya heyvanın normal mikroflorasının tərkibində hər hansı kəmiyyət və ya keyfiyyət dəyişikliyidir ki, bu da müəyyən klinik təzahürlərə səbəb olur. makroorqanizm və ya onda inkişaf edən patoloji proseslərin nəticəsidir. Mikrofloranın pozulmasına səbəb olan amillər, yəni. dysbiosis üçün, çox sayda var. Görünür, buna görə də ölkəmizin əhalisinin demək olar ki, 90%-i bu və ya digər dərəcədə disbiozdan əziyyət çəkir. Onlar adətən immunitet sisteminin pozğunluqları ilə əlaqələndirilir. Aydındır ki, normal florada dəyişikliklər, immun statusunun vəziyyəti və xəstəliyin təzahürü vəhdətdə nəzərə alınmalıdır və hər bir konkret halda tetikleyicinin rolu triadanın bu komponentlərindən hər hansı birinə aid ola bilər. Bəzi hallarda dysbiosis birbaşa patoloji prosesin inkişafına təkan verir, digər hallarda immunitet çatışmazlığının inkişafı ilə baş verir, digərlərində bu bir-biri ilə əlaqəli proseslərə səbəb olur.

Bununla belə, son zamanlarda bağırsaq disbiozu getdikcə ortaya çıxan immunoloji pozğunluqların nəticəsi hesab olunur.

Klinik təzahürlər disbioz müxtəlifdir: dispeptik pozğunluqlar (qəbizlik, ishal), maddələr mübadiləsinin pozulması, kataral iltihabi xəstəliklər (qastrit, duodenit), irinli-iltihabi xəstəliklər və ağırlaşmalar fərqli lokalizasiya, mədə və onikibarmaq bağırsağın peptik xorası, hepatit, bədxassəli yenitörəmələr, allergiya və s. .

Disbiozun qarşısının alınması və müalicəsi üçün yalnız antimikrobiyal dərmanlardan istifadə etmək cəhdləri səmərəsiz çıxdı və bəzi hallarda başlayan prosesi daha da ağırlaşdırdı. Bu, eubiozun bərpası üçün probiyotiklər, pəhriz əlavələri və bitki mənşəli vasitələr daxil olmaqla, düzəldici terapiyanın istifadəsinin məqsədəuyğunluğunu müəyyən edir.

Müxtəlif mikrob kulturalarının digər mikroorqanizmlərin, xüsusən də patogen olanların böyüməsini maneə törətmək qabiliyyəti aşkar edildikdən bəri ən görkəmli təbiətşünaslar problem üzərində işləyirlər. praktik istifadə mikrob antaqonizmi hadisələri (L.Paster, İ.İ.Meçnikov, N.F.Qamaleya və s.). İ.İ.Meçnikovun ifadə etdiyi bağırsaq mikroflorasının tərkibinin pozulması halında onun tənzimlənməsinin məqsədəuyğunluğu haqqında fikir tibbdə yeni bir istiqamətin - bakterial terapiyanın, yaradılmasının inkişafına səbəb oldu. bioloji dərmanlar- canlı bakteriyalardan probiyotiklər, normal insan mikroflorasının nümayəndələri.

"Probiyotiklər" termini 1974-cü ildə Parker tərəfindən bağırsaq mikroflorasının tarazlığını təmin edən orqanizmlərə və maddələrə istinad etmək üçün təklif edilmişdir. Mikroorqanizm ştammlarının probiotik preparatları kimi seçilməsi üçün bir neçə meyar təklif edilmişdir: apatogenlik, spesifik Qram boyanması, turşulara və oksidləşdiricilərə qarşı müqavimət, həzm sisteminin hüceyrələrinə kolonizasiya və (və ya) yapışma, antikoliform faktorların sərbəst buraxılması, öd müqaviməti. , canlılıq və sabitlik.

Probiotiklər mədə-bağırsaq traktının kəskin və xroniki xəstəlikləri və disfunksiyalarında, maddələr mübadiləsi pozğunluqlarında, antibakterial, hormonal və şüa terapiyasından sonra, əməliyyatdan əvvəlki və əməliyyatdan sonrakı dövrlərdə, əlverişsiz şəraitdə və s. . Onların bioterapevtik təsiri patogen və fürsətçi mikroblara birbaşa antaqonist təsir göstərərək, onların sayının azalmasına, maddələr mübadiləsinə təsir göstərərək və ya immunitet sisteminin stimullaşdırılmasına səbəb ola bilər.

Hazırlıqlar - probiyotiklər, insan bağırsağının normal mikroflorasının nümayəndələri olan canlı antaqonist aktiv bakteriyalardan hazırlanır: E. coli (kolibakterin), bifidobakteriyalar (bifidumbakterin, bifidumbakterin forte, bifilis), E. coli və bifidobakteriyaların (bificol) qarışığı. ), laktobakteriyalar (laktobakterin, asilakt, acipol). IN son illər dysbiosis müalicəsi üçün, tibbi praktikaya daxil edilmişdir yerli dərmanlar, cinsin canlı apatojenik antaqonist aktiv nümayəndələri əsasında hazırlanmışdır Bacillus: sporobakterin, bactis-porin, biosporin.

Probiyotiklərin əsasını təşkil edən mikroorqanizmlər qəbul edildikdə, onların əksəriyyəti mədə-bağırsaq traktının normal florasının nümayəndələridir, onu məskunlaşdırır, biosenozun normallaşmasına kömək edir və nəticədə həzm, metabolik və qoruyucu funksiyalar. Bənzər bir təsir mexanizmi digər tətbiq üsulları ilə (məsələn, vaginal) baş verir.

Probiyotikləri qəbul edərkən, bir qayda olaraq, onlar inkişaf etmir mənfi reaksiyalar, və onların istifadəsi üçün heç bir əks göstəriş yoxdur.

Əksər probiotiklər (bifidumbakterin, laktobakterin, acipol, asilakt, bifiliz) həyatın ilk günlərindən, o cümlədən vaxtından əvvəl doğulmuş körpələr üçün istifadə edilə bilər.

Hal-hazırda, mikroorqanizmlərin istehsal mədəniyyətlərini seçərkən və xarakterizə edərkən aşağıdakı göstəricilər nəzərə alınır: antaqonist fəaliyyətin spektri və səviyyəsi, istehsal qabiliyyəti, yəni. biokütləni tez toplamaq qabiliyyəti, dondurulmuş qurumaya qarşı müqavimət, saxlama zamanı canlılıq. Onların antibiotiklərə qarşı müqavimət spektri də vacibdir.

Xüsusi diqqət insan sağlamlığı üçün istifadə edilən ştammların təhlükəsizlik meyarlarına verilir.

Fizioloji və biokimyəvi xassələrin və amillərin məcmusuna əsaslanır bioloji fəaliyyət probiyotiklərin yaradılması üçün ən perspektivli

Qeyri-yerli mikroflorasının əsasən əlaqəli basillər olduğu ortaya çıxdı B.subtilis, B.pumilus, B.polymyxa. Müxtəlif biotoplardan, o cümlədən isti qanlı heyvanların, həşəratların və bitkilərin bədən və toxumalarından sabit şəkildə təcrid olunmuş bu növlər sonuncuda patoloji dəyişikliklərə səbəb olmayıb.

İnsan və ya heyvan orqanizmindən təcrid olunmuş spor bakteriyalarının bioloji xassələri, onların makroorqanizmə təsir mexanizmlərini başa düşmək baxımından xüsusi maraq doğurur. Bundan əlavə, bu problem effektiv terapevtik və profilaktik dərmanların yaradılması üçün yeni ehtiyatların müəyyən edilməsi üçün vacibdir, çünki təcrid olunmuş basillərin demək olar ki, yarısı müxtəlif patogen və şərti patogen bakteriya və göbələklərə qarşı antaqonist xüsusiyyətlər nümayiş etdirir, ən böyük aktivliyi göstərən ştammlar. Bacillus subtilis.

Onların aşağı molekulyar çəkili polipeptid antibiotikləri sintez etmək qabiliyyəti müəyyən edilmişdir.

Mycobacterium tuberculosis-in antaqonisti kimi bir ştam təklif edilmişdir B. subtilisMZh-6, bu, 96,2% hallarda in vitro artımını boğdu. .

cinsdən olan bakteriyalar aşkar edilmişdir Bacillus müxtəlif növ bakteriyalara antaqonist təsir göstərməyə qadirdir Klebsiella(336 məhsul). Müxtəlif Ştammlar B. subtilis məhsulların 57-83%-nin artımını boğdu K.ozaenae, 50-100% məhsul K. rhinoscleromatis, 64-95% - K. pneumoniae. Cins bakteriyasının demək olar ki, bütün sınaqdan keçirilmiş suşları Klebsiella müəyyən mədəniyyətlərə qarşı həssas olduğu ortaya çıxdı V. subtilis, eyni zamanda əhəmiyyətli sayda Klebsiella eyni vaxtda Bacillus subtilis-in bir neçə mədəniyyətinin fəaliyyətinə həssas idi.

150 təzə təcrid olunmuş suşların antaqonist fəaliyyətini öyrənərkən B. subtilis nisbətən K. rhinos cleromatis in vivo və in vitro təcrübələrində 5 test ştamına münasibətdə 114 mədəniyyətdə antaqonizm aşkar edilmişdir. K.rhinoscleromatis. Tədqiq edilmiş basil ştammlarından ən aktivi kənd təsərrüfatı heyvanlarının mədə-bağırsaq traktından təcrid olunmuşlar olub.

17 Cinsin bakteriyalarının müəyyən edilmiş unikal bioloji xüsusiyyətlərinə əsaslanır basil, Son onilliklərdə tədqiqatçıların diqqəti canlı spor əmələ gətirən aerob bakteriyalar əsasında dərman preparatlarının yaradılması və onların makroorqanizmə təsirinin öyrənilməsi problemlərinə yönəlmişdir.

Bacillus cinsinin bakteriyalarından olan probiyotiklərin terapevtik və profilaktik təsir mexanizmləri haqqında müasir fikirlər.

İndiki mərhələdə spor probiyotiklərinin terapevtik təsirinin patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin, yüksək aktiv fermentlərin (proteazlar, ribonukleazlar, bakteriosinlər) böyüməsini maneə törədən bakteriosinlər istehsal etmək qabiliyyəti də daxil olmaqla bir sıra amillərlə müəyyən edildiyini müəyyən etmək olar. transaminazlar və başqaları), həmçinin bakterial toksinləri neytrallaşdıran maddələr. Makroorqanizm üçün zərərsizliyin sübutu bir neçə gündən sonra edilən eksperimental məlumatlarla təmin edilir parenteral administrasiya, B.subtilis orqanizmdən xaric edilir.

Probiotik preparatların insan və heyvan orqanizminə müalicəvi və profilaktik təsir mexanizminin tədqiqi göstərmişdir ki, çöplər həyat qabiliyyətini saxlayaraq mədə-bağırsaq traktından qana, oradan isə zədələnmiş yerə nüfuz edə bilirlər. Ağızdan tətbiq edildikdən sonra, artıq ilk dəqiqələrdə bakteriyaların ümumi sayının təxminən 0,1% -i orofarenksin, yemək borusu və mədənin selikli qişaları vasitəsilə parenximal orqanlara daxil olur. Mikroorqanizmlərin asimptomatik yerdəyişməsi preparatın birdəfəlik qəbulundan 6-8 saat sonra müşahidə olunub ki, bu da preparatın makroorqanizmə məruz qalma vaxtını müəyyən edib. İki ölçülü elektroforezə görə, sporun cücərməsindən sonra 0-10 dəqiqə ərzində B. subtilis 168 ştammı 65 ekzoprotein, 10-20 dəqiqədə - 210 zülal sintez etdi və vegetativ hüceyrə böyüməsi zamanı ümumilikdə 260 zülal istehsal etdi.

Mikroorqanizmlərin sağlam insanların orqan və toxumalarına köçürülməsi fenomeninin makroorqanizmin qoruyucu reaksiyalarının formalaşmasında ümumi normal mikrofloranın iştirakını böyük ölçüdə müəyyən edən təkamül yolu ilə formalaşmış dinamik bir proses olduğuna dair bir fərziyyə var.

İstiqanlı heyvanların qanına və orqanlarına basillərin köçürülməsi nəticəsində patoloji dəyişikliklər baş vermir. Bu proses bütün mikroorqanizmlərə qarşı qeyri-spesifik müqaviməti stimullaşdırmaq üçün təbii mexanizmin ilkin həlqələrindən biri hesab edilməlidir. Eyni zamanda, patogen mikroorqanizmlərin nüfuzunun qoruyucu mexanizmlərin ümumi və ya yerli zəifləməsi fonunda baş verdiyi hallarda makroorqanizm üçün mümkün mənfi nəticələr istisna edilə bilməz.

Normal mikrofloranın ekzogen komponenti (qida, hava, su ilə birlikdə) və bununla əlaqədar basillərin orqanlara və qana köçürülməsi konsepsiyası işığında, mikrofloranın ekzogen nümayəndələri əsasında probiyotiklərin oral tətbiqinin məqsədəuyğunluğu işlənib hazırlanmışdır. təsdiqlənir. .

Basillərin antaqonist təsiri müxtəlif təbiətli bioloji aktiv maddələrin istehsalı hesabına həyata keçirilir: polipeptid antibiotiklər, lizozim, litik fermentlər.

Çörəklərin yüksək fermentativ aktivliyi mədə ifrazının əlavə, o cümlədən paradiqestativ fermentlərlə zənginləşdirilməsi baxımından müsbət təsir göstərir. Məsələn, Biosporin və ya Bakterin-SL-ə daxil olan kulturaların aydın pektolitik fəaliyyət göstərdiyi (0,1-0,2 vahid/ml), selülolitik xüsusiyyətlərə malik olduğu və proteolitik fermentlər kompleksini sintez etdiyi göstərilmişdir. Ümumi proteolitik aktivlik 4,2-5,7 vahid/ml, amilaza aktivliyi 11-15 vahid/ml, lipaz - 70-127 µmol, olein turşusu - 5-10 vahid/ml təşkil etmişdir. B. subtilis ştammının kultura mayesi aşağıdakı fermentativ fəaliyyətləri ehtiva edir: 1,3-1,4 qlükanaza, 1,3-1,4 qlükozidaza, .

Siçanlarda pielonefrit modelindən istifadə edilərək, biosporinin istifadəsi makrofaqların stimullaşdırılması hesabına nəzarət heyvanları ilə müqayisədə S. aureusun böyrəklərdən daha sürətli xaric olmasına töhfə verdiyi göstərilmişdir. Əldə edilən məlumatlar göstərir ki, çöplərdən bioloji məhsullar təkcə mədə-bağırsaq traktının mikroflorasının korreksiyası üçün deyil, həm də mədə-bağırsaq traktından kənarda lokallaşdırılmış bakterial infeksiyaların müalicəsi üçün də perspektivlidir.

Ştammların morfoloji və fizioloji-biokimyəvi xassələrinin öyrənilməsi

Peritoneal neytrofilləri toplamaq üçün heyvanlara 2 ml 1% kazein məhlulu ilə intraperitoneal enjekte edildi; 4-5 saatdan sonra siçanlar heyvanlarla humanist rəftar qaydalarına uyğun olaraq efir premedikasiyasından istifadə etməklə boyun fəqərələrinin köçürülməsi yolu ilə məhv edilib. Neytrofil aqreqasiyasının qarşısını almaq üçün qarın boşluğunun heparinlə Hanks məhlulu ilə yuyulması yolu ilə peritoneal maye əldə edilmişdir. Bir qrup heyvanın 5 siçanından alınan peritoneal mayedən hüceyrə hovuzu əmələ gəlmişdir. Morfoloji tədqiqat göstərdi ki, hüceyrə tərkibinin 70-85%-i neytrofillərdir. Hüceyrə canlılığı 95%-i keçdi. Hüceyrə hovuzu 1500 rpm-də 10 dəqiqə sentrifuqa edilmişdir. Sonra 300 mkl iribuynuzlu zərdab (buvar zərdabı) və 3% sirkə turşusu əlavə edildi və təcrid olunmuş neytrofillərin sayı Qoryayev kamerasında hesablandı.

Nitroblue tetrazolium reduksiya testinin (NBT testi) həyata keçirilməsi metodologiyası, spontan və in vitro stimullaşdırılır. Metod neytrofillərin nitromavi tetrazoliumu udmaq və onu həll olunmayan diformazanın (DF) mavi qranullarına çevirmək qabiliyyətinə əsaslanır. NBT-nin bərpası faqositoz prosesini müşayiət edən "metabolik partlayışın" redoks reaksiyalarının enerjisi və məhsulları, həmçinin aktivləşdirilmiş neytrofilin metabolizmasının artması ilə təmin edilir. Spontan və induksiya edilmiş NBT testləri var. Spontan test nəticələri nümunələrdə aktivləşdirilmiş hüceyrələrin sayını göstərir. Stimullaşdırılmış testin nəticələri tədqiq olunan A neytrofillərinin in vitroda aktivləşmə qabiliyyəti haqqında fikir verir. Reaksiya 96 quyulu düz dibli plitələrdə aparılmışdır immunoloji tədqiqat. Spontan aktivliyi təhlil edərkən quyuya aşağıdakılar əlavə edildi: 50 μl 0,4% NCT məhlulu, 50 μl inkubasiya mühiti (20% mal-qara qan serumu ilə IS-0,85% NaCl məhlulu) və 100 μl hüceyrə suspenziyası . İnduksiya edilmiş aktivliyi təhlil etmək üçün hər bir quyuya aşağıdakılar əlavə edildi: 50 μl NCT məhlulu, 50 μl stimulyator suspenziyası (opsonlaşdırılmış (o/z) və opsonlaşdırılmamış (n/z) zimozan, 20 hissəcik/ hüceyrə) və 100 μl hüceyrə süspansiyonu. Hər bir reaksiya variantı 2 paralel sınaqda aparılmışdır. Reagent nəzarəti hüceyrə suspenziyasını ekvivalent həcmdə IS ilə əvəz etməklə həyata keçirilmişdir. Plitə 37C-də 20 dəqiqə inkubasiya edildi. NBT-nin azaldılması və tərkibində DF olan hüceyrələrin çökməsi reaksiyasını dayandırmaq üçün boşqab 500 q-da 10 dəqiqə sentrifuqa edilmişdir. Quyulara yığılmış hüceyrələr 96% etil spirti ilə bərkidilmiş və bir dəfə 0,85% NaCl məhlulu ilə yuyulmuşdur. Hüceyrələrin məhv edilməsi və əmələ gələn DF-nin əriməsi hər quyuya 130 μl dimexid və 70 μl 2M KOH əlavə etməklə, ardınca 60°C-də 20 dəqiqə inkubasiya etməklə əldə edilmişdir. Quyuların tərkibi firuzəyi rəng almışdır, intensivliyi çıxarılan DF-nin miqdarından asılı idi. Reaksiya nəticələri sınaq (630 nm) və istinad (490 nm) dalğa uzunluqlarında sönmələr fərqinə əsaslanaraq spektrofotometrdə qeydə alınıb.

Alınan nəticələr neytrofillərin spontan aktivliyinin (sNST), neytrofillərin induksiya edilmiş o/z aktivliyinin (o/zNST), neytrofillərin induksiya edilmiş n/o aktivliyinin (n/zNST) səviyyələri ilə qiymətləndirilmişdir. Test nəticələri MOD (Optik Sıxlıq) ilə ifadə edilmişdir. Hüceyrələrin funksional aktivliyinin ehtiyatları aktivləşmə əmsalları (KAo və KAn) ilə qiymətləndirilmiş, hüceyrə fəaliyyətinin müxtəlif stimullara diskretlik dərəcəsi opsonizasiya əmsalı (CO) ilə müəyyən edilmişdir. (n=5).

Faqositlərin xemilüminessensiyasının təhlili hüceyrələr tərəfindən reaktiv oksigen radikallarının, o cümlədən superoksid anionunun, təkli oksigenin və hidroksil radikalının əmələ gəlməsini və faqositoz zamanı hüceyrə tənəffüsünün intensivliyinin göstəricisi olan faqosit miyeloperoksidazanın müəyyən dərəcədə iştirakını aşkar edir.

Təhlil proseduru: Sintilasiyanın hesablanması üçün hər flakona 200 μl lxlO6 luminol əlavə edildi və sonra 200 μl neytrofillərin suspenziyası əlavə edildi ki, onların son konsentrasiyası 1 ml üçün 0,5 x 106 olsun. 51 flakon qarışdırıldı, sayğacda yerləşdirildi və 90-120 dəqiqə ərzində 0,1 dəqiqəlik fasilələrlə 37 C-də kimilüminesans ölçüldü. Tipik olaraq, ölçmə başlandıqdan 45-60 dəqiqə sonra hüceyrənin şüşəyə yapışması başa çatdı və kimyəviluminesansın intensivliyi ilkin səviyyəyə yaxınlaşdı. Bu müddət ərzində eyni şüşələrə 20 μl həcmində zimozan (opsonlaşdırılmış və opsonlaşdırılmamış) suspenziyası əlavə edilmişdir (əridikdən sonra 20 mq/ml-lik orijinal suspenziya 10 dəfə seyreltilmiş və bu seyreltmə şüşəyə əlavə edilmişdir). Sonra, 60 dəqiqə ərzində dəqiqədə impulsların sayını qeyd edərək, kimyəviluminesans yenidən ölçüldü. Sonra 1 hüceyrə üçün saylar yenidən hesablandı və kimilüminesans şərti olaraq say/dəq/hüceyrə ilə ifadə edildi. (n=5).

Plazmid DNT analizi. Tapşırıqlara əsasən bu araşdırma, qələvi lizizdən istifadə edərək plazmid DNT-ni təmizləmək üçün nəzərdə tutulmuş standart prosedur həyata keçirdi. Biokütlə (2 ml) 2 ml məhlulda dayandırıldı növbəti sıra: 50 mM qlükoza, 20 mM Tris-HCl; 10 mM EDTA; pH 8.0. Üzərinə 20 μl lizozim (8 mq/ml) əlavə edildi, qarışdırıldı və +4 - + 8C-də 20 dəqiqə inkubasiya edildi. Bundan sonra, 4 ml lizis məhlulu (0,2 M NaOH, 1% SDS) əlavə edildi, qarışdırıldı və eyni temperaturda 5 dəqiqə inkubasiyaya davam edildi. Vaxt keçdikdən sonra, 3 ml neytrallaşdırıcı məhlul (3 M kalium asetat, pH 4.8) əlavə edildi, yumşaq qarışdırıldı və 30 dəqiqə +4 - +8 C-də inkubasiya edildi. Sonra boru 10000 rpm sürətlə +4C temperaturda 30 dəqiqə sentrifuqa edildi (Backman J2-21, rotor JA-14). Supernatant sınaq borularına yığıldı və ona 2,5 həcmdə etanol əlavə edildi. -70 C temperaturda 10-15 dəqiqə inkubasiya edilir və 20 dəqiqə +4 C temperaturda (Backman J2-21, JA-20 rotoru) 10000 rpm sürətlə sentrifuqa edilir. Çöküntü 600 μl suda həll edildi, mikrosentrifuqa borularına köçürüldü, 400 μl 7,5 M Na-asetat əlavə edildi və -20 C-də 30 dəqiqə inkubasiya edildi. Sonra +4C-də 18000q sürətlə 10 dəqiqə sentrifuqa edildi. Çöküntü 70% etanol ilə yuyulur və sonra havada qurudulur. Nəticədə dərman 400 μl TE tamponunda (10 mM Tris-HCl, 1 mM EDTA, pH 8.0) həll edildi və fenol-xloroform ekstraksiyasına məruz qaldı. Tris-HCl tampon məhlulu, pH 8.0 ilə doymuş bərabər həcmdə fenol/xloroform qarışığı (1:1) əlavə edildi. Qarışıq güclü bir şəkildə burulğan edildi və otaq temperaturunda 13000 q sürətlə 6 dəqiqə sentrifuqa edildi. Supernatant təmiz sınaq borularına köçürüldü və bərabər həcmdə xloroform/izoamil spirti qarışığı (25:1) əlavə edildi. Boru burulğanla silkələnmiş və 16000 q və +4 C temperaturda 2 dəqiqə sentrifuqa edilmişdir. Supernatant təmiz borulara köçürüldü və 2,5 həcm etanol və 1/10 həcm natrium asetat məhlulu əlavə edilərək məhluldan DNT çökdürüldü. Boru -70 C-də 10-15 dəqiqə inkubasiya edildi və sonra 10 dəqiqə 16000 q və +4 C temperaturda sentrifuqa edildi. Supernatant çıxarıldı və çöküntü 70% spirt ilə yuyuldu (200-500 əlavə və atma). μl). Çöküntü havada qurudulmuş və 200 μl-də həll edilmişdir sulu məhlul ribonuklease A 5-10 μg konsentrasiyası ilə və +37 C temperaturda termostatda 40 dəqiqə inkubasiya edilmişdir. DNT-nin çökdürülməsi proseduru etanol və natrium asetatdan istifadə etməklə təkrar edilmişdir. DNT çöküntüsü 200 μl TE tamponunda həll edildi.

B.subtilis 1719 ştamının toksikliyinin, toksigenliyinin, virulentliyinin və probiotik aktivliyinin in vivo təcrübələrdə öyrənilməsi.

Canlı apatogen mikroorqanizmlərə əsaslanan dərman preparatlarının sənaye istehsalı becərilməsi üçün qida mühitinin seçilməsi və optimallaşdırılması ilə birbaşa bağlıdır.

Mühitdə inqrediyentlərin optimal seçimi biokütlənin maksimum yığılmasına və ştammların antaqonist xüsusiyyətlərinin təzahürünə kömək edir ki, bu da becərmə prosesinin yüksək məhsuldarlığının göstəricisi kimi çıxış edir.

Bununla belə, probiotik suşlar trofik xüsusiyyətlərə malikdir. Onlar “deformasiya - qida mühiti” sistemində nəzərə alınmalıdır. B. subtilis ştammları əsasında effektiv probiotiklərin əldə edilməsi aktual məsələ olaraq qalır, onun həlli üçün qida mühitinin formalaşdırılmasının ştamın xassələrinə adekvatlığı prinsipindən istifadə oluna bilər. Bu məsələ öyrənilərkən soya unu hidrolizatı (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) və ya pepton (VK-2) əsasında bizim tərəfimizdən hazırlanmış məlum tərkibli mühitlərdə və mühitlərdə becərmə aparılmışdır.

Soya ununun peptonlu hidrolizatına (SPAS-2, SPAS-4, SPAS-6) və peptonlu mühitə (VK-2) əsaslanan mühitlərin böyümə xüsusiyyətlərini qiymətləndirərkən, becərmə göstəricilərinin media ilə müqayisəsi aparılmışdır. B. subtilis ştammlarının yetişdirilməsi üçün istifadə olunur - bioloji aktiv maddələrin istehsalçıları (media: No 5, No 9, KG - kartof-qliserin).

Kulturanın fizioloji xassələri müxtəlif karbohidrat mənbələrinin əlavə edilməsindən asılı olaraq dəyişə bildiyindən B. subtilis 1719-un becərilməsinin nəticələrini orijinal tərkibli mühitlərdə və qlükoza, maltoza, saxaroza və laktoza əlavə etməklə müqayisə etmək məqsədəuyğun idi. karbohidratların mənbəyi kimi.

Şəkərsiz mühitlərdə (Şəkil 6.1.) 18 saat kultivasiya zamanı kultivasiya mayesində hüceyrələrin optik sıxlığı (OD) və böyümə sürəti (s) səviyyəsinin müqayisəsi göstərdi ki, media No5, SPAS-6 və kartof- qliserin mühiti müvafiq olaraq 0,24±0,01 (u=0,03 h"1), 0,22±0,01 (1)=0,0334-1) və 0,3±0,01 (u = 0,025 saat 1) bərabər OD ilə gərginliyin böyüməsini təmin etdi. 2, SPAS-4, No 9, maksimum OP dəyəri 0,42 + 0,03 (u = 0,067 h "1), 0,38 ± 0,02 (1 )=0,0541) və 0,58±0,03 (1)=0,037 h"1), müvafiq olaraq və VK-2 mühitində - 0,85+0,6 (\ =0,068 h"). Bu mühitlərdə maksimum biokütlə konsentrasiyasına çatma vaxtı 9±0,7 saatdan (SPAS-2) 18±1,3 saata (KGG) qədər dəyişdi.

Maksimum biokütlə məhsuldarlığı (BY) böyümə sürəti 0,068 h"1 VK-2 mühitində, ən aşağısı isə SPAS-6 mühitində və 0,033 h"1 artım sürəti ilə aşkar edilmişdir. karbohidratlar mənbəyi kimi media qlükoza əlavə (Şəkil 6.2.) media No 5, No 9 və SPAS-6 istisna olmaqla, demək olar ki, iki dəfə B. subtilis 1719 hüceyrələrinin konsentrasiyası artmasına səbəb: orta haqqında № 9 OD qiymətində 0,43-ə qədər etibarsız azalma, demək olar ki, eyni artım tempində (0,035 h"1) ±0,03 qeyd edildi və SPAS-6-da OP dəyəri eyni səviyyədə qaldı. Ən yüksək biokütlə məhsuldarlığı VK-2 mühiti, OP 1.0±0, 09 (1-də)=0.066 h"1) ilə 18 saatlıq böyümə. Maltoza (Şəkil 6.3.) 9 və 5 nömrəli mühitlərdə optimal karbohidrat olduğu ortaya çıxdı. OP dəyəri 9 saylı mühitdə 0,695±0,025 (i)=0,058 h"1) 12 saata, 5 nömrəli mühitdə isə 0,51±0,045 (i=0,022 h"1) 18 saat artıb. SPAS-da media -4 və CG, biokütlə məhsuldarlığı qlükoza istifadəsi ilə müqayisədə 0,8±0,06 (1)=0,063 h1)-dən 0,33±0,01 (1)=0,040 h1) və 0,62+0, 04 (D=0,03 h1)-dən azalıb. "1) müvafiq olaraq 0,38±0,03(u=0,025 h"1) qədər. Kulturanın VK-2 mühitində böyüməsi biokütlə məhsuldarlığını azaltmağa meylli olmuşdur ki, bu da OP dəyərinin 1,0±0,09 (1)=0,066 h1)-dən 0,55±0,25 (D=0,046 h"1-ə qədər azalması ilə özünü göstərirdi. Mediaya əlavə edilən laktoza (Şəkil 6.4.) B. subtilis 1719-un OD səviyyəsində 0,21±0,04-dən 0,5±0,03-ə qədər böyüməsini təmin etdi, VK-2 istisna olmaqla - 0,83±0 05. Mediaya saxaroza əlavə edilməsi (Şəkil. 6.5.) yalnız VK-2 mühitində biokütlənin yüksək toplanmasına kömək etdi və OD 17 saatlıq becərmə ilə 1,1 + 0,06 (u = 0,063 h"1) dəyərinə çatdı. Əlavə karbohidratlar əlavə edilmədən yalnız VK-2 mühiti biokütlənin yığılması üçün optimal mühit oldu. Qlükoza, laktoza və saxaroza əlavə edildikdə bakteriya hüceyrələrinin ən böyük yığılmasını təmin etdi. B. subtilis 1719-un maksimum biokütlə məhsulu VK-2 mühitində qlükoza (OD - 1,0±0,09) əlavə edilməklə, kultivasiyanın 18+0,15 saatında və ya saxaroza (OD - 1,1+0,06) 17+1,0 saat kultivasiyada əldə edilmişdir. . Müəyyən edilmişdir ki, qida mühitinin tərkibi ştamın antaqonist xassələrinə heç bir təsir göstərmir.

B.subtilis 1719 ştammının saxlanma zamanı canlılığının və antaqonist fəaliyyətinin öyrənilməsi

Bacilli mədəniyyət mayesinə bir çox ferment ifraz etmək qabiliyyətinə malikdir. Onlar qida məhsullarının, yuyucu vasitələrin və biotibbi maddələrin istehsalında istifadə olunan proteolitik və amilolitik fermentlərin istehsalı üçün mühüm sənaye sahəsi kimi xidmət edirlər. Son onillikdə onların iştirakı ilə bir sıra yeni antibiotiklər, bakterial insektisidlər və digər bioloji aktiv maddələr əldə edilmişdir.

B. subtilis-in GRAS statusuna malik olmasına baxmayaraq, ədəbiyyatda B. subtilis-in bəzi suşlarında patogenlik faktorlarının olması barədə təcrid olunmuş məlumatlar mövcuddur. Bunun olmadığı bildirilir daimi əlamət, çünki təkrar səpmə zamanı yox olur. Bakteriyaların patogen xüsusiyyətlərinin plazmidlərin olması ilə əlaqəli olduğu irəli sürülür. Məsələn, Le N. və Anagnostopoulos S. tədqiq edilmiş 83 subyektdən B. subtilis-in 8 ştammından təcrid olunmuş plazmidlər. Plazmid DNT yalnız B. subtilis-in toksigen ştammlarının hüceyrələrində müəyyən edilmişdir və toksik olmayan eyni növün digər suşlarının hüceyrələrində aşkar edilməmişdir. Eliminasiyaedici maddələrin təsiri altında toksigen ştammlardan plazmidlərin çıxarılması kultura filtratlarının toksigen xüsusiyyətlərinin aradan qaldırılmasına səbəb olmuşdur. Bununla belə, plazmidlərin genetik rolu kifayət qədər öyrənilməmişdir.

Tədqiqatlarımızda tədqiq edilən üç B. subtilis ştammının təcrid olunmuş DNT preparatlarında heç bir plazmid tapılmadı.

İstiqanlı heyvanların orqanizminə basillərin təsirini tədqiq edən müəlliflər belə nəticəyə gəliblər ki, B. subtilis ştammları insanlar və heyvanlar üçün tamamilə zərərsizdir. Makroorqanizm üçün zərərsizliyini sübut edən eksperimental məlumatlar parenteral tətbiqdən sonra bir neçə gün ərzində B.subtilis-in bədəndən xaric edildiyini göstərir. Bu bitkilərin müalicəvi təsir mexanizmləri heyvanlarda tədqiq edilmişdir. Hazırda güman edilir ki, spor probiotiklərinin müalicəvi effekti amillər kompleksi ilə müəyyən edilir, o cümlədən: patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin böyüməsini boğan B. subtilis kulturaları tərəfindən bakteriosinlərin istehsalı; yüksək aktiv fermentlərin sintezi: proteazlar, ribonukleazlar, transaminazlar və s.; bakterial toksinləri neytrallaşdıran maddələrin istehsalı.

Siçanlarda seçilmiş ştamın xassələrinin tədqiqi göstərdi ki, o, avirulentdir və toksiklik və ya toksigenliyə malik deyil. Faktorlar müsbət təsir makroorqanizm üzərindəki probiyotiklərdir müxtəlif məhsullar mikrob sintezi: amin turşuları, polipeptid antibiotiklər, hidrolitik fermentlər və daha az əhəmiyyət kəsb edən bir sıra digər bioloji aktiv maddələr. Buna görə də, Bacillus cinsinə aid mikroorqanizmlər tərəfindən istehsal olunan qoruyucu maddələrin öyrənilməsi və təcrid edilməsi və onların əsasında biotibbi dərmanların yaradılması təcili ehtiyacdır.

Mədə-bağırsaq traktında, patogen və şərti olaraq patogen mikroorqanizmlərə münasibətdə əsasən seçici olan basillərin birbaşa antaqonist təsiri özünü göstərir. Eyni zamanda, onlar normal mikrofloranın nümayəndələrinə qarşı antaqonizmin olmaması ilə xarakterizə olunur.

Tədqiqatlarımızda, antibiotik doksisiklin qəbulu ilə törədilən eksperimental disbiozun korreksiyası zamanı B. subtilis 1719 kulturası bağırsaq mikroflorasının tərkibinin və sayının normallaşmasına, həmçinin bağırsaqlarda şərti patogen mikroorqanizmlərin aradan qaldırılmasına kömək etmişdir. parietal və luminal mikroflora.

Ədəbiyyatdan belə çıxır ki, Bacillus cinsinin sənaye ştammlarının eritrositlərə aşağı yapışma aktivliyi, bağırsaq epitel hüceyrələrinə isə zəif və ya orta dərəcədə yapışma indeksi var. B. subtilis 534 və ZN ştammları enterosit reseptorlarına, B. licheniformis ştammı - kolonositlərə, yəni daha çox adhezinlərə malikdir. Fərqli suşların müxtəlif bağırsaq hüceyrələrindəki reseptorlara adhezinləri olduğu görünür.

Onların fəaliyyəti bağırsaq lümenində baş verir və normal mikrofloranın nümayəndələrinə antaqonist təsir göstərmədən patogen mikroorqanizmlərə qarşı yönəldilir. Spor probiotikləri qəbul edərkən müxtəlif bağırsaq lokuslarında avtofloranın bərpası mümkünlüyü reallaşır və 3-5 gündən sonra laktobakteriyalar, bifidobakteriyalar, E.coli və s. sayı artır və sonra normal səviyyəyə qayıdır.

Mikroorqanizmlərin enterositlərə yapışması ilə bağlı apardığımız tədqiqatların nəticələri bağırsaq hüceyrələrinin yapışma qabiliyyətinin normal mikrofloranın kəmiyyət və keyfiyyət tərkibindən asılı olduğunu təsdiq etməyə daha çox imkan verir. Disbiotik şəraitdə şərti olaraq patogen və patogen mikroorqanizmlərin bağlandığı enterositlərin səthində reseptorlar açılır və disbioz düzəldildikdə bağırsaq normal mikroflora və onun səthinə yapışmağa qadir olan enterosit reseptorlarının sayı ilə kolonizasiya olunur. yerli mikroorqanizmlər azalır.

Məlumdur ki, normal mikroflora makroorqanizmin postnatal inkişafında immunitetin və spesifik qoruyucu reaksiyaların formalaşma mexanizmində mühüm tetikleyici rol oynayır.

Bu bakteriya təbiətdə çox geniş yayılmış mikroblardan biridir. Bacillus subtilis 1835-ci ildə təsvir edilmişdir. Mikroorqanizm bu adı ilkin olaraq çürük otdan təcrid olunduğu üçün almışdır. Laboratoriyada ot möhürlənmiş bir qabda maye ilə qaynadılır, sonra iki-üç gün dəmlənir. Bundan sonra bir koloniya meydana gəldi.Beləliklə, bu ümumi bakteriyanın ətraflı tədqiqinə başlandı.

oxuyur

Elmdə belə bir termin var - "model orqanizm". Proseslərin, xassələrin intensiv öyrənilməsi, elmi təcrübələrin aparılması üçün təbiət nümayəndələri seçildikdə. Parlaq bir nümunə, biologiya dərslərindən bizə yaxşı tanış olan başmaq siliatıdır.

Bacillus subtilis də nümunə bir orqanizmdir. Onun sayəsində basillərdə sporların əmələ gəlməsi hərtərəfli öyrənildi. Bu bakteriyalarda flagella mexanizmini anlamaq üçün bir modeldir və molekulyar genetik tədqiqatlarda rol oynamışdır.

Alimlər Bacillus Subtilis-in çəkisizliyə yaxın şəraitdə becərilməsi, populyasiyanın genomlarında dəyişikliklərin öyrənilməsi üzrə təcrübələr aparıblar. Bu mikroorqanizmlərdən kosmosdan gələn ultrabənövşəyi şüaların təsirinin və canlı orqanizmlərin ona uyğunlaşma qabiliyyətlərinin öyrənilməsində də istifadə olunur. Bacillus subtilis misalından istifadə edərək, günəş sistemindəki digər planetlərin şəraitində (bu gün Marsa daha çox diqqət yetirilir) bakteriyaların yaşaması imkanlarını öyrənirlər.

Qısa xüsusiyyətləri

Bacillus subtilis düz və uzunsov formaya, küt yuvarlaq uclara malikdir, adətən rəngsizdir. Orta diametri 0,6 mikron, uzunluğu isə 3-8 mikron arasında dəyişir. Bu parametrlərlə Bacillus subtilis mikroskop altında mükəmməl şəkildə araşdırıla və hətta müasir texnologiyalardan istifadə edərək fotoşəkili çəkilə bilər. Bacillus flagella sayəsində hərəkətlidir. Onlar hüceyrənin səthi boyunca böyüyürlər və bunu fotoşəkillərdə görmək olar.

Yaşayış yeri

Bacillus samanı ənənəvi olaraq bitki yarpaqlarında, meyvələrdə və tərəvəzlərdə bitir. Üstəlik, havada və su mühitində tozda olur. Və hətta həm heyvanlarda, həm də insanlarda bağırsaq mikroflorasının bir seqmentidir. +5 ilə +45 dərəcə arasında olan temperaturda inkişaf edir (optimal olaraq təxminən 30).

Saman çubuğu. Reproduksiya

Digər bakteriyalar kimi, sadə hüceyrə bölünməsi (uzununa) ilə çoxalır. Belə yarılanma nəticəsində yaranan yeni orqanizmlər çox vaxt bir-birinə iplə bağlı qalırlar. Bu cür əlaqələri fotoşəkillərdə asanlıqla ayırd etmək olar.

Bacillus subtilis spor əmələ gətirən mikroorqanizm kimi təsnif edilir. Bu, hücum zamanı sağ qalmağa imkan verir əlverişsiz şərait həyat üçün. Basillərin sporulyasiyası belə başlayır: hüceyrənin tərkibi dənəvər bir quruluş əldə edir. Taxılların bəziləri, adətən mərkəzi hissədə böyüməyə başlayır və sərt qabıqla örtülür. Eyni zamanda, orijinal hüceyrənin qabığı məhv edilir. Son proses xarakterik mübahisənin xarici mühitə çıxarılması ilə başa çatır. Bölündükdən sonra hüceyrələrdən hər hansı biri dəyirmi və ya oval formada olan sporlar yaratmaq qabiliyyətini saxlayır. Onlar xarici amillərə və temperaturun artmasına kifayət qədər davamlıdırlar - məsələn, onlar 100 dərəcədən çox istiləşməyə davam edə bilərlər. Xarakterikdir ki, spordan əmələ gələn bakteriya hərəkətsizdir və hərəkət etmək qabiliyyəti yalnız mikroorqanizmin sonrakı nəsillərində görünür.

Bacillus subtilis necə qidalanır?

Bu bakteriya saprofit kimi təsnif edilir, ölü üzvi maddələrlə qidalanır. Heterotrof olan Bacillus subtilis, qidalanması üçün lazım olan maddələri qeyri-üzvi maddələrdən sintez edə bilməz. Buna görə də digər orqanizmlər tərəfindən istehsal olunan üzvi maddələrdən istifadə edir. Ondan enerji mübadiləsi üçün lazım olan karbonu çıxarır.

Qidalanmada əsas mənbə bitki mənşəli (nişasta) və heyvan mənşəli polisaxaridlərdir (qlikogen). Proses sintez yolu ilə amin turşuları, vitaminlər, müxtəlif fermentlər və antibiotiklər istehsal edir.

Digər mikroorqanizmlərlə qarşılıqlı əlaqə

Bu bacillus fürsətçi və patogen mikrobların inkişafını boğmağa qadirdir: salmonella və streptokokk, stafilokok və digər "zərərvericilər". Məsələn, yırtıcıların bir çox nəsilləri müəyyən növ bitkiləri istehlak etmək üçün bir refleks inkişaf etdirdilər. Və bu üsul təkcə orqanizmə vitaminlər vermir, həm də Bacillus Subtilis sporlarının oraya daxil olmasına kömək edir ki, bu da patogen mikrofloranı məhv edə bilər, eyni zamanda toxunulmazlığı artırır.

Bu basil həm də protozoa üçün qida ola bilər. Məsələn, qida zəncirinin başlanğıcı belə görünə bilər: basil - kirpikli-başmaq - müəyyən növ mollyuska - balıq - insan.

Patogenlik

Müxtəlif təsnifatlara görə, bu basil həm insanlar, həm də heyvanlar üçün patogen deyil. O, qidanın həzm prosesində iştirak edir, zülalları və karbohidratları parçalayır, məməlilərin bağırsaqlarının və dərisinin patogenləri ilə mübarizə aparır. Tədqiqatçılar müəyyən ediblər ki, məsələn, insan yaralarında bitən bakteriyalar arasında Bacillus subtilis həmişə mövcuddur. Ölü toxumaları məhv edən fermentlər, həmçinin patogen mikrofloranı maneə törədən və antiallergik dərman kimi yumşaq təsir göstərən antibiotiklər istehsal edir. Elm tərəfindən sübut edilmişdir: bu bakteriya həm də cərrahi müdaxilələr zamanı yoluxucu agentlərin inkişafını boğur.

Lakin, bu basilin mənfi təsiri də qeyd olunur: bədəndə bir döküntü ilə ifadə edilən allergiyaya səbəb ola bilər; bəzən bu mikroorqanizmin fəaliyyəti ilə korlanmış qidaları yedikdən sonra qida zəhərlənməsinə səbəb olur; şiddətli səbəb ola bilər göz infeksiyasışəxs.

tezis

Qataullin, Ayrat Qafuanoviç

Akademik dərəcə:

Biologiya elmləri namizədi

Dissertasiyanın müdafiə olunduğu yer:

HAC ixtisas kodu:

İxtisas:

Mikrobiologiya

Səhifələrin sayı:

ƏDƏBİYYAT İCARƏSİ

Fəsil 1. Mikrob antaqonizmi - disbiotik şəraitin düzəldilməsi üçün bioterapevtik preparatların yaradılması üçün əsasdır.

Fəsil 2. Spora probiotikləri və onların makroorqanizmə təsiri

2.1. Bacillus cinsinin bakteriyalarından preparatlar

2.2. Bacillus cinsinin bakteriyalarından olan probiyotiklərin terapevtik və profilaktik təsir mexanizmləri haqqında müasir fikirlər.

2.3. Aerobik tərəfindən istehsal olunan bioloji aktiv maddələr spor əmələ gətirən bakteriya

2.4. Bacillus cinsinin bakteriyalarının patogen amilləri 34 ÖZ TƏDQİQAT

Fəsil 3. Obyektlər və tədqiqat metodları

3.1. Tədqiqat obyektləri

3.2. Tədqiqat üsulları 43 3.2.1. Avadanlıq və texnika

Fəsil 4. İzolyasiya olunmuş ştamların xüsusiyyətləri

4.1. Ştammların morfoloji və fizioloji-biokimyəvi xassələrinin öyrənilməsi

4.2. B.subtilis ştammlarının in vitro təcrübələrində antaqonist və yapışdırıcı fəaliyyəti

4.3. Tərif antibiotik müqaviməti və B.subtilis ştammlarının plazmid profili

Fəsil 5. B.subtilis 1719 ştammının makroorqanizmə təsiri

5.1. B.subtilis 1719 ştamının toksikliyinin, toksigenliyinin, virulentliyinin və probiotik aktivliyinin in vivo təcrübələrdə öyrənilməsi.

5.2. Eksperimental dysbiosis ilə in vivo təcrübələrdə B. subtilis 1719 ştammının toxunulmazlıq parametrlərinə təsirinin öyrənilməsi

Fəsil 6. Probiotik preparatın əsası kimi B.subtilis 1719 ştamının texnoloji xüsusiyyətləri

6.1. Müxtəlif maye qida mühitlərində böyümə xüsusiyyətlərinin qiymətləndirilməsi

6.2. B.subtilis 1719 ştammının saxlanma zamanı canlılığının və antaqonist fəaliyyətinin öyrənilməsi

Fəsil 7. B.subtilis ştammı\l\9 və bəzi kommersiya probiotik preparatlarının əsasını təşkil edən ştamların xassələrinin müqayisəli xarakteristikası. NƏTİCƏ

Dissertasiyanın girişi (referatın bir hissəsi) “Yeni probiyotiklərin yaradılması üçün perspektivli Bacillus subtilis ştammlarının bioloji xassələri” mövzusunda

Problemin aktuallığı

Tibbi mikrobiologiyanın müasir mərhələsində həyati prosesləri zamanı patogen mikroorqanizmlərin, bədxassəli şişlərin böyüməsini maneə törədən və müxtəlif patoloji və patoloji prosesləri normallaşdıran bioloji aktiv maddələr (BAS) istehsal etməyə qadir olan saprofit mikrofloranın istifadəsini əsaslandıran yeni məlumatlar ortaya çıxdı. insan orqanizmində baş verən biokimyəvi proseslər.

Son onillikdə mədə-bağırsaq traktının xəstəliklərinin qarşısının alınması və müalicəsi üçün canlı mikrob kulturalarına əsaslanan bioloji məhsullardan geniş istifadə olunur. spor əmələ gətirən

Mikroorqanizmlərin ən müxtəlif və geniş yayılmış qruplarından biri olan Bacillus cinsinin bakteriyaları insan və heyvanların ekzogen florasının mühüm komponentləridir.

Bacillus cinsi qədim zamanlardan tədqiqatçıların diqqətini cəlb etmişdir. Mikrobiologiya, fiziologiya, biokimya və bakterial genetika sahəsində toplanmış biliklər Bacillusun bioloji aktiv maddələrin: fermentlərin, antibiotiklərin, insektisidlərin istehsalçıları kimi üstünlüklərini göstərir. Müxtəlif yaşayış şəraitinə yüksək uyğunlaşma qabiliyyəti (oksigenin olması və ya olmaması, geniş temperatur diapazonunda böyümə və inkişaf, müxtəlif üzvi və ya qeyri-üzvi birləşmələrin qida mənbəyi kimi istifadəsi və s.) çöplərin torpaqda, suda, hava, qida məhsulları və digər xarici mühit obyektləri, habelə insan və heyvan orqanizmində.

Metabolik proseslərin müxtəlifliyi, genetik və biokimyəvi dəyişkənlik, litik və həzm fermentlərinə qarşı müqavimət çöplərin təbabətin müxtəlif sahələrində istifadəsi üçün əsas rolunu oynamışdır. ABŞ Qida və Dərman İdarəsi Bacillus subtilis-ə GRAS statusu (ümumiyyətlə təhlükəsiz hesab olunur) - bu bakteriyaların dərman istehsalında istifadəsi üçün ilkin şərt olan tamamilə təhlükəsiz orqanizmlər təyin etdi.

Basillərin fəaliyyəti patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin geniş spektrinə qarşı özünü göstərir. Müxtəlif fermentlərin və digər maddələrin sintezi sayəsində həzmi tənzimləyir və stimullaşdırır, antiallergen və antitoksik təsir göstərir. Bacilli istifadə edərkən makroorqanizmin qeyri-spesifik müqaviməti əhəmiyyətli dərəcədə artır. Bu mikroorqanizmlərin istehsalı asan, rəfdə dayanıqlı və ən əsası ekoloji cəhətdən təmizdir.

Yaşayan qeyri-patogen mikroblara əsaslanan, təbii qəbul üsulu ilə mikrobioloji vəziyyətini optimallaşdırmaqla ev sahibi orqanizmin fizioloji və biokimyəvi funksiyalarına faydalı təsir göstərməyə qadir olan terapevtik və profilaktik preparatlar hazırda probiotik dərmanlar kimi təsnif edilir.

Basillərdən B. subtilis ştammları daha çox maraq doğurur. Genetik və fizioloji xüsusiyyətlərin biliklərinə görə E.coli-dən sonra ikinci yeri tuturlar. B. subtilis-in biotexnologiyada böyük potensialı bakterial genom haqqında bütün məlumatların daxil edildiyi bu ştammın molekulyar genetikasına dair məlumat bankının - SubtiList-in yaradılması ilə sübut olunur.

Ölkəmizdə və xaricdə aparılan elmi tədqiqatların nəticələrinin təhlili bakterial biokütlədən və ya onların metabolitlərindən məhsul almaq üçün Bacillus cinsinin bakteriyalarının istifadəsinin miqyasını göstərir. Məlum üsullar becərmə

Bacillus cinsinin canlı bakteriyaları əsasında makroorqanizm üçün zərərsiz, geniş terapevtik və profilaktik təsir göstərən və ekoloji cəhətdən təhlükəsiz olan probiotik preparatlar yaradılmışdır. Bacillus cinsinə aid canlı mikrob kulturalarının insanlarda və kənd təsərrüfatı heyvanlarında mədə-bağırsaq xəstəliklərinin müalicəsində istifadəsinə dair nəticələr böyük elmi və praktiki əhəmiyyət kəsb edir.

Hal-hazırda praktiki səhiyyədə məşhur probiotik preparatlardan geniş istifadə olunur: baktisubtil, sporobakterin, biosporin, baktisporin, subalin, sereobiogen, enterogermin və s.

Terapevtik istifadə üçün göstərişlər və bu dərmanların terapevtik effektivliyi onların istehsalı üçün istifadə olunan suşların xüsusiyyətləri ilə məhdudlaşır. İnsan və ya heyvan orqanizminin müxtəlif biotoplarında mikroekoloji pozğunluqlara səbəb olan patogen və fürsətçi mikroorqanizmlərə qarşı antaqonist fəaliyyət spektri həlledici əhəmiyyət kəsb edir. Bundan əlavə, çöplərin bioloji aktiv maddələr (polipeptid antibiotiklər, fermentlər və s.) əmələ gətirmə qabiliyyətini və onların antibiotiklərə qarşı müqavimətini nəzərə almamaq olmaz.

Müxtəliflik və yaranan antibiotik müqaviməti bir tərəfdən disbiotik pozğunluqların inkişafında iştirak edən mikroorqanizmlər, eləcə də dəyişkənlik biosintetik B.subtilis-in müxtəlif ştammlarının imkanları isə probiotik aktivliyi hədəfləyən və/və ya müxtəlif bioloji aktiv maddələrin istehsalçısı olan ştamların daimi monitorinqinin məqsədəuyğunluğunu müəyyən edir.

İşin məqsədi:

İzolyasiya olunmuş B. subtilis ştammlarının bioloji xassələrini öyrənmək və onların orijinal spor probiotikinin inkişafı üçün istifadə imkanlarını qiymətləndirmək.

Tədqiqat məqsədləri:

1. Təcrid olunmuş B. subtilis kulturalarının morfoloji, fizioloji-biokimyəvi, antaqonist, yapışdırıcı və digər xassələrini in vitro təcrübələrdə öyrənmək və sonrakı tədqiqatlar üçün ən perspektivli ştammı seçmək.

2. Seçilmiş B.subtilis ştammının probiotik aktivliyini in vivo təcrübələrdə qiymətləndirin.

3. Tədqiq olunan B.subtilis ştamının biokütləsinin toplanması üçün optimal olan qida mühiti seçin.

4. Saxlama zamanı seçilmiş B.subtilis ştammının canlılığını və antaqonist aktivliyini müəyyən edin.

5. Orijinal B. subtilis ştamının xassələrini və kommersiya probiotik preparatlarının istehsalı üçün istifadə edilən kulturaları müqayisə edin.

Elmi yenilik.

Təcrid olunmuş ştamların morfoloji, fizioloji-biokimyəvi, genetik və digər bioloji xassələrinin öyrənilməsi əsasında müxtəlif ştammların şərti patogen və patogen mikroorqanizmlərinə qarşı antaqonizm nümayiş etdirən plazmidsiz B. subtilis 1719 ştammı seçilmişdir. taksonomik qruplar, aşağı yapışdırıcı aktivliyə malik, gentamisin, polimiksin və eritromisinə davamlıdır.

İstehsal texnologiyasının yaradılmasına yanaşmalar, o cümlədən B. subtilis 1719 ştammının orijinal qida mühitlərində böyümə xüsusiyyətlərinin öyrənilməsi, yeni probiotik preparatın alınması mərhələləri kimi onun həyat qabiliyyətinin və antaqonist fəaliyyətinin stabilləşdirilməsi şərtlərinin öyrənilməsi təcrübi olaraq əsaslandırılmışdır.

İxtira üçün ərizə verilmişdir (19 aprel 2005-ci il tarixli № 2005111301): “Bacillus subtilis 1719 bakteriya ştammı patogen mikroorqanizmlərə, həmçinin proteolitik, amilolitik və lipolitik fermentlərə qarşı antaqonist aktiv biokütlə istehsalçısıdır”.

Praktik əhəmiyyəti.

İzolyasiya edilmiş və identifikasiya edilmiş B.subtilis 1719 ştammı GISC-nin Dövlət Mədəniyyətlər Kolleksiyasında saxlanmışdır. J.I.A. Taraseviç № 277 və orijinal bioterapevtik probiotik preparatının istehsalı üçün sənaye texnologiyasının inkişafı üçün tövsiyə edilə bilər.

Müdafiəyə təqdim edilən əsas müddəalar:

1. Müəyyən edilmiş üç bakterial kultura ştammı morfoloji, fizioloji, biokimyəvi və digər xüsusiyyətlərə görə B. subtilis növünə uyğundur. Onların tərkibində plazmidlər yoxdur, müxtəlif taksonomik qrupların fürsətçi və patogen bakteriyalarına qarşı antaqonist aktivdirlər, aşağı və ya orta səviyyədə yapışma qabiliyyətinə malikdirlər.

2. B.subtilis 1719 ştammı eksperimental disbiozda normal mikrofloranın kəmiyyət və keyfiyyət tərkibinin bərpası ilə fürsətçi və patogen mikroorqanizmlərin aradan qaldırılmasında özünü göstərən probiotik xüsusiyyətlərə malikdir və həmçinin makroorqanizmə immunomodulyator təsir göstərir.

3. Texnoloji xüsusiyyətlərinə əsasən B.subtilis 1719 ştammı orijinal probiotik preparatın yaradılmasına namizəd kimi tövsiyə oluna bilər.

ƏDƏBİYYAT İCARƏSİ

Dissertasiyanın yekunu “Mikrobiologiya” mövzusunda, Qataullin, Ayrat Qafuanoviç

1. Morfoloji və fizioloji-biokimyəvi xassələrə əsasən, təcrid olunmuş ştamlar B. subtilis kimi müəyyən edilmişdir. B. subtilis ştammlarının DNT preparatlarında heç bir plazmid aşkar edilməmişdir ki, bu da, görünür, antibiotik müqavimətinin xromosomal nəzarətini göstərir.

2. Ağ siçanlarda disbiozun modelindən istifadə etməklə, normal mikrofloranın keyfiyyət və kəmiyyət tərkibinin bərpası ilə fürsətçi və patogen mikroorqanizmlərin aradan qaldırılmasında özünü göstərən B.subtilis 1719 ştamının probiotik aktivliyi göstərilmişdir.

3. B.subtilis 1719 ştammının becərilməsi zamanı biokütlənin toplanması üçün optimal mühit karbohidrat mənbəyi kimi qlükoza və ya saxaroza əlavə edilən VK-2 mühitidir.

4. Müəyyən edilmişdir ki, B.subtilis 1719 ştammı saxaroza-jelatin stabilizatoru ilə liyofilləşmiş vəziyyətdə ən azı 4 il (müşahidə müddəti), 7%-li NaCl məhlulu ilə stabilləşdirilmiş maye formada - 2 canlılıq və antaqonist aktivliyi saxlayır. il, distillə edilmiş su və ya 10% qliserin məhlulu olduqda isə 1 il.

5. Antaqonist aktiv, aşağı yapışqanlı, probiotik və immunomodulyator aktivliyə malik olan B. subtilis 1719-un plazmidsiz, toksik olmayan ştammı GISC adına Dövlət Mədəniyyətlər Kolleksiyasında saxlanılır. J1.A. Taraseviç.

6. B.subtilis ştammı 1719 (277) bioloji xassələrinə və əsas texnoloji xüsusiyyətlərinə görə yeni probiotik preparatların hazırlanmasında istifadə üçün perspektivlidir.

NƏTİCƏ

Müasir biologiya və tibb elminin kəşfləri və nailiyyətləri yeni bioloji məhsulların - probiyotiklərin işlənib hazırlanmasına və praktikada tətbiqinə imkan verib. Bu dərmanlar canlı mikrob kulturlarına əsaslanır. Bu dərmanların terapevtik təsiri patogen və şərti olaraq patogen suşlara - patogenlərə qarşı açıq mikrob antaqonizminə əsaslanır. Müalicə prosesində probiyotiklərin immunomodulyator fəaliyyəti heç də az əhəmiyyət kəsb etmir. Canlı bakteriyalardan hazırlanan dərmanların kimyəvi yolla sintez edilən dərmanlara nisbətən danılmaz üstünlüyü onların zərərsizliyi, insan orqanizmi üçün fizioloji xüsusiyyətləri, allergik reaksiyaların olmamasıdır. Artıq probiyotiklər mədə-bağırsaq mikroflorasının korreksiyasında, metabolik pozğunluqlarda, antibakterial, kimyaterapiya, hormonal və radiasiya terapiyasının nəticələrinin müalicəsində aparıcı mövqeləri tutmuşlar. Bakterial translokasiya fenomeninin tədqiqi göstərdi ki, probiyotiklər müxtəlif cərrahi infeksiyaların qarşısının alınması və müalicəsində antibiotikləri və proteolitik fermentləri uğurla əvəz edə bilir.

Son onillikdə mədə-bağırsaq traktının xəstəliklərinin qarşısının alınması və müalicəsi üçün canlı mikrob kulturalarına əsaslanan bioloji məhsullardan geniş istifadə olunur. spor əmələ gətirən bakteriya

Metabolik proseslərin müxtəlifliyi, genetik və biokimyəvi dəyişkənlik, litik və həzm fermentlərinə qarşı müqavimət çöplərin təbabətin müxtəlif sahələrində istifadəsi üçün əsas rolunu oynamışdır. Bu mikroorqanizmlərin istehsalı asandır, saxlama zamanı sabitdir və ən əsası ekoloji cəhətdən təmizdir.

Ştammların bir sınaq mədəniyyətinə qarşı yüksək aktivliyi onun digərlərinə qarşı aktivliyinə zəmanət vermir. Bu baxımdan, spor probiotiklərinin istifadəsi xüsusi terapevtik məqsədlərlə məhdudlaşır. İrinli-septik xəstəliklərin nozoloji formalarının dəyişkənliyi və disbiotik pozğunluqların inkişafı üçün etioloji əhəmiyyətli mikroorqanizmlərin müxtəlifliyi istifadə olunan bioloji məhsula olan tələbləri müəyyən edir. Bu, tədqiqatçıları istənilən xüsusiyyətlərə malik olan antaqonist ştammları davamlı olaraq yoxlamağa təşviq edir.

Tədqiq etdiyimiz ştamlar B.subtilis nümayəndələrinə xas olan morfoloji və fizioloji-biokimyəvi xüsusiyyətlərə malik olub, müxtəlif substratları parçalayan fermentlər dəsti ilə səciyyələnirdi.

Ədəbiyyata görə, B.subtilis geniş spektrli patogen mikroorqanizmlərə qarşı açıq antaqonist xüsusiyyətlərə və yüksək fermentativ aktivliyə malikdir, bunun sayəsində həzm proseslərini normallaşdırır, həmçinin antitoksik və antiallergik təsir göstərir.

Tədqiq olunan B. subtilis ştammları geniş antaqonist aktivliyə, aşağı (B. subtilis No 1719) və ya orta (B. subtilis No 1594, B. subtilis No 1318) yapışma səviyyəsinə malik idi.

Beləliklə, tədqiq etdiyimiz suşlar yüksək probiotik aktivliyi ilə xarakterizə olunurdu. Lakin biokimyəvi xassələrin tədqiqi göstərdi ki, B.subtilis 1719 ştammı daha yüksək fermentativ aktivliyə (proteaza, amilaza, lipaz) malik olub, bu da tədqiq olunan substratların ən böyük hidroliz zonasında ifadə olunub. Bundan əlavə, B. subtilis 1719 ştammının aşağı səviyyədə yapışdırıcı fəaliyyəti və görünür, onun təbii antibiotik müqaviməti xromosom tərəfindən idarə olunan , bu mədəniyyətin daha da öyrənilməsinin perspektivli olduğu qənaətinə gəlməyə imkan verdi.

Fikrimizcə, Bacillus cinsinə əsaslanan dərmanların sənaye istehsalının genişləndirilməsi perspektivləri çox böyükdür.

Bacilli mədəniyyət mayesinə bir çox ferment ifraz etmək qabiliyyətinə malikdir. Onlar qida məhsullarının, yuyucu vasitələrin və biotibbi maddələrin istehsalında istifadə olunan proteolitik və amilolitik fermentlərin istehsalı üçün mühüm sənaye sahəsi kimi xidmət edirlər. Son onillikdə onların iştirakı ilə bir sıra yeni antibiotiklər, bakterial insektisidlər və digər bioloji aktiv maddələr əldə edilmişdir.

B. subtilis-in GRAS statusuna malik olmasına baxmayaraq, ədəbiyyatda B. subtilis-in bəzi suşlarında patogenlik faktorlarının olması barədə təcrid olunmuş məlumatlar mövcuddur. Göstərilir ki, bu daimi əlamət deyil, çünki yenidən toxum əkərkən yox olur. Bakteriyaların patogen xüsusiyyətlərinin plazmidlərin olması ilə əlaqəli olduğu irəli sürülür. Məsələn, Le N. və Anagnostopoulos S. tədqiq edilmiş 83 subyektdən B. subtilis-in 8 ştammından təcrid olunmuş plazmidlər. Plazmid DNT yalnız B. subtilis-in toksigen ştammlarının hüceyrələrində müəyyən edilmişdir və toksik olmayan eyni növün digər suşlarının hüceyrələrində aşkar edilməmişdir. Eliminasiyaedici maddələrin təsiri altında toksigen ştammlardan plazmidlərin çıxarılması kultura filtratlarının toksigen xüsusiyyətlərinin aradan qaldırılmasına səbəb olmuşdur. Bununla belə, plazmidlərin genetik rolu kifayət qədər öyrənilməmişdir.

Tədqiqatlarımızda tədqiq edilən üç B. subtilis ştammının təcrid olunmuş DNT preparatlarında heç bir plazmid tapılmadı.

İstiqanlı heyvanların orqanizminə basillərin təsirini tədqiq edən müəlliflər belə nəticəyə gəliblər ki, B. subtilis ştammları insanlar və heyvanlar üçün tamamilə zərərsizdir. Makroorqanizm üçün zərərsizliyini sübut edən eksperimental məlumatlar parenteral tətbiqdən sonra bir neçə gün ərzində B.subtilis-in bədəndən xaric edildiyini göstərir. Bu bitkilərin müalicəvi təsir mexanizmləri heyvanlarda tədqiq edilmişdir. Hazırda güman edilir ki, spor probiotiklərinin müalicəvi effekti amillər kompleksi ilə müəyyən edilir, o cümlədən: patogen və şərti patogen mikroorqanizmlərin böyüməsini boğan B. subtilis kulturaları tərəfindən bakteriosinlərin istehsalı; yüksək aktiv fermentlərin sintezi: proteazlar, ribonukleazlar, transaminazlar və s.; bakterial toksinləri neytrallaşdıran maddələrin istehsalı.

Siçanlarda seçilmiş ştamın xassələrinin tədqiqi göstərdi ki, o, avirulentdir və toksiklik və ya toksigenliyə malik deyil.

Probiyotiklərin makroorqanizmə müsbət təsirinin amilləri mikrob sintezinin müxtəlif məhsullarıdır: amin turşuları, polipeptid antibiotikləri, hidrolitik fermentlər və daha az əhəmiyyət kəsb edən bir sıra digər bioloji aktiv maddələr. Buna görə də, Bacillus cinsinə aid mikroorqanizmlər tərəfindən istehsal olunan qoruyucu maddələrin öyrənilməsi və təcrid edilməsi və onların əsasında biotibbi dərmanların yaradılması təcili ehtiyacdır.

Mədə-bağırsaq traktında, patogen və şərti olaraq patogen mikroorqanizmlərə münasibətdə əsasən seçici olan basillərin birbaşa antaqonist təsiri özünü göstərir. Eyni zamanda, onlar normal mikrofloranın nümayəndələrinə qarşı antaqonizmin olmaması ilə xarakterizə olunur.

Tədqiqatlarımızda, antibiotik doksisiklin qəbulu ilə törədilən eksperimental disbiozun korreksiyası zamanı B. subtilis 1719 kulturası bağırsaq mikroflorasının tərkibinin və sayının normallaşmasına, həmçinin bağırsaqlarda şərti patogen mikroorqanizmlərin aradan qaldırılmasına kömək etmişdir. parietal və luminal mikroflora.

Ədəbiyyatdan belə çıxır ki, Bacillus cinsinin sənaye ştammlarının eritrositlərə aşağı yapışma aktivliyi, bağırsaq epitel hüceyrələrinə isə zəif və ya orta dərəcədə yapışma indeksi var. B. subtilis 534 və ZN ştammları enterosit reseptorlarına, B. licheniformis ştammı - kolonositlərə, yəni daha çox adhezinlərə malikdir. Fərqli suşların müxtəlif bağırsaq hüceyrələrindəki reseptorlara adhezinləri olduğu görünür.

Onların fəaliyyəti bağırsaq lümenində baş verir və normal mikrofloranın nümayəndələrinə antaqonist təsir göstərmədən patogen mikroorqanizmlərə qarşı yönəldilir. Spor probiotikləri qəbul edərkən müxtəlif bağırsaq lokuslarında avtofloranın bərpası mümkünlüyü reallaşır və 3-5 gündən sonra laktobakteriyalar, bifidobakteriyalar, E.coli və s. sayı artır və sonra normal səviyyəyə qayıdır.

Mikroorqanizmlərin enterositlərə yapışması ilə bağlı apardığımız tədqiqatların nəticələri bağırsaq hüceyrələrinin yapışma qabiliyyətinin normal mikrofloranın kəmiyyət və keyfiyyət tərkibindən asılı olduğunu təsdiq etməyə daha çox imkan verir. Disbiotik şəraitdə şərti olaraq patogen və patogen mikroorqanizmlərin bağlandığı enterositlərin səthində reseptorlar açılır və disbioz düzəldildikdə bağırsaq normal mikroflora və onun səthinə yapışmağa qadir olan enterosit reseptorlarının sayı ilə kolonizasiya olunur. yerli mikroorqanizmlər azalır.

Məlumdur ki, normal mikroflora makroorqanizmin postnatal inkişafında immunitetin və spesifik qoruyucu reaksiyaların formalaşma mexanizmində mühüm tetikleyici rol oynayır.

İmmunitet reaksiyasının inkişafında mikrofloranın rolu onun universal immunomodulyator xüsusiyyətləri ilə bağlıdır, o cümlədən immunostimulyasiya və immunosupressiya. Müəyyən edilmişdir ki, bakterial lipopolisaxaridlər (LPS) Ig A immun cavabına immuntənzimləyici təsir göstərir və köməkçi maddələr rolunu oynayır. Mikroflora uyğunlaşma və qoruyucu mexanizmlər formalaşdıran qeyri-spesifik və spesifik immunoloji reaksiyalar kompleksinin inkişafını təmin edir.

Dərmanın antimikrob aktivliyi nə qədər yüksək olsa da, infeksion patoloji vəziyyətinin aradan qaldırılmasında həlledici rol oynayır. Antimikrobiyal xüsusiyyətlərə malik olan və immun reaksiyaları stimullaşdıran dərmanların yaradılması mühüm vəzifə kimi görünür. Buna görə də, çoxlu sayda tədqiqatlar probiotik dərmanların insan və heyvanların immun sisteminin müxtəlif hissələrinə təsirini öyrənmək məqsədi daşıyır.

Aerob çöplərin canlı kulturalarının tətbiqi, Nyukasl xəstəliyi virusu tərəfindən in vitro olaraq induksiya edilmiş serum interferon və interferonun in vivo istehsalını nəzərəçarpacaq dərəcədə stimullaşdırır.

Bir sıra tədqiqatlar göstərir ki, probiotik dərmanlar immunomodulyator təsir göstərir, patoloji ilə pozulmuş immun statusunu bərpa edir, endogen interferon istehsalını artırır, makrofaq hüceyrələrinin funksional fəaliyyətini artırır, qan leykositlərinin - monositlərin və neytrofillərin faqositik aktivliyini artırır.

Tədqiqatlarımız göstərdi ki, B. subtilis 1719 mədəniyyəti disbiozun korreksiyası zamanı neytrofillərin metabolik fəaliyyətini əhəmiyyətli dərəcədə dəyişdi və yerli mikrofloranın normal vəziyyətində neytrofillərin funksional fəaliyyətində dəyişikliklərə səbəb olmadı. Bundan əlavə, disbiozun TNF-a səviyyəsinin artması ilə müşayiət olunduğu aşkar edilmişdir ki, bu da makrofaqların, limfositlərin, həmçinin endotel və epitel hüceyrələrinin açıq faqositik, sitotoksik, yapışdırıcı fəaliyyətini göstərir. nazik bağırsaq.

Disbiozlu siçanlarda proinflamatuar sitokinin ifrazının artması, ehtimal ki, immunokompetent hüceyrələrin (T limfositlər, monositlər/makrofaqlar) aktivləşməsini əks etdirir. B.subtilis 1719* kulturasının təsiri ilə TNF-a istehsalının azalması müşahidə edilmişdir. Mədəniyyətin bütöv heyvanlara tətbiqi TNF-a istehsalı səviyyəsində dəyişikliklərə səbəb olmadı.

TNF-a-nın iltihabi reaksiyaların markeri olduğunu nəzərə alaraq, belə qənaətə gəlinib ki, probiotik heyvanlarda immunokompetent hüceyrələrin iltihabəleyhinə aktivliyinin artırılmasında mühüm rol oynayır.

B. subtilis 1719 ştammının təsiri altında sitokin istehsalının dinamikasını öyrənmək üçün aparılan tədqiqatlar göstərdi ki, kultura tətbiq edildikdən sonra ilk saatlarda IL-lp istisna olmaqla, sitokinlərin istehsalına heç bir təsir göstərmir, onların miqdarı tədricən toplanır. . Tədqiq olunan digər sitokinlərin (IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, IL-12, IFN-y) səviyyəsi 12 ilə 24 saat arasında əhəmiyyətli dərəcədə artmışdır.

Beləliklə, immun sisteminin hüceyrələrinin modulyasiyası və sitokin potensialının dəyişməsi B. subtilis 1719 mədəniyyətinin dysbiosisin korreksiyasına töhfə verdiyi mexanizmlərdən biri ola bilər.

Ölkəmizdə və xaricdə aparılan elmi tədqiqatların nəticələrinin təhlili bakterial biokütlədən və ya onların metabolitlərindən məhsul almaq üçün Bacillus cinsinin bakteriyalarının istifadəsinin miqyasını göstərir. Məlum üsullar becərmə Bacillus cinsinin bakteriyaları bir sıra bakterial və ferment preparatlarının istehsalı texnologiyası üçün əsasdır. .

Müxtəlif maye qida mühitlərində B. subtilis 1719 kulturasının böyümə xassələri öyrənilərkən müəyyən edilmişdir ki, biokütlənin maksimum yığılması üçün ştammın becərilməsi üçün ən adekvat substrat qlükoza və ya əlavə edilmiş BK-2 mühiti hesab edilə bilər. saxaroza

Hal-hazırda, mikroorqanizmlərin istehsal mədəniyyətlərini seçərkən və xarakterizə edərkən, əsasən bioloji xüsusiyyətlərin aşağıdakı göstəriciləri nəzərə alınır: antaqonist fəaliyyətin spektri və səviyyəsi, istehsal qabiliyyəti, yəni. bio* kütləni tez toplamaq qabiliyyəti, dondurulmuş qurumaya davamlılıq, saxlama zamanı canlılıq. İnsan sağlamlığı üçün istifadə edilən mikroorqanizmlərin təhlükəsizlik dərəcəsinin meyarlarına xüsusi diqqət yetirilir.

Həyat qabiliyyətini qiymətləndirmək üçün aparılan araşdırmalarda mikrob hüceyrələri B.subtilis 1719 maye stabilizatorların iştirakı ilə saxlandıqda müəyyən edilmişdir ki, optimal stabilizator 7%-li NaCl məhlulu olmuşdur ki, bu da ştamın həyat qabiliyyətini və antaqonist xassələrini 2 il saxlamağa imkan verir. Kulturanın xassələrini 1,5 il saxlamaq üçün 10%-li qliserin məhlulundan, 1 il distillə edilmiş sudan istifadə etmək olar və məlum olmuşdur ki, bu doldurucular B-nin antaqonist xassələrinə statistik əhəmiyyətli təsir göstərmir. subtilis 1719 ştammı. Qeyd etmək lazımdır ki, mühüm fakt B.subtilis 1719 ştamının maye stabilizatorlarda uzun müddət 36 ay müddətində S.sonnei və S.aureusa qarşı antaqonist fəaliyyəti saxlamaq qabiliyyətidir. (müşahidə dövrü).

Saxaroza-jelatin stabilizatoru ilə dondurulmuş qurutma B. subtilis ştammı 1719-un canlılığını və antaqonist fəaliyyətini 4 il ərzində (müşahidə müddəti) qoruyub saxlamışdır.

Hal-hazırda praktiki səhiyyədə məşhur probiotik preparatlardan geniş istifadə olunur: bakterisubtil, sporobakterin, biosporin, baktisporin, subalin, sereobiogen, enterogermin və s.

Aşağıdakı probiotik preparatların kommersiya kulturaları ilə antaqonist və yapışdırıcı fəaliyyət üçün B. subtilis ştammı 1719-un müqayisəli tədqiqi: Sporobakterin, Rusiya (B. subtilis 534), Cereobiogen, Çin (B. cereus DM423), Subtil, Vyetnam (B. cereus var) . vietnami), Baktisubtil, Fransa (B.cereus IP5832), Nutrolin, Hindistan (B.coagulans), təcrid olunmuş ştamın orijinal olduğunu və yeni probiotik preparatın alınması zamanı istehsal növü kimi tövsiyə oluna biləcəyini göstərdi.

Belə ki, fizioloji və biokimyəvi xassələri baxımından B. subtilis 1719 ştammı aydın fərqləndirilən fərdi xüsusiyyətlərə malikdir, onlar adına GİSC-nin mədəniyyət kolleksiyasına saxlanarkən mədəniyyət pasportuna daxil edilir. J.I.A. Taraseviç. Bundan əlavə, təcrid olunmuş B. subtilis ştammı 1719-un antaqonist fəaliyyət baxımından dominant mövqeyi onun əsasında probiotik preparatın hazırlanması üçün bu kulturadan istifadənin perspektivlərini göstərir.

Dissertasiya tədqiqatları üçün istinadların siyahısı Biologiya elmləri namizədi Qataullin, Ayrat Qafuanoviç, 2005

1. Ashmarin İ.P., Vorobyov A.A. Mikrobioloji tədqiqatlarda statistik üsullar. Medizd, 1962, 180 s.

2. Baibakov V.İ., Karıx T.L., Borukaeva L.A. s bağırsaq mikroflorasının normallaşması və ümumi vəziyyət Bifidobakteriya konsentratının təsiri altında olan JCR siçanları.//Antibiotiklər və kemoterapiya. 1997. - T. 42, No 3. - S. 20-24.

3. Baida G.E., Budarina Zh.I. Bacillus cereusun hemolizin II geninin ilkin quruluşu və təhlili // 2 Rev. dağlar elmi konf. deyirlər Alimlər Puşçinoda, 23-25 ​​aprel. 1997: Abstrakt. hesabat Puşçino. - 1997 - səh.45-46.

4. Baida G.E., Kuzmin N.P. Escherichia coli-yə klonlaşdırılmış Bacillus cereus-un HLY-III geni yeni məsamə əmələ gətirən hemolizini kodlaşdırır. konf. həsr olunmuş akademikin xatirəsinə A.A.Baeva: Məruzələrin tezisləri, Moskva, 20-22 may 1996. M. - 1996. - S. 108, 291.

5. Baranovski A.Yu., Kondrashina E.A. Disbakterioz və bağırsaq disbiozu // Sankt-Peterburq. "Piter". -2000. -209 səh.

6. Bakhanova E.M., Nikolaev S.M., Nikolaeva I.G., və başqaları Rast. resurslar. 2001. T. 37, yox. 1. səh 70-76. Pentaphylloides fruticosa tumurcuqlarından ekstraktın sulfadimetoksin və izoniazidin səbəb olduğu eksperimental bağırsaq disbiozunun gedişatına təsiri.

7. Belyavskaya V.A., Sorokulova İ.B., İliçev A.A. Rekombinant basillər əsasında immunopreparatların layihələndirilməsi perspektivləri // Biotexnologiyanın yeni istiqamətləri: Proc. dok. YI Konf. RF, 24-26 may 1994. Puşçino. -1994.-S. 68.

8. Belyavskaya V.A., Sorokulova İ.B., Masıçeva V.A. Rekombinant probiyotiklər: tibbdə və baytarlıqda istifadənin problemləri və perspektivləri // Disbakterioz və eubiotiklər: Ümumrusiya Elmi-Praktik Konfransının Abstraktları. M. - 1996. - S. 7.

9. Belyavskaya V.A., Cherdyntseva N.V., Bondarenko V.M. və başqaları istehsal olunan interferonun bioloji təsiri. rekombinant Subalin probiotik dərmanının bakteriyaları. Jurnal microbiol., 2003, No 2, s. 102-109.

10. Belyaev E.İ. Bağırsaq mikroflorasını normallaşdıran dərmanların yaxşılaşdırılması yolları / Rep. elmi məqalələr toplusu: “Normal və patoloji şəraitdə insan avtoflorası. Acı. - 1988. - S. 74-78.

11. Bilibin A.F. // Ter. tağ. -1967. No 11. - səh. 21-28.

12. Bilibin A.F. // Klin. Dərman. 1970. - No 2. - S. 7-12.

13. Birger M.O. Mikrobioloji və virusoloji müayinə üsullarına dair məlumat kitabçası. Mikroorqanizmlərin antibiotiklərə həssaslığının təyini. M.: Tibb, 1982. - S. 180.

14. Blinkova L.P., Semenov S.A., Butova L.G. s. Antaqonist fəaliyyət təzə təcrid olunub Bacillus cinsinin bakteriya suşları // ZhMEI. 1994. -N5.-S. 71-72.

15. Boyko N.V., Turyanitsa A.İ., Popoviç E.P., Vyunitskaya V.A. Bacillus subtilis kulturalarının Klebsiella / Microbiol cinsinin bakteriyalarına antaqonist təsiri. və. 1989. - T. 51, N 1. - S. 87-91.

16. Boyko N.V., Lisetska M.V. Rozrobka probutiyuv vib1rkovostn: Protiskle-romna efektivshst dyakikh suşları V. subtilis // Nauk. Vyun. Ujqor. un-tu. Ser. Buğa. 1997. - N 4. - S. 194-198.

17. Bondarenko V.M., Petrovskaya V.G. Yoluxucu prosesin inkişafının erkən mərhələləri və normal mikrofloranın ikili rolu // Rusiya Tibb Elmləri Akademiyasının bülleteni. -M.- 1997.-N3.-C. 7-10.

18. Bondarenko V.M., Chuprinina R.P., Aladisheva Zh.I., Matsulevich T.V. Probiyotiklər və onların terapevtik təsir mexanizmləri // Təcrübə. və paz, gastroenterol. 2004. No 3. S. 83-87.

19. Bochkareva N.G., Belogortsev Yu.A., Udalova E.V. və başqaları.Bacillus subtilis bakteriya ştammı b-qlükanaza ilə zənginləşdirilmiş hidrolitik fermentlər kompleksinin istehsalçısıdır // Pat. N 2046141 Rusiya, C12 N 9/42, Nəşr. 10.20.95. - Buğa. N 29.

20. Brilis V.I. Laktobasillərin yapışdırıcı xüsusiyyətləri // Abstrakt. dis. Ph.D. bal. Sci. Tartu. -1990. - 25 s.

21. Brilis V.I., Briline T.A., Lenzner H.P., Lenzner A.A. Laktobasillərin yapışdırıcı və hemaqlütinasiya xüsusiyyətləri. Jurnal Microbiol., 1982, 9: 7578.

22. Vasilyeva V.L., Tatskaya V.N., Reznik S.R. Laboratoriya heyvanlarında immun assit mayelərinin alınmasında bitki və mikrob adjuvantlarından istifadə təcrübəsi // Mzhrobyul. jurnal 1974. T. 36, N 3. - S. 358-360.

23. Vershigora A.E. İmmunologiyanın əsasları // Kiyev: Vişça məktəbi. 1975. - 319 s.

24. Vinnik Yu.S., Peryanova O.P., Yakimov S.V. et al., Antaqonistlərdən istifadə edərək irinli yaraların müalicəsi metodu / Beynəlxalq immunoreabilitasiya jurnalı. 1998. - N 4., s.143.

25. Vinoqradov E.Ya., Şiçkina V.P. Bakterial ştammı B. mucilaginosus buzovlarda qeyri-spesifik toxunulmazlığın biostimulyatorunun istehsalçısı kimi // A.S. 1210452, SSRİ -1/00. Nəşr. 04/27/96. - Buğa. N 12.

26. Vladimirov Yu.A., Şerstnev M.P. Elm və texnikanın nəticələri: Biofizika 1989; 24:172.

27. Vorobyov A.A., Abramov N.A., Bondarenko V.M., Şəndərov B.A. Disbakterioz tibbdə aktual problemdir // Tibb Elmləri Akademiyasının bülleteni. -1997. - № 3. -Səh.3-9.

28. Vorobyov A.A., Nesvijski Yu.V., Zudenkova A.E., Budanova E.V. Siçanlar üzərində aparılan təcrübələrdə yoğun bağırsağın parietal və lüminal mikroflorasının müqayisəli tədqiqi. Jurnal microbiol., 2001, 1: 62-67.

29. Vorobyov A.A., Nesvijski Yu.V., Lipnitski E.M. və başqaları İnsan bağırsağının parietal mikroflorasının öyrənilməsi. Jurnal microbiol., 2003, 1: 6063.

30. Vyunitskaya V.A., Boyko N.V., Spivak N.Ya., Qanova L.A./ Yeni mikrobiotiklərin bəzi təsir mexanizmləri // Bitkiçilik və yem istehsalının intensivləşdirilməsinin mikrobioloji və biotexnoloji əsasları: Referatlar toplusu Alma-Ata, 1990. - P. 17.

31. Qalayev Yu.V. Bakteriyaların patogen fermentləri // M.: Tibb. 1968. - 115 s.

32. Qonçarova G.İ., Semenova A.P., Lyannaya A.M. və başqaları. Bağırsaqda bifid floranın kəmiyyət səviyyəsi və onun insan sağlamlığı ilə korrelyativ əlaqəsi // İnsan və heyvanların antibiotikləri və mikroekologiyası. -1988.-S.118—123

33. Qorskaya E.M. Bağırsaqlarda mikroekoloji pozğunluqların inkişaf mexanizmləri və onların korreksiyasına yeni yanaşmalar.//Elmi formada dissertasiya.

34. Qraçeva N.M., Qonçarova G.İ. və başqaları.Bağırsaq infeksiyası olan xəstələrin müalicəsi praktikasında bakterial bioloji preparatların istifadəsi. Bağırsaq disbiozunun diaqnozu və müalicəsi. Təlimatlar. 1986, səh. 23

35. Qraçeva N.M., Qavrilov A.F., Avakov A.A. s. - Yeni dərmanlar. 1994, № 1, səh. 3-12

36. Qraçeva N.M., Qavrilov A.F., Solovyova A.İ. və başqaları.Kəskin bağırsaq infeksiyalarının müalicəsində yeni bakterial biosporin preparatının effektivliyi // Jurnal. mikrobiol. 1996. - N 1. - S. 75-77.

37. Grebneva A.J1., Myagkova L.P. Bağırsaq disbakteriozu // 3 cilddə qastroenterologiyaya bələdçi. M., 1996. -T.Z. -Səh.324-334

38. Qriqoryeva T.M., Kuznetsova N.İ., Şaqov E.M. Kolorado kartof böcəyinə qarşı xüsusi aktivliyə malik ekzotoksin sintez edən Bacillus thuringiensis 4KN ştammı // Biotexnologiya. 1994. - N 9-10. - S. 7-10.

39. Gulko M.A., Kazarinova JI.A., Pozdnyakova T.M. İnosin istehsal üsulu // Pat. N 175583, C12P 19/32. Nəşr. 08/30/94. - Buğa. N 16.

40. Demyanov A.V., Kotov A.Yu., Simbirtsev A.S., Klinik praktikada sitokin səviyyələrinin öyrənilməsinin diaqnostik dəyəri. Sitokinlər və İltihab jurnalı, 2003, cild 2, № 3, səh. 20-35

41. Eqorov N.S., Zarubina A.P., Vıbornıx S.N., Landau N.S. Bacillus cinsinin bakteriyalarının böyüməsi üçün sintetik * mühit // Moskva Dövlət Universitetinin bülleteni. 1989. N 4.1. S. 52.

42. Ermakova L.M., Smirnova T.A., Əlixanyan S.İ. et al., Proteinazların dəyişdirilmiş spektri ilə Bacillus subtilis mutantında kristal daxilolmalar // Dokl. SSRİ Elmlər Akademiyası. 1977. - T. 236, N 4. - S. 1001-1003.

43. Jirkov İ.N., Bratuxin İ.İ. Danalarda disbakteriozun korreksiyası üçün probiotik RAS-ın istifadəsi // Baytarlıq. 1999. N 4. - səh.40-42.

44. Zqonnik V.V., Furtat İ.M., Vasilevskaya İ.A. s. Antaqonist xassələri spor əmələ gətirən lizin istehsal prosesini çirkləndirən bakteriyalar // Microbiol. və. 1993. -T.55, N4. - səh.53-58.

45. Zinkin V.Yu. İnsan qanının neytrofilləri ilə fotometrik NBT testi və onun dayaq-hərəkət travması olan xəstələrdə klinik və immunoloji əhəmiyyəti. Müəllifin xülasəsi. dis. Ph.D. bal. Elmlər.- Moskva, 2004.

46. ​​Zudenkov A.E. Yoğun bağırsağın parietal musinin immunokompetent hüceyrələrinin mikroflorası və tərkibi normaldır və bəzi hallarda patoloji şərtlər. Müəllifin xülasəsi. dis. Ph.D. bal. Elmlər, Moskva, 2001.

47. İvanovski A.A., Heyvanlarda müxtəlif patologiyalar üçün yeni probiotik baktosellolaktin // Baytarlıq. 1996 - N11. - səh. 34-35.

48. İvanovski A.A., Vepreva N.S., Zimireva V.V., Lagunova O.P. Baytarlıq üçün probiyotiklərin istehsalı üsulu / RU Patent N 2084233, nəşr. 07.20.97. Buğa. N 20.

49. Kandybin N.V., Ermolova V.P., Smirnov O.V. Bakterokulisidin istifadəsinin nəticələri və perspektivləri // Sovrem. nailiyyət biotexnol.: Mater. 1 Konf. Şimali Qafqaz Region, Stavropol, sentyabr. 1995. Stavropol. – 1995. – səh.14-15.

50. Kaşirskaya N.Yu. Bağırsaq mikroflorasının tənzimlənməsində probiotiklərin və prebiyotiklərin əhəmiyyəti.//Russian Medical Journal. 2000. - T. 8, No 13-14. - səh.572-575.

51. Kovalçuk L.V., Gankovskaya L.V., Rubakova E.İ. Sitokin sistemi. M., 2000.

52. Kozaçko İ.A., Vyunitskaya V.A., Berejnizkaya T.G. və başqaları.4 Bacillus cinsinin bakteriyaları bitkiləri xəstəliklərdən qoruyan bioloji vasitələrin yaradılması üçün perspektivli məhsullardır // Mshrobyul. və. - 1995.- T.57, N 5. - S. 69-78.

53. Krasnoqolovets V.N. Bağırsaq disbiozu. M., 1979. -198 s.

54. Kudryavtsev V.A., Safronova J.I.A., Osadçaya A.İ. və başqaları Bacillus subtilis-in canlı kulturalarının orqanizmin qeyri-spesifik müqavimətinə təsiri // Microbiol. və. 1996 - T.58, N 2. - S. 46-53.

55. Kuznetsova N.İ., Smirnova T.A., Şamşina T.N. və başqaları Ev milçəkləri üçün zəhərli olan Bacillus thuringiensis ştammı // Biotexnologiya. 1995. -N3-4.-S. 11-14.

56. Lapçinskaya A.V., Şəndərov B.A. Sefaleksin və bəzi immunomodulyatorların yaratdığı disbakteriozun korreksiyası.//Mikrob ekologiyasının tibbi aspektləri. M., 1991. -S.70—79

57. Lenzner A.A., Lenzner H.T., Michelsaar M.E. və b. Laktoflora və kolonizasiya müqaviməti.//Antibiotiklər və bal. biotexnologiya. -1987. -32. - № 3. -İLƏ. 173-180.

58. Leşçenko V.M. Viseral kandidozun klinikası, diaqnostikası və müalicəsi. Təlimatlar. M., 19871.

59. Lisetska M.V. Bacillus subtilis strain1b və Klebsiella rhinoscleromatisin antaqonist fəaliyyətinin eksperimental tədqiqi // Nauk. Vyun. Ujqor. un-tu. Ser. Buğa. 1997. - N 4. - S. 207-212

60. Lopatina T.K. və b. Eubiotik dərmanların immunomodulyator təsiri* // Rusiya Tibb Elmləri Akademiyasının bülleteni. M., “Tibb”. -1997. № 3. -Səh.30-34

61. Lukin A.A. Plazmid və plazmidsiz mikroorqanizmlərdə antibiotiklərin əmələ gəlməsi və sporulyasiyası // Puşçino. 1978. - s.25-28.

62. Mazankova JI.H., Mixaylova N.A., Kurokhtina İ.S. və başqaları Baktisporin yeni probiotik uşaqlarda kəskin bağırsaq infeksiyalarının müalicəsi üçün // İnsan və Tibb: Proc. hesabat V Rusiya Milli Konqresi, Moskva, 8-12 aprel 1997-ci il - M. - S. 199.

63. Mazankova L.N., Vaulina O.V. Disbiotik pozğunluqların korreksiyası üçün yeni dərmanlar.//Uşaq həkimi. 2000. № 3. - S. 51-53.

64. Maniatis T., French E., Sambrook J. Methods of Genetic Engineering. Molekulyar klonlama, 1984.

65. Markov İ.İ., Jdanov İ.P., Markov A.İ. Mycobacterium tuberculosis-in MZh-6 antaqonisti Bacillus subtilis ştammı // Pat. N 2120992, C 12N 1/20. - Nəşr. 10.27.98.-Bul.N30.

68. Miksiş N.İ., Şevçenko O.V., Eremin S.A. və başqaları, Bacillus anthracis suşlarının populyasiya heterojenliyi II Dep. VINITI-də 06/04/98. Saratov. -1998.-7 s.

69. Mitroxin S.D. // Antibiotiklər və kimyaterapiya. 1991. - No 8. - S.46 - 50.

70. Mitroxin S.D. Yoğun bağırsaq disbiozunun müalicəsinin ekspress diaqnostikasında və monitorinqində normal insan mikroflorasının metabolitləri: Dissertasiyanın xülasəsi. Dr. med. Elmlər, M., 1998. 37 s.

71. Mitroxin S.D., Ardatskaya M.D., Nikuşkin E.V., İvanikov İ.O. və başqaları - M., 1997. 45 s. Daxili xəstəliklər klinikasında bağırsaq disbakteriozunun (dysbiosis) kompleks diaqnostikası, müalicəsi və profilaktikası (Təlimat).

72. Mitrokhin S.D., Shenderov B.A. Mikrobioloji və biokimyəvi parametrlər rifampisinin təsiri altında siçovul kolonunun mikrob ekologiyasında dəyişikliklər. Antibiotiklər və kemoterapiya - 1999, T. 34 No 6 (482-4).

73. Molçanov O.J.L., Poznyak A.Jİ. Bakterial vaginozun kompleks müalicəsində biosporinin istifadəsi // Proc. Dokl: Yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikası və müalicəsi üçün müasir texnologiyalar. St. P. - 1999, səh. 187.

74. Muzychenko JI.A., Senatorova V.N., Alkhovskaya JI.JI. və başqaları Mikroorqanizmlərin inkişafının morfometrik analizi / Biotexnologiya. 1990. - N 3. - S. 3-6.

75. Müller G., Litz P., Munch G. Qida məhsullarının mikrobiologiyası bitki mənşəli// M.:B.İ..- 1977.- S.343 347

76. Nikitenko V.İ. İltihabın qarşısının alınması və müalicəsi üçün bakterial dərman. yandırıcı proseslər və allergik xəstəliklər// Beynəlxalq tətbiq. N 89/09607, WO, nəşr. 19.10.1989.

77. Nikitenko V.İ. Dərman əvəzinə bakteriya // SSRİ-də elm. - 1991. - N 4. -S. 116-121.

78. Nikitenko V.İ. Diatez, disbakterioz və bakterial infeksiyaların müalicəsi üçün nəzərdə tutulmuş süd məhsulu əldə etmək üçün istifadə edilən Bacillus subtilis bakteriyalarının ştammı // A.S. N 1648975, S.U. 15.05. 91.

79. Nikitenko V.İ., Nikitenko İ.K. Heyvanlarda bakterial infeksiyalara qarşı terapevtik və profilaktik preparatın istehsalı üçün istifadə edilən Bacillus pulvifaciens bakteriya ştammı // A.S. N 1723117, S.U. nəşr. 12. 1992.

80. Nikitenko V.İ., Nikitenko İ.K. İltihab əleyhinə proseslərin və allergik xəstəliklərin qarşısının alınması və müalicəsi üçün dərman əldə etmək üçün istifadə olunan Bacillus subtilis bakteriyalarının bir ştammı // A.S. N 1723116, S.U. nəşr. 12. 1992.

81. Nikitenko L.İ., Nikitenko V.İ. Bakterial ştam Bacillus sp. disbakterioz və allergiyaya qarşı terapevtik və profilaktik dərman komponenti // A.S. N 1710575, S.U. - pub. 5. 1992.

82. Nikitenko V.İ., Qorbunova N.N., Jiqailov A.V. Sporobakterin disbakterioz və irinli-iltihabi proseslərin müalicəsi üçün yeni bir dərmandır // Disbakterioz və eubiotiklər: Ümumrusiya hesabatlarının xülasəsi. elmi-praktik konf. -M.- 1996.-S. 26.

83. Nikolicheva T.A., Tarakanov B.V., Golinkevich E.K., Komkova E.E. Bacillus micilaginosis pəhrizə daxil edildikdə donuz balalarının həzm sisteminin biosenozunda dəyişikliklər // Bülleten. Ümumrusiya Tədqiqat Fizika, Biokimya və Qidalanma İnstitutu kənd təsərrüfatı heyvanları. 1989.-N 2. - S. 31-35.

84. Obuxova O.V., Soboleva N.N. Saprofit spor bakteriyalarının mədəniyyətlərində paylama amilinin olması haqqında // Jurnal. mikrobiol. 1950. - N 12. S. 482-485.

85. Mikroorqanizmlərin antibakterial preparatlara həssaslığının təyini. Metodoloji tövsiyələr MUK 4.2.1980-04, 2004.

86. Osadçaya A.İ., Kudryavtsev V.A., Safronova JI.A. Orta turşuluğun və temperaturun dərinlikdə Bacillus subtilis polisaxaridlərinin böyüməsi və ifrazına təsiri becərmə// Misrobyul. jurnal 1998. - T. 60., N 4. - S. 25-32.

87. Osipova İ.G. Kolibakterin və spor eubiotiklərinin qoruyucu təsir mexanizminin bəzi aspektləri və onlara nəzarətin yeni üsulları // Müəllif referatı. Biologiya üzrə namizədlik dissertasiyası - M., 1997. - 25 s.

88. Osipova İ.G., Sorokulova İ.B., Tereşkina N.V., Qriqoryeva Jİ.B. Bəzi probiyotiklərin əsasını təşkil edən Bacillus cinsinin bakteriyalarının təhlükəsizliyinin öyrənilməsi // Jurnal. mikrobiol. 1998. - N 6. - S. 68-70.

89. Osipova İ.Q., Mixaylova N.A., Sorokulova İ.Q., Vasilyeva E.A., Qayderov A.A. Spor probiyotikləri. Jurnal mikrobiol. - 2003. № 3. ilə. 113-119.

90. Osterman L.D. Zülalların və nuklein turşularının öyrənilməsi üsulları. 1981.

91. Panin A.N., Serıx N.İ., Malik E.V. və başqaları Donuzlarda probiotik terapiyanın effektivliyinin artırılması / Baytarlıq, 1996. - N 3. - S. 17.

92. Panchishina M.V., Oleinik S.F. Bağırsaq disbiozu. Kiyev, 1983

93. Parşina S.N., İmşenetski A.A., Nesterova N.G. və başqaları.Bacillus segesh bakteriya ştammı trombolitik təsirli proteolitik fermentlərin istehsalçısıdır // A. C. N 1615177, C 12N 1/20. Nəşr 12/23/90. - Bülleteni N 4. 1988.

94. Perth S.D. Əsasları becərmə mikroorqanizmlər və hüceyrələr. M.Mir, 1978, 332 s.

95. Petrov L.N., Verbitskaya N.B., Vaxitov T.Ya. İnsan endoekologiyası haqqında fikirlərə əsaslanan disbiozun müalicəsi və qarşısının alınması üçün dərmanların dizaynı // Rus. və. HİV/QİÇS və əlaqəli problem 1997.- T. 1, N 1. S. 161-162.

96. Petrovskaya V.G., Marko O.P. Normal və patoloji şəraitdə insan mikroflorası. M .: Tibb. -1976. -217 C.

97. Poberiy İ.A., Xareçko A.T., Sadovoy N.V., Litusov N.V. Uşaqlar və böyüklər üçün yeni kompleks eubiotik “biosporin” / Başqırdıstanın Səhiyyəsi. 1998. -N 1. - S. 97-99.

98. Poqosyan G.P., Nadirova A.B., Kaliyev A.B., Karabayev M.K. Plazmid pCLl və Bacillus sp.-nin antimikrobiyal fəaliyyəti. 62 II Molekulyar genetika, mikrobiol. və virusologiya. 1999. - N 1. - S. 37-38.

99. Podbereznıy V.V., Parikov V.A. Simbiont bakteriyaların becərilməsi üçün vasitə Bacillus pulvifaciens və ya Bacillus subtilis - probiotik istehsalçısı // RU Patent No. 2100029, nəşr. 27/12/97. 36 nömrəli bülleten.

100. Podberezny V.V., Polyantsev N.I., Ropaeva L.V. Becərmə pendir zərdabında Bacillus subtilis-in istehsal suşları // Baytarlıq Elmi. - 1996.-N 1.-S. 21-29.

101. Podopriqora G.I. Kolonizasiya müqavimətinin immun və qeyri-spesifik mexanizmləri.//Antibiotiklər və kolonizasiya müqaviməti/Ümumrusiya Elmi-Tədqiqat Antibiotiklər İnstitutunun yığınları.- M. -1990. - buraxılış X1X. -İLƏ. 15-25.

102. Polxovski V.A., Bulanov P.A. HAQQINDA dekarboksilazalar Bacillus cereusdakı amin turşuları //Mikrobiologiya. 1968. - T. 37, N 4. - S. 600-604.

103. Pospelova V.V., Qraçeva N.M., Antonova L.V. və başqaları Bioloji mikrob preparatları, onların dozaj formaları və tətbiq sahələri //Yeni dərmanlar: Ekspress məlumat. -1990. -Cild. 5. - səh. 1-8.

104. Pospelova V.V., Rəhimova N.Q., Xaleneva M.P. və başqaları.İnsan orqanizminin bakteriosenozunun korreksiyası üçün mikrob bioloji məhsulların tətbiqinin yeni sahələri.//İmmunobiol. narkotik. M. -1989. -İLƏ. 142-152.

105. Reznik S.R. Heyvanların viral və bakterial xəstəliklərinin müalicəsi və qarşısının alınması üsulu // SU, A.s. N 1311243, nəşr. 1982.

106. Reznik S.R., Sorokulova İ.B., Vyunitskaya V.A. və başqaları Profilaktik bioloji məhsul sporolakt // Patent N 2035186. RU. - A 61 K 35/66, nəşr. 05/20/95, bülleten. N 14.

107. Reznik S.R., Şust İ.İ. Bakteriya-SL preparatı verildikdə buzovların hematoloji və sitokimyəvi parametrləri // Kənd təsərrüfatı heyvanlarının biokimyası və qida proqramı: Proc. hesabat Ümumittifaq simpozium -Kiyev, 1989. S. 25.

108. Reshedko G.K., Stetsyuk O.U. Disk-diffuziya üsulu ilə mikroorqanizmlərin həssaslığının təyin edilməsi xüsusiyyətləri. Müasir üsullar klinik mikrobiologiya, məsələ 1. Smolensk, 2003.

109. Ryapis Jİ.A., Lipnitski A.V. Bakterial patogenliyin mikrobioloji və populyasiya genetik aspektləri // Jurnal. mikrobiol. 1998. - N 6. S. 109-112.

110. Savitskaya K.İ. Mədə-bağırsaq traktının mikroekologiyasının pozulması və xroniki bağırsaq xəstəlikləri // Terra medica. - 1998. N 2. - səh.13-15.

111. Sveçnikova E.B., Maksyutova L.F., Xunafin S.N. et al., Termal zədələnmiş uşaqların kompleks müalicəsində baktisporindən istifadə təcrübəsi // Proc. Dokl: Yoluxucu xəstəliklərin diaqnostikası və müalicəsi üçün müasir texnologiyalar. St. P. - 1999 - S. 268.

112. Sinev M.A., Budarina Zh.İ., Gavrilenko İ.V. və başqaları, Bacillus cereus hemolizin II-nin mövcudluğunun sübutu: hemolizin II-nin genetik determinantının klonlanması // Molek. biol. 1993. - T. 27, N 6. - S. 1218-1229.

113. Slabospitskaya A.T., Krımovskaya S.S., Reznik S.R. Bioloji məhsullara daxil olmaq üçün perspektivli olan basillərin fermentativ fəaliyyəti // Microbiol. və. 1990. - N2. - S. 9-14.

114. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaya İ.A. Spor əmələ gətirən aerob bakteriyalar bioloji aktiv maddələrin istehsalçılarıdır. - Kiyev, 1982 - 280 s.

115. Smirnov V.V. Bacillus cinsinin bakteriyalarının insan orqanizmindən və heyvanlardan təcrid edilməsi və identifikasiyası üçün metodiki tövsiyələr // Kiyev, 1983. -49 s.

116. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vasilevskaya İ.A. Spora yaradan aerob bakteriyalar - bioloji aktiv maddələrin istehsalçıları // Kiyev. Naukova Duma.- 1983.- 278 s.

117. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova İ.B. və başqaları.Asimptomatik bakteriemiyanın baş verməsinin bəzi mexanizmləri haqqında // Microbiol. jurnal 1988 - T. 50, N6.-S. 56-59.

118. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova İ.B. s irinli-septik müalicə üsulu doğuşdan sonrakı xəstəliklər canlı mədəniyyətlərin dayandırılması // A. s. N 1398868 S.U. - A 61 K 35/74. - pub. 05/30/88, bülleten. N 20.

119. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova İ.B. və başqaları İnsan mədə-bağırsaq xəstəliklərinin qarşısının alınması və müalicəsi üçün biosporin preparatı // A. s. N 1722502. S.U. - A 61 K. 39/02, nəşr. 03/30/92.

120. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova I.B., Vyunitskaya V.A. İstiqanlı heyvanların mikroflorasının korreksiyası üçün bakterial preparatların yaradılması və istifadəsinin mübahisəli məsələləri // Microbiol. jurnal 1992. - T.54, N 6.- S. 82-92.

121. Smirnov V.V., Reznik S.R., Vyunitskaya V.A. və başqaları Bacillus II Microbiol cinsinin bakteriyalarından olan probiotiklərin müalicəvi və profilaktik təsir mexanizmləri haqqında müasir fikirlər. jurnal - 1993. - 55, - No 4. S. 92—112

122. Smirnov V.V., Osadçaya A.İ., Kudryavtsev V.A., Safronova JI.A. Artım və sporulyasiya Bacillus subtilis in müxtəlif şərtlər aerasiya // Mikrobiol. jurnal 1993. - T. 55, N 3. - S. 38-44.

123. Smirnov V.V., Reznik S.R., Sorokulova İ.B. və başqaları Profilaktik bioloji məhsul subalin // Patent N 2035185, RU. A 61 K 35/66, nəşr. 05/20/95, bülleten. N 14.

124. Smirnov V.V., Sorokulova İ.B., Osipova İ.Q. Yoluxucu xəstəliklərin qarşısının alınması və müalicəsi üçün bioloji məhsul subtikol // Patent N 2129432. -A. 61 K 35/74. - Buğa. N 12, nəşriyyat. 04/27/99.

125. Smirnov V.V., Reva O.N., Vyunitskaya V.A. Probiyotiklərin layihələndirilməsində basillərin antaqonist təsirinin riyazi modelinin yaradılması və praktiki tətbiqi // Mshrobyulopchnyi zhurn. 1995. -T. 64, N 5. -S. 661-667.

126. Smirnov V.V., Kosyuk İ.V. Bacillus cinsinin bakteriyalarının yapışdırıcı xüsusiyyətləri - drobiotikin komponentləri // Mshrobyulopchnyi jurnalı. 1997. - T. 69, N 6. - S. 36-43.

127. Sorokulova İ.B. Yeni bioloji məhsulların dizaynı üçün Bacillus cinsinin bakteriyalarının istifadəsi perspektivləri // Antibiotiklər və kemoterapi. -1996. T.41, N 10. - səh.13-15.

128. Sorokulova İ.B. Basillərə əsaslanan bio-sporin və digər kommersiya preparatlarının bioloji xüsusiyyətlərinin müqayisəli tədqiqi // Mshrobyu-lopchny jurnalı. 1997. - T. 69, N 6. - S. 43-49.

129. Sorokulova İ.B. Bacilli probiyotiklərin makrofaqların funksional fəaliyyətinə təsiri / Antibiotiklər və kimyaterapiya. 1998. - T. 43, N 2. - S. 20-23.

130. Storozhuk P.G., Bykov İ.M., Storozhuk A.P. Bədənin immun çatışmazlığı vəziyyətlərində protein qidalanması və ferment əvəzedici terapiyanın patogenetik istiqaməti // İmmunoreabilitasiya üzrə Beynəlxalq jurnal. 1998. - N 10., səh. 110-115.

131. Tabolin V.A., Belmer S.V., Qasilina T.V. və s. Rasional terapiya uşaqlarda bağırsaq disbiozu. Təlimatlar. M., 1998. -11 s.

132. Topçı M.P. Bacillus subtilis-in canlı kulturalarından danalarda disbakterioz zamanı preparatların istifadəsi: Dissertasiyanın xülasəsi. dis. Ph.D. biol. Sci. Minsk, 1997. -21 s.

133. Trişina N.V. Bağırsaq disbiyozunun inkişafı ilə antiendotoksin toxunulmazlığının vəziyyəti arasında əlaqə. Müəllifin xülasəsi. dis. Ph.D. bal. Sci. -Moskva, 2003., 24 s.

134. Müəllim İ.Ya. İmmunitet sistemindəki makrofaglar. M 1978; 175.).

135. Fazılova A.A. Gənc uşaqlarda bağırsaq disbiozu üçün sporobakterin və bakterisporinin istifadəsinin klinik və immunoloji əsaslandırması // Müəllif. bacarmaq. dis. Ufa. - 1998. - 24 s.

136. Harvud K. Bacillus. Genetika və biotexnologiya. M., 1992. - S. 52.

137. Xarçenko S.N., Reznik S.R., Litvin V.P. Yem kalıbı ilə mübarizə üsulu // A.S. N 751382, SSRİ, nəşr. B.İ.-də, 1980, No 28.

138. Xmel İ.A., Çernin L.S., Levanova N.B. və başqaları.Fitopatogen mikroorqanizmlərə qarşı dərman əldə etmək üçün Bacillus pumilus bakteriyalarının ştammı // Patent 1817875 Rusiya F01N 63/00, C12N 1/20. nəşr. 05.20.95. - Buğa. N 14.

139. Çernyakova V.İ., Bereza N.M., Selezneva S.I. Qeyri-spesifik xoralı kolitdə biosporin preparatının bakterioloji və immunoloji effektivliyi // Mikrobiol.zh. 1993. - T. 55, N 3. - S. 63-67.

140. Çxaidze İ.Q., V.Q. Likhoded və başqaları Eksperimental disbakteriozda antikorların korreksiyaedici təsiri // Jurnal. Mikrobiol. 1998, № 4: 12-14.

141. Sharp R., Skaven M., Atkinson T. Bacillus: Genetika və biotexnologiya. -M. 1992. - 398 s.

142. Şeveleva S.A. Probiyotiklər, prebiyotiklər və probiyotiklər. Məsələnin hazırkı vəziyyəti // Qidalanma məsələləri. -1999. -T.68. - № 2. -Səh.32

143. Şəndərov B. A. Tibbi mikrob ekologiyası və funksional qidalanma.- M., 1998, T. İ, S. 287.

144. Şəndərov B.A. Kolonizasiya müqaviməti və kemoterapevtik və antibakterial preparatlar // Antibiotiklər və kolonizasiya müqaviməti: Ümumrusiya Antibiotiklər Elmi-Tədqiqat İnstitutunun materialları. M. -1990. - buraxılış X1X. -Səh.5-16.

145. Şəndərov B.A., Manvelova M.A., Stepançuk Yu.B., Skiba N.E. Probiyotiklər və funksional qidalanma // Antibiotiklər və kemoterapi. 1997. - T. 42, N 7. - S. 30-34.

146. Şəndərov B.A.Tibbi mikrob ekologiyası və funksional qidalanma.-M., 1998, T. II, S. 413.

147. Yampolskaya T.A., Velikjanina G.A., Jdanova N.İ. L-fenilalanin istehsal edən Bacillus subtilis bakteriya ştammı: A.s. N 1693056, C 12 R 13/22, nəşr. 23.11.91. Buğa. N 43.

148. Adami A., Sandrucci A., Cavazzoni V. Əlavə olaraq probiotik Bacillus coagulans ilə doğuşdan qidalanan pigletlər: Zootexniki və mikrobioloji aspektlər // Ann. mikrobiol. ed enzimol. 1997. - V. 47, N 1. - S. 139-149.

149. Azuma I., Sugimura C., Iton S. Bakterial glikolipidlərin adjuvant fəaliyyəti // Yapon. J. Mikrobiol. 1977. - V. 20, N 5. - S. 465-468.

150. Benedettini J. et al. Bacillus subtilis sporları ilə immunomodulyasiya // Boll. 1-ci, Sierote Milan. 1983.-V. 62.,N6.-S. 509-516.

151. Berkel H., Hadlok R. Lecithinase-und Toxinbildung durch Stamme der Gat-tung Bacillus // Lebensmittelhygiene. 1976. - V. 27, N 2. - s. 63-65.

152. Bernheimer A., ​​Avigad L. Bacillus subtilis tərəfindən istehsal olunan sitolitik agentin təbiəti və xüsusiyyətləri // J. Gen. Mikrob.- 1970. V. 61, N 2. - S. 361-369.

153. Blaznic J, Kumel I.M., Salamum B. et al. Sdravljenje kronikne qranulomotozne bolezni z acidofilnem mlecom // Zdrav.Vesth. 1976. N 45. - S. 77-79.

154. Boer A.S., Priest F., Diderichsen B. Bacillus licheniformis-in sənaye istifadəsi haqqında: Bir baxış // Appl. Mikrobiol və Biotexnol. 1994. - V. 40, N 5. - S. 595-598.

155. Buchell M.E., Smith J., Lynch H.C. Partiya və siklik qidalanan partiya mədəniyyətində eritromisin istehsalına nəzarət üçün fizioloji model // Mikrobiologiya. -1997. V. 143, N 2. - S. 475-480.

156. Cipradi G. et al. Qida allergiyası üçün Bacillus subtilis ilə köməkçi müalicənin təsiri // Kimyaterapiya. -1986. 5, N6. -Səh.408-410

157. Kromvik A.M., Birrer G.A., Qross R.A. Nəzarət olunan partiya fermentor mədəniyyətlərində bacillus licheniformis tərəfindən y-poly (qlutamik turşu) əmələ gəlməsinə pH və aerasiyanın təsiri // Biotexnol. və Bioeng. 1996. - V. 50, N 2. - S. 222-227.

158. Danchin A., Glasser P., Kunst F. et al. Bacillus subtilis devoile ses genləri // Biofutur. 1998. - N 174. - S. 14-17.

159. Devin K.M. Bacillus subtilis genomu layihəsi: Məqsədlər və tərəqqi // Trends Biotechnol. 1995. - V. 13, N 6. - S. 210-216.

160. Donovan W.P., Rupar M.J., Slanei A.C. Bacillus thuringiensis kritik, koleopteran həzrətləri üçün zəhərli protein // Patent N 5378625 USA A61K 31/00. Nəşr. 01/03/95.

161. Dubos R. Camaşırxana məhsullarında istifadə olunan fermentlərdə toksik amillər // Elm. 1971. - N 3993. - S. 259-260.

162. Edlund C., Nord C.E. Xinolonların bağırsaq ekologiyasına təsiri. Narkotiklər, 1998, 58(2): 65-70.

163. Flindt M. Tərkibində proteolitik ferment olan Bacillus subtilis törəmələrinin inhalyasiyası nəticəsində yaranan ağciyər xəstəliyi // Lancet.- 1969. V. 1, N 7607. - S. 1177-1181.

164. Fox M. Prokaryotların filogeniyası // Elm. -1980. V. 209, N 4455. S. 457-463.

165. Fuller R.J Appl Bacteriol 1989; 66:5:365-378.

166. Gastro G.R., Ferrero M.A., Abate C.M. və b. Partiya və davamlı mədəniyyətdə Bacillus subtilis Mir-5 tərəfindən alfa və beta amilazaların eyni vaxtda istehsalı // Biotexnol. Lett. 1992. - V. 14, N 1. - S. 49-54.

167. Glatz B.A., Spira W.M., Goepfert J.M. Bacillus cereus və əlaqəli növlərin mədəniyyət filtratları ilə dovşanlarda damar keçiriciliyinin dəyişdirilməsi // İnfeksiya və İmmunol. 1974. V. 10, N 2. - S. 299-303.

168. Guida V., Guida R. Importansia dos Bacillos esporulados aerobios em gastroenterologia və nutricao // Rev. Braziliya. med. 1978. - V. 35, N 12. - S. 702707.

169. Haenel H., Bükülmə J. Sağlamlıq və xəstəlikdə bağırsaq florası // Progr. Qida və Qidalanma elm.- 1975.-V. 21, N l.-P. 64.

170. Himanen J.-P., Pyhala L., Olander R.-M. və b. Bacillus subtilis 168-in lipo-teixoik turşusu və peptidoqlikan teixoik turşusunun bioloji aktivliyi // J. Gen. Mikrobiol. - 1993.-V. 139, N 11.-Səh. 2659-2665.

171. Hirano Y., Matsudo M., Kameyama T. Aktinomisin D / J. Əsas Mikrobiolun iştirakı ilə Bacillus subtilis 168-in erkən cücərməsi zamanı sintez edilən zülalların iki ölçülü poliakrilamid gel elektroforezi. 1991. - V. 31, N 6. - S. 429-436.

172. Humbert Florence Les probiotigues: un sujet d" actualite // Bull. inf. Stat. exp. auicult. Ploufragan. 1988. - V. 28, No. 3. - S. 128-130.

173. Inouye S., Kondo S. Amicoumacin və SF-2370, mikrobiol mənşəli farmakoloji aktiv maddələr // Novel Microbial Prod. Med. və Agr. Amsterdam. -1989.-S. 179-193.

174. Johnson S. E. Bacillus cereusun öldürücü toksini 1. Toksinin, hemolizin və fosfolipazanın əlaqələri və təbiəti // J. Bakterid. 1967. V. 94, N 2. - S. 306316.

175. Kakinuma A., Hori M., Isono M. Surfaktində yağ turşusunun təyini və surfaktinin ümumi strukturunun aydınlaşdırılması // Aqric. və Biol. Kimya. 1969. - V. 33. - S. 973-976.

176. Kaneko J., Matsushima H. ​​Bacillus subtilis 168-in sporulyasiya hüceyrələrində kristal kimi quruluş // J. Elektron. Mikrosk.- 1973. V. 22, N 2. - S. 217-219.

177. Kaneko J., Matsushima H. ​​Sporlaşdıran Bacillus subtilis hüceyrələrində kristal daxilolmalar // In: Sporlar YI. seçin. Pap. 6th Int. Spore Konf. Vaşinqton. - 1975. -S. 580-585.

178. Kitazawa H, Nomura M, Itoh T. J Dairy Sci 1991; 74:7:2082 2088.

179. Kubo Kazuhiro. Bacillus subtilis FERM BP-3418-in təmiz mədəniyyəti // Pat. N 5364738. ABŞ. MKI A01N 25//00. - pub. 11/15/94.

180. Kudrya V.A., Simonenko L.A. Bacillus subtilis mədəniyyət mayesindən qələvi serin proteinaz və lektin izolyasiyası // Appl. Mikrobiol və Biotexnol. -1994.-V. 41,N5.-S. 505-509.

181. Le H., Anagnostopoulos C. Təbii olaraq meydana gələn plazmidlərin aşkarlanması və xarakteristikası // Molec. Gen. Genet. 1977. - V. 157. - S. 167-174.

182. Legakis N.J., Papavassilion J. Bakterial fosfolipazların sürətli aşkarlanması üçün nazik təbəqəli xromatoqrafik texnika // J. Clin. Mikrobiol.- 1975. V.2, N 5. - S. 373-376.

183. Leviveld H.L.M., Bachmayer H., Boon B. et al. Təhlükəsiz biotexnologiya. Hissə 6. Biotexnologiyada istifadə olunan mikroorqanizmlərin insan sağlamlığına münasibətdə təhlükəsizliyin qiymətləndirilməsi // Tətbiq. Mikrobiol və Biotexnol. 1995. V. 43, N 3. - S. 389-393.

184. Lin S.-C., Carswell K.S., Sharma M.M., Georgiou G. Bacillus licheniformis JF-2-nin lipopeptid biosurfactantının davamlı istehsalı // Appl. Mikrobiol və Biotexnol. 1994. - V. 41, N 3. - S. 281-285.

185. Lovett P., Bramucci M. Bacillidə plazmid DNT // In: Mikrobiologiya-Vaşinqton. 1976. - S. 388-393.

186. Markham R., Wilkie B. Yuyucu vasitənin sizin fermentlərlə aerozol allergik sensibilizasiyasına təsiri. subtilis // Int. tağ. Allergiya və Appl. İmmunol. 1976.-V. 51, N 5. - S. 529-543.

187. Maruta Kiyoshi Bacillus subtilis C-3102 ilə davamlı qidalanma yolu ilə bağırsaq patogenlərinin xaric edilməsi və broylerlərdə bağırsaq mikroflorasına təsiri // Anim. Sci. və Technol. 1996. - V. 67, N 3. - S. 273-280.

188. Moszer I., Glaser P., Danchin A. SubtiList: Bacillus subtilis genomu üçün əlaqəli verilənlər bazası // Mikrobiologiya. 1995. - V. 141, N 2. - S. 261-268.

189. Murray P.R., Baron E.J., Pfaller M.A., Tenover F.C., Jolken R.H., Manual of Clinical Microbiology, 7th Edition, Washington D.C., ASM Press, 1999

190. Nozari-Renard J. İnduksiya d 5, OInterferon par Bacillus subtilis // Ann. Mikrobiol. 1978. - V. 129a. - N 4. - S. 525-542.

191. Oh M.K., Kim B.G., Park S.H. Bacillus subtilis-in qidalanmış partiyası və davamlı fermentasiyası üçün spor mutantlarının əhəmiyyəti // Biotexnol. və Bioeng. 1995.-V. 47, N 6. - S. 696-702.

192. Payne Jewel M. Bacillus thuringiensis Hist izolatları aktiv ayanist nematodlardır / Patent N 5151363, C12 N 1/20, A 01 N 63/00, tətbiq. 07/27/90, nəşr. 09.29.92.

193. Pepys J., Hargreave F., Longbotton Y. Bacillus subtilis fermentlərinə ağciyərlərin allergik reaksiyaları // Lancet. 1969. - V. 1, N 44 - 7607. - S. 1181-1184.

194. Peterson W.L., Mackrowiak Ph.A., Barnett C.C. və b. İnsan mədəsinin bakterisid maneəsi: təsir mexanizmləri, nisbi antibakterial aktivlik və pəhriz təsirləri.//J. infeksiya Xəstəliklər. -1989. -159 No 5. -səh.978-985.

195. Prasad S.S.V., Şetna G.J. Bacillus thuringiensis-in zülal kristalının biokimyası bioloji fəaliyyətləri // J. Sci. və Ind. Res. 1976. - V. 35, N 10. - S. 626-632.

196. Rocchietta I. Xəstəliklərin müalicəsində Bacillus subtilis-in istifadəsi/Minerva Med. -1969. -60. N3/4. -P. 117-123.

197. Rosenthal G.J., Corsini E. // Metodlar İmmunotoksikol. 1995. V 1, S 327-343

198. Rychen G., Simoes Nunes C. Effets des flores lactigues des produits laitiers fermentes: Une base scientifigue pour l "etude des probiotiques microbiens dans l"espece donuz // Prod. anim. 1995. - V. 8, N 2. - S. 97-104.

199. Salminen Seppo Probiotiklərin kliniki aspektləri //Ekol. sağlamlıq və xəstəlik.-1999.- 11.-N4.-S. 251-252

200. Shore N., Greene R., Kezeni H. Bacillus subtilis-ə məruz qalan xəstələrdə ağciyər disfunksiyası // Environm. Res. 1971. - V. 4, N 6. - S. 512-519.

201. Slein M., Logan G., Sizin fosfolipazların xarakteristikası. cereus və onların eritrositlərə, sümük və böyrək hüceyrələrinə təsiri // J. Bacteriol. 1965. - V. 90, Nl.-P. 69-81.

202. Somerville H.J. Bacillus thuringiensis-in insektisid endotoksini // In: Sem. etüd mövzusu Məhsul, təbiət. və s. bitki. 1977. - S. 253-268.

203. Spira W., Goepfert J. Bacillus cereus tərəfindən istehsal edilən bir enterotoksinin bioloji xüsusiyyətləri // Can. J. Mikrobiol. 1975. - V. 21, N 8. - S. 1236-1246.

204. Stgard Henri Microbielle v kstfremmer til svin. Teori og prasksis/ Dan veterinaertidsskr. 1989. - V. 72, N 15. - S. 855-864.

205. Su Li, Zhang Zhihong, Xiao Xianzhi, Wang Xiaomin Wuhan daxue xuebao. Ziran kexue qadağası // J. Wuhan Univ. Təbiət. Sci. Ed. 1996. - V. 42, N 4. - C. 516518.

206. Sumi H. Nattonun fizioloji funksiyası // J. Brew. Soc. Yapon. 1990. - V. 85, N 8.-S. 518-524.

207. Tihole F. Fizioloski pomer backteriemije z geiunalo microflora // Zdravstv vestn 1982. - V. 51, N 1. S. 3-5.

208. Towalski Z., Rothman H. Enzim texnologiyası //in: The Biotechnological Challenge. Cambridge University Press. Kembric, 1986 - S. 37 -76.

209. Tsuge Kenji, Ano Takashi, Shoda Makoto. Bacillus subtilis YB8-in xarakteristikası, lipopeptidlərin surfaktin və plipastatin B1 birgə istehsalçısı //J. Gen. və Appl. Mikrobiol. 1995.- 41, N 6. S. 541-545.

210. Van der Waaij D. Həzm sisteminin kolonizasiya müqaviməti: mexanizm və klinik nəticələr.//Nahrung. -1987. -31 No 5. -səh.507-524.

211. Vollaard E.J., Klasener H.A.L., Janssen J.H.M. Escherichia coli-nin mikrob kolonizasiya müqavimətinə töhfəsi.//.!, Antimikrobiyal Kemoterapiya. -1990.- 26. -s.411-418

Nəzərə alın ki, yuxarıda təqdim olunan elmi mətnlər məlumat məqsədi ilə yerləşdirilib və tanınma yolu ilə əldə edilib orijinal mətnlər dissertasiyalar (OCR). Buna görə də, onlar qeyri-kamil tanınma alqoritmləri ilə əlaqəli səhvləri ehtiva edə bilər.
Təqdim etdiyimiz dissertasiya və avtoreferatların PDF fayllarında belə xətalar yoxdur.